El entrecruzamiento es el proceso de unir químicamente dos o más moléculas mediante un enlace covalente. Los reactivos de entrecruzamiento contienen extremos reactivos para grupos funcionales específicos, tales como aminas primarias y sulfhidrilos, en proteínas u otras moléculas. La disponibilidad de varios grupos químicos en proteínas y péptidos los convierte en objetivos para la conjugación y el estudio con métodos de entrecruzamiento.

Los entrecruzadores se usan para la identificación de las relaciones con proteínas cercanas e interacciones entre ligando y receptor. Los ésteres NHS o imidatos aminorreactivos y homobifuncionales, así como las fenilazidas fotoactivables, aminorreactivas y heterobifuncionales son los entrecruzadores más utilizados para estas aplicaciones. 

Los entrecruzadores también se suelen usar para modificar los ácidos nucleicos, los fármacos y las superficies sólidas. Se aplica la misma química al etiquetado y la modificación de la superficie de aminoácidos y ácidos nucleicos. Esta área de la química se conoce como bioconjugación e incluye el entrecruzamiento, la inmovilización, la modificación de la superficie y el etiquetado de las biomoléculas.

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Categorías de entrecruzamiento de proteínas destacadas

Reactivos de entrecruzamiento de proteínas específicos de aminas homobifuncionales basados en los grupos de reactivos imidoéster y NHS-éster para la conjugación selectiva de aminas primarias; disponibles en variedades corto, largo, disociable, irreversible, con membrana permeable y de superficie celular.

Reactivos de entrecruzamiento basados en los grupos reactivos de maleimida e hidrazida para la conjugación y la formación de entrecruzamientos covalentes 

Reactivos de entrecruzamiento específico de sulfhidrilo homobifuncionales basados en los grupos reactivos de maleimida o piridilditiol para la conjugación covalente selectiva de proteínas y péptidos tioles (cisteínas reducidas) para formar enlaces de tioéter estables. 

Aril azida, diazirina y otros reactivos de entrecruzamiento heterobifuncionales químicos fotorreactivos (activados mediante la luz) para conjugar proteínas, ácidos nucleicos y otras estructuras moleculares involucrados en complejos de interacción entre ligando y receptor mediante la activación de dos pasos.

Reactivos de entrecruzamiento de proteínas heterobifuncionales para la conjugación entre grupos de amina primaria (lisina) y sulfhidrilo (cisteína) de proteínas y otras moléculas; disponibles con diferentes longitudes y tipos de brazos espaciadores.

La ligación quimioselectiva se refiere al uso de pares mutuamente específicos de reactivos de conjugación. Con mayor frecuencia se usan para el etiquetado metabólico in vivo. 

Consulte nuestros diferentes tipos de reactivos de entrecruzamiento in vivo para dirigir proteínas intracelulares o de la superficie de la célula y albergar distintos métodos de análisis posteriores.

Reactivos de entrecruzamiento de carbodiimida, DCC (N,N'-diciclohexilcarbodiimida) y EDC (1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida hidrocloruro) (EDAC), para conjugar grupos carboxilo (glutamato, aspartato y extremos C) con aminas primarias (lisina y extremos N) y también NHS (N-hidroxisucinimida) para una activación estable de carboxilatos para la conjugación de aminas.