QuantStdio 3D Digital PCR System  Digital PCR Reagents

PCR digital para obtener mayor precisión, sensibilidad y cuantificación absoluta

La PCR digital es un nuevo enfoque para la detección y cuantificación de ácidos nucleicos que ofrece un método alternativo a la PCR cuantitativa en tiempo real convencional para la cuantificación absoluta y la detección de alelos raros. La PCR digital funciona mediante la partición de una muestra de ADN o ADNc en muchas reacciones de PCR individuales en paralelo; algunas de estas reacciones contienen la molécula objetivo (positivo), mientras que otras no (negativo). Una sola molécula se puede amplificar un millón de veces o más. Durante la amplificación, se utiliza la química TaqMan® con sondas etiquetadas con tintes para detectar objetivos específicos de secuencia. Cuando no hay ninguna secuencia de destino presente, no se acumula ninguna señal. Tras el análisis de PCR, la fracción de reacciones negativas se usa para generar un recuento absoluto del número de moléculas de la muestra, sin necesidad de estándares ni controles endógenos.

El uso de un chip nanofluídico proporciona un mecanismo cómodo y sencillo para ejecutar miles de reacciones de PCR en paralelo. Cada uno de los pocillos está cargado con una mezcla de muestra, mezcla maestra y reactivos de ensayo TaqMan®, y se analiza individualmente para detectar la presencia (positivo) o ausencia (negativo) de una señal de criterio de valoración. Para representar los pocillos que pueden haber recibido más de una molécula de la secuencia objetivo, se aplica un factor de corrección mediante el modelo de Poisson.  

 

PCR digital
Ventajas de la PCR digital
  • No es necesario depender de referencias o estándares.
  • Capacidad para aumentar la precisión mediante más repeticiones de PCR.
  • Alta tolerancia a los inhibidores.
  • Capacidad para analizar mezclas complejas.
  • Detección lineal de pequeños cambios de plegado.
La PCR digital amplía las capacidades de las aplicaciones avanzadas

Los instrumentos y reactivos de la PCR digital mejoran el rendimiento de los ensayos TaqMan® actuales, lo que permite a las aplicaciones beneficiarse de mayores sensibilidad, precisión y cuantificación absoluta. 

Cuantificación absoluta, utilizando la tecnología de chip sellado, para obtener un método fiable y datos sensibles y precisos.

Encuentre los reactivos y consumibles que necesita para la cuantificación absoluta mediante PCR digital.

Aplicaciones de PCR digital

Detecte y cuantifique pequeñas diferencias porcentuales en el número de copias con un alto grado de precisión.

Detecte y cuantifique las mutaciones raras de objetivos de baja prevalencia en las muestras de investigación sobre el cáncer.

Cuantificación absoluta de cargas bacterianas y virales, y recuentos absolutos del patógeno.

Genere estándares de referencia absoluta para mediciones genéticas, metrología y comparaciones entre laboratorios.

Cuantificación absoluta de bibliotecas de NGS y validación de los resultados de secuenciación, sin patrones de referencia.

Detecte cambios de expresiones génicas de ± 10 % para la cuantificación de transcripción absoluta sin un gen de referencia.

Detecte patógenos de nivel bajo que causan enfermedades humanas a través del suministro de agua y alimentos contaminados.

Permite la detección y la cuantificación absoluta con sensibilidad de mutaciones de plantas y organismos modificados genéticamente.

Sistema de PCR digital 3D QuantStudio®

  • Datos absolutos con alta precisión y sensibilidad: detecte y cuente las moléculas individuales.
  • Flujo de trabajo simple: basta con cargar y buscar los datos digitales del sistema basado en chip.
  • Plataforma asequible: empiece a realizar PCR digital de inmediato y a un coste asequible.
  • Compatible: puede usar sus ensayos TaqMan® actuales de PCR en tiempo real.
  • Sistema sellado: ayuda a limitar los contaminantes mediante un chip sellado sin pasos de transferencia de muestra expuesta.
  • Amplio rango dinámico: obtenga linealidad en 5 logaritmos.
  • Intuitivo: vea los datos directamente en la pantalla táctil y realice análisis de forma eficaz mediante el software de PCR digital AnalysisSuite™ .