生物制药行业正在发生一场革命。生物治疗药物是目前增长很快的医药行业细分市场,年增长率超过 12%。此外,按照美元价值排序的前十大药品中有七个都是生物治疗药物。然而这些生物制剂的研究与 开发都极具挑战。赛默飞基于行业发展的需求,创新科技支撑为动力的制药行业整体解决方案,引导更 为高效的制药行业发展流程。凭借合规和创新的产品与服务,为客户提供成熟制药行业整体解决方案。

药物靶点研究——靶点筛选

 

在生物制药研发过程中,新型药物的设计和筛选都是通过已知的药物靶点来完成的,因此对药物靶点的筛选就成为药物开发过程中的分析系统和常规PCR 系统,对靶点筛选中常用的SNP、CNV、基因突变、 融合、插入和缺失进行检测,尤其芯片技术结合高通量测序技术还可以高效快速地对大样本进行检测, 大大节约了靶点筛选的时间和成本。还可以运用质谱技术对代谢组学和蛋白组学中相关基因的表达差异 性直接进行筛选,直接作为候选靶点研究。

基因测序技术筛选

research-Ion-Proton

Ion Proton™ 系统台式基因组测序中心

高通量、快速,适于发现新的基因变异

research-ion-2

Ion Chef™ 系统

全自动化减少人为因素造成的差异性,省时省力

research-ion-1

Ion Torrent™ 半导体测序仪

可扩展性、简便性和测序速度,适合于每一个实验室

research-ion-3

Applied Biosystems™ 毛细管基因分析仪

测序和片段分析的金标准

Ion Proton 系统台式基因组测序中心

杂交瘤细胞筛选

Ion Proton™ 测序仪是基于新一代半导体测序技术, 此技术已让Ion PGM™ 测序仪成为世界上销售很快的 测序仪。

数据分析一直是全基因组测序的瓶颈,Ion Proton™ 同样可以在一台独立的服务器上当天完成。

Ion Proton 测序仪优点

快速

利用简单、特异和快速的PCR 技术,全外显子组富集可在一个小时之内完成

高效

能够实现高度均一性,10× 测序时目标碱基覆盖率超过94%

高效

点击按钮进行设置和数据分析,即可完成生物信息学的整合

高效

高达10GB

 

主要应用

  • 全转录组测序
  • 小RNA 测序
  • 甲基化测序
  • microRNA 测序
  • 外显子组测序
  • 人类规模的基因组测序

Ion Torrent 个人化操作基因组测序仪(PGM)

单克隆抗体热稳定性、效价测定

Ion Torrent™ 个人化操作基因组测序仪(PGM™),设计配合 革新性的半导体芯片技术,使整个平台具有极高的扩展性和 快速完成测序的性能。

Ion Torrent 具有以下优点

发现扩展

比拟半导体技术升级的强大扩展性
  • 技术的基础以超过千亿美金规模的半导体产业为支持
  • 芯片密度的提升以40年来累积验证的摩尔定律为证据

发现简捷

简单真实的生物化学原理
  • 真实的离子流测序原理
  • 无修饰的核酸,无需酶化学级联,无需任何荧光和化学发光

发现快速

直接,实时的测序技术
  • 快速的运行时间提速研究周期和文章的发表
  • 革新性的半导体测序芯片,无需光学检测和扫描
 

主要应用

  • 扩增子测序,多重扩增子测序用于快速的检测生殖细胞和体细胞的突变
  • RNA 测序,快速,简单的RNA 测序解决方案
  • 验证全基因组和外显子组的突变
  • 人类全转录组测序RNA-Seq
单克隆抗体热稳定性、效价测定

Ion Chef 系统

简单、重复性好、全自动的模板制备和芯片上样
Ion Chef™ 系统简化了Ion Proton™ 和Ion PGM™ 系 统的流程,为模板制备和芯片上样提供了一个全自动 的高通量解决方案。

Ion Chef 系统的优点如下

  • 简单、自动化的流程
  • 降低人为因素造成的差异性
  • 省时省力
  • 支持IonPGM™ 和Proton™ 系统

主要应用

  • Ion Chef™ 系统简化了Ion S5™、Ion Proton™ 和Ion PGM™ 系统的工作流程。
  • 提供了可无人值守的、可重复的自动化Ion AmpliSeq 文库制备和自动化模板制备及芯片上样的解决方案。

Applied Biosystems 毛细管基因分析仪

利用毛细管电泳开展DNA 测序和片段分析

3500 & 3500XL 基因分析仪

research-ion-3

3500 系列仪器优势

  • 先进的多色荧光分析能力,可对DNA片段进行多达6 种不同
  • 505nm 单波长固态长寿激光源
  • 强大、综合的数据采集和初步分析软件
  • 简单的安装、操作和维护
research-ion-4

3730 & 3730XL 基因分析仪

3730 和3730XL 仪器优势

  • 毛细管电泳系统上较长的读长
  • 可开展重测序、微卫星分析、AFLPTM、LOH、SNP 筛选和验证
  • 48 小时连续、无手动操作的自动化操作
  • 多重自动化性能可提高生产力,同时减少了人为失误造成的损失

主要应用

  • 利用毛细管电泳开展DNA 测序和片段分析
  • 突变检测和分析、SNP 发现和验证、等位基因鉴定和序列确认
  • 用于甲基化DNA 测序
  • 提供高质量的峰图、共有序列和突变位点测定

药物靶点研究——靶点验证

 

靶点验证通常首先就是确认候选靶点在细胞实验中是否具有调节化合物的生物活性,常用的实验方法有基因沉默和过表达,来正反验证候选靶点是否具有引起细胞生命的相关变化,通常涉及到细胞周期变化,细胞凋亡与坏死,细胞免疫反应等。因此针对靶点验证环节,我们可以可供详尽的筛选验证解决方案,可供选择的筛选验证工具有:高内涵细胞定量成像分析系(HCA)、基因编辑文库、基因编辑检测技术、定量检测技术(RT-PCR/qPCR)、流式细胞筛选技术。

基因编辑文库类型

 
miRNA 模拟物和抑制剂文库
Silencer Select siRNA 文库
LentiPool CRISPR 文库
LentiArray CRISPR 文库
简介
化学修饰的合成核酸,可用于 模拟成熟miRNA,或者结合并 抑制内源
超强siRNA 敲除基因表达
慢病毒表达载体中的 gRNA 混合文库,提供 了强效的导入方法,可 以在同一试管内实现完 全的基因敲除
慢病毒表达载体中的gRNA 阵列文库,提供了强效的导 入方法,可以在同一试管内 实现完全的基因敲除
RNA 类型
miRNA 寡核苷酸
siRNA 寡核苷酸
全长gRNA
全长gRNA
作用机制
内源性RNA 诱导沉默复合体 (RISC)
内源性RNA 诱导沉默复合 体 (RISC)
Cas9 核酸内切酶介导 的插入缺失形成
Cas9 核酸内切酶介导的插入 缺失形成
对基因表达的影响
瞬时抑制
瞬时抑制
永久且完全的基因敲除
永久且完全的基因敲除
作用时间
2-3天
2-3天
2-4天
2-4天
种属
人、小鼠、大鼠
人、小鼠、大鼠
形式
阵列或混合
阵列或混合
混合、即用型慢病毒
阵列、即用型慢病毒或含有 慢病毒载体的细菌甘油储液

RNAi 文库

siRNA 文库

适合体外RNAi 应用的超强siRNA 可以高效敲除基因表达,是研究各种细胞类型中蛋白质功能的很好的途径。 Invitrogen™ Silencer ™ 和Silencer ™ Select siRNA 文库,提供融合了siRNA 设计、脱靶效应预测算法 和化学修饰方面最新进展研究,可改善链偏差,加快各种基因类别的功能基因组筛选,且可保证获得的 高准确度和高精度。

Silencer Select siRNA 主要应用

  • 高效— 保证至少两条siRNA 达到>70% 的靶mRNA 沉默水平,有助于减少额外的siRNA 检测、假阴 性, 也能避免错过有价值的科学发现
  • 特异性— 精确的mRNA 靶点识别有助于避免假阳性,帮助减少耗时且高成本的脱靶验证
  • 效价— 较其他siRNA 的效价高100 倍,降低了单位实验成本和脱靶效应

siRNA 文库类别及特点

特点 类型
Stealth RNAi Stealth RNAi siRNA Silencer Select siRNA
经济高效的 极佳的抑制效果,低脱靶效应 优秀的抑制效果,较低的脱靶效应
效价 20nM推荐浓度 20nM推荐浓度 5nM推荐浓度
高效(抑制率>70%) 保证3条siRNA中的2条 保证3条siRNA中的2条 保证2条siRNA中的2条
特异性 中等 很高
覆盖 编码RNA 编码RNA 编码和非编码RNA
目标种展 人、小鼠、大鼠
( 其他种属使用定制工具)
人、小鼠、大鼠
( 其他种属使用定制工具)
人、小鼠、大鼠
( 其他种属使用定制工具)
推荐产品 Silencer Pre-designed siRNA,
5 nmol ( 货号. No. AM16708)
Stealth RNAi siRNA, tube
( 货号. No. 1299001)
Silencer Select Pre-designed siRNA,
5 nmol ( 货号. No. 4390771)

miRNA 文库

可供选择的miRNA 文库提供Invitrogen™ mir Vana™ miRNA 模拟物和抑制剂是化学修饰的合成核酸,可 用于模拟成熟miRNA,或者结合并抑制内源性miRNA 选择。

  • 出众的miRNA 特异性
  • miRNA 抑制剂可结合并抑制内源性miRNA

mirVana miRNA 模拟物和抑制剂特点

  • 功能多样— 可用于体外和体内的即用型产品,能够在整个研究中提供一致性和特异性
  • 高效价— 无毒性和免疫刺激性,是体内研究的关键
  • 以高通量筛选文库的形式提供— 最新miRBase 序列内容
  • 及时更新— 经常根据miRBase 数据库序列更新

定制文库服务

作为合作伙伴,我们从始至终与您通力合作,帮助您加速研究,并提供定时文库服务。

CRISPR 文库

将CRISPR-Cas9 技术应用于高通量筛选,利用质量控制优化分析设计,高质量的对照是成功筛选的关键。 赛默飞提供阴性对照、阳性对照、导入对照,其靶向基因编辑原理见下图。

LentiArray CRISPR 文库

LentiArray CRISPR 文库是在慢病毒表达载体中构建的gRNA 阵列文库,它提供了一种强效的导入方法, 使您可以在各种细胞类型中进行高通量筛选。

LentiArray CRISPR 文库慢病毒构建图谱

LentiArray 文库的优势

  • 形式灵活的阵列文库
  • 先进的gRNA 设计,使基因敲除效率最大化,且不影响特异性
  • 每个基因靶点提供多达4 种高质量的gRNA
  • 一整套对照简化了分析开发
  • 提供19 种预定义文库和定制方案,使您可以重点研究确定的基因组,或者进行无偏差的全基因组调查
  • 提供单个gRNA和定制阵列,以支持快速分析开发和活性样品验证

LentiPool CRISPR 文库

可提供的预定义文库服务

预定义和定制文库使您可以重点研究确定的基因组,或者进行更广泛的筛选。我们可提供miRNA、 siRNA、gRNA 和慢病毒形式的文库。

基因编辑效率检测

在基因编辑研究基因功能时,我们希望提高编辑的效率, 但同时也要保证不会在基因组的其他部位导致改 变,除了前期提高对设计筛选的质量外,后期也要提高对基因编辑效率的检测技术,以便高效地对候选 靶点进行验证,快速高效地确定功能靶点,因此针对基因编辑技术,我们可以提供配套的快速、高质量 基因编辑表型分析系统服务。

利用显微镜检测基因编辑的效率

EVOS 细胞成像系统在CRISPR 分析中的解决方案

research-CRISPR-2

细胞健康测定

CRISPR 编辑的起点是健康的细胞。在编辑前先进行 细胞健康分析可以作为严格的质控步骤,避免浪费时 间和试剂。

流程优化

抗生素筛选、基因表达和免疫细胞化学分析常用于监 测CRISPR 组分的组装,利用抗生素筛选鉴别转染细 胞时,可采用存活率分析监测筛选,方便的筛选方 法是使用显微镜。

 

Cas-9 表达

免疫细胞化学是鉴别细胞中特定蛋白质的标准技术。 使用抗Cas-9 一抗和标记二抗,利用荧光成像可检测 细胞中的Cas-9 表达。

表型分析

CRISPR-Cas9 系统常用于基因敲除、基因嵌入或基因 表达调控。免疫细胞化学提供了一种监测生物学相关 系统中特定蛋白调控的方法。在有特定的抗体可用的 情况下,成像提供了一种相对简单且高质量的方法, 在细胞水平上探索蛋白质的表达。

 

体外靶标作用检测

高内涵细胞定量成像分析系统,综合了自动化高通量显微成像和大数据定量分析,在一次实验中同时获 得细胞( 组织或生物体) 明场或荧光显微成像、多重靶标分子表达量、时间和空间信息、细胞及亚细胞形 态结构信息。在生物制药中(例如抗体药物筛选),高内涵筛选也可以提高筛选效率。

高内涵筛选(HCS) 系统技术优势

  • 自动化高通量药物作用细胞形态成像
  • 同一实验多参数( 多标记)、多维度( 时间、空间等) 数据定量分析
  • 细胞个体或群体靶标分子定量检测和表型定量检测
  • 一键式抗体药效、作用机理及毒性评价
  • 大数据生物信息学分析

高内涵筛选(HCS) 系统可提供的解决方案

Thermo Scientific™ CellInsight™ 高内涵筛选系统被广泛应用在药物筛选领域,涉及肿瘤癌症、心血管 疾病、免疫疾病、代谢疾病、神经退行性疾病。同时在生物制药中(例如抗体药物筛选),高内涵筛选 也可以提高筛选效率。从高通量细胞成像到定量表型分析,进而对相关生物学信息挖掘,一键式提供抗 体药效、细胞毒性等评价信息。

 

血管生成

细胞凋亡-TUNEL

细胞自噬

轴突生长

细胞凋亡 -Caspase 检测

 

突触生成

细胞活力

细胞增殖

细胞骨架重排

细胞内吞

 

细胞周期和
有丝分裂指数

干细胞分化

线粒体健康

转录因子激活

氧应激

 

荧光定量检测技术

我们提供的荧光定量PCR 平台技术不仅可以用于生物制药研发过程中对靶点的筛选,还可以在靶点验证 过程中对候选靶点引起的基因表达标志物的检测,使用方便、灵敏度、高,且能够在不同实验室中进行 标准化,从而获得一致可靠的结果。

荧光定量PCR 平台优势

  • 实时荧光定量PCR 的业界领导者
  • 高品质源自二十余年不断研发与改进
  • 多款不同型号满足各种类型实验室的不同需求
  • 先进的多色荧光分辨技术
  • 稳定可靠的热循环系统
  • 功能强大的配套软件

荧光定量PCR 平台

 
StepOne/StepOne Plus 系统
7300 系统
7500/7500 Fast 系统
7900HT Fast 系统
Quantstudio 7 系统
QuantStudio 12K Flex 系统
荧光通道
3/4
4
5
激光光源, 500-660nm 连续 波长检测
6 色通道
(21 种荧光组合)
6 色通道
(21 种荧光组合)
支持模块
48/96 孔
96孔
96 孔/ 快速96 孔
96 孔、快速96 孔、 384 孔&TaqMan Array 芯片
96 孔、快速96 孔、 384 孔&TaqMan Array 芯片
96 孔、快速96 孔、384 孔 &TaqMan Array 芯片&3072 通 孔OpenArray 芯片

解决方案一:QuantStudio 12K Flex 实时荧光定量PCR 系统 +
商品化OpenArray PGx Panel

  • OpenArray 技术是一种应用范围极广的纳升微流体技术平台,可用于超小提及液相反应,OpenArray 技术结合的QuantStudio 12K Flex 实时荧光定量PCR 系统,作为一款全能平台,为药物基因组学研究 及检测带来极大的便利和精准的结果
  • 基于QuantStudio 12K Flex 系统的工作流程(从样本提取到结果输出)

解决方案二:QuantStudio 12K Flex + 客户定制OpenArray Panel

如果以上商品化Panel 不能满足客户的要求,基于OpenArray 灵活方便的“ 样本/ 检测位点数” 格式, 赛默飞提供2700 多种独特的 Taqman Drug Metabolism Assay (Taqman DME Assay) 及丰富的SNP Genotyping Assay 和Copy Number Assay 供客户选择,以定制满足需求的个性化Panel。

可用于Genotyping 和表达分析的
Genotyping/CopyOpenArray 格式

Genotypinc 检测
位点数
样品数
12
144
26
96
60
48
120
24
180
16
240
12
表达分析检测
位点数
样品数
18(3x)
48
56
48
112
21
120
24
168
16
224
12
 

TaqMan SNP Number Assay

TaqMan SNP Genotyping/Copy Number Assay

620 万 TaqMan® SNP Genotyping Assays

160 万 TaqMan® Copy Number Assays

客户定制 TaqMan® Assay

解决方案三:常规qPCR 平台 + 客户定制Assay/Panel

如果实验室已有常规荧光定量PCR 设备,可以按照需求订购以上TaqMan DME Assay、SNP Genotyping Assay 及Copy Number Assay,进行药物基因组学靶点的检测,操作与其他定量PCR 检测一样简单。

流式细胞筛选技术

在药物靶点验证阶段,流式细胞术对靶点下游功能的验证起到了重要的作用。应用流式细胞术对候选靶点可能引起的细胞生理病理变化进行检测,把那些能够引起明显细胞反应变化的候选靶点作为重点研究对象,结合前面介绍的多种验证手段综合评估。针对流式细胞技术,我们专为实现高效能结果、节约实验室时间而设计,以此为细胞及其功能分析提供全方位解决方案。

Attune NxT 流式细胞仪

全新的台式流式分析仪,采用创新的声波聚焦技术,灵活配置,高达4 激光14 色系统。

 

Attune NxT 流式细胞仪优势

  • 稀释样本,但不影响数据质量
  • 利用声波聚焦快速分析稀有细胞
  • 体积检测和细胞绝对计数
  • 模块化设计,满足所有实验室需要或预算要求
  • 4 激光16 参数,满足常规多色实验需求
  • 全新的光学设计,最大程度减少仪器故障
  • 稳定的光路,保证很好的灵敏度
  • 满足您各种需求的软件系统
  • 可配备自动上样器和自动化机械手臂,实现高通量筛选和自动化快速处理多个样本

可提供的解决方案

  • 细胞凋亡检测
  • 细胞周期检测
  • 细胞增殖检测
  • 细胞活性检测
  • 流式细胞分析抗体
  • 流式细胞RNA 分析技术

构建表达

 

前期通过筛选和下游功能实验初步验证的候选靶点,我们希望能通过靶点的结构生物研究来了解作为在 生物制药研发过程中的靶点,能够引起生物体反应的具体分子机理是怎样的?结构决定功能,蛋白功能 的实现是通过具体结构参与到信号通路中起作用,引起细胞生理病理变化的,所以对蛋白结构的正确分 析是决定其能否作为药靶的关键所在,针对蛋白分子生物学研究,我们可以提供一整套完整的蛋白表达 解决方案,帮助企业和实验室展开研究。

表达载体构建

在进行蛋白结构与功能以及作用机制时,正确的基因序列以及表达阅读框是保证研究成功基础的部分。 从限制酶到基因合成,我们可提供各种工具和资源,帮助您获得高质量的克隆DNA,同时也提供了定制 基因合成服务来优化克隆和表达。

表达载体构建流程

research-express

可供选择的DNA 克隆工具

 
限制酶克隆
TOPO克隆
Gateway克隆
GeneAr无缝克隆
GeneArt 第二型限制酶组装试剂盒
GeneArt Strings DNA片段
GeneArt基因合成
主要优点
• 灵活且经济
• >95% 效率,5 分钟PCR克隆
• 适用于其他多种克隆系统
• 在多种表达系统中进行 ORF 穿梭
• ≤4 个片段( 共达40kb) 的无缝定向克隆
• ≤8 个片段( 达20 kb) 的无缝定向克隆
• 针对极小的重复序列十分高效
• 合成的线性DNA 片段可用于克隆( 采用您选择的方法)
• 经过序列验证
• 在载体中自定义克隆基因
• 经过序列验证
• 可以优化以实现很高的表达
技术基础知识
• 限制性酶切和连接
• 基于拓补异构酶的克,无需连接酶
• 一步法,实现定向且位点特异性DNA重组
• 无需限制酶和连接酶
• 使用重叠序列进行末端同源性重组
• 在一个反应中完成第二型限制性酶切和连接
• 从合成寡核苷酸组装而成
• 150–3,000bp,还可提供随机碱基的文库形式
目的DNA 克隆至载体内
• 100% 序列验证,且带有质量保证文件
需要DNA 原材料( 质粒中的基因、文库等)
 
 
使用自选载体
 
*

* 载体需要采用Gateway 载体转换系统和One Shot ccdB Survival 细胞进行转换。

蛋白表达

通过重组蛋白表达技术可以帮助靶点蛋白结构正确的表达,以便研究蛋白质结构和功能。选择合适的蛋 白表达系统, 以保证不同实验对蛋白结构不同的需求。

细菌蛋白表达系统

主要应用

  • 规模可扩展的解决方案,较少的翻译后修饰
  • 简单的培养条件
  • 快速且经济地生成大量蛋白质
  • 常规的T7 表达-- 适用于大肠杆菌,pRSET 和Gateway™ pDEST™ 载体中的无毒重组蛋白的表达
  • 低成本
  • 很高的蛋白表达水平-- 我们强效的启动子可实现很高蛋白产量Champion™ pET SUMO 表达系统调控表达, 采用pBAD 表达系统严格调控有毒蛋白质的表达, 并优化蛋白质溶解度

酵母蛋白表达系统

酵母表达系统应用

  • 稳健的生长和蛋白表达
  • 适用于大规模制备真核蛋白
  • 适用于小的胞质蛋白
  • 执行一些简单的翻译后加工

昆虫蛋白表达系统

昆虫表达系统特点

昆虫细胞可提供高蛋白表达水平,带有适当的翻译后修饰,易于放大且细胞生长条件简单,可方便地转 换为高密度悬浮培养,从而用于大规模的蛋白表达。杆状病毒表达系统功能强大、用途多样,可用于在 昆虫细胞中高水平表达重组蛋白。

  • 与哺乳动物系统类似的翻译后修饰
  • 相对更易于扩大规模
  • 较哺乳动物系统更高的产量

ExpiSf 昆虫蛋白表达系统

Gibco™ ExpiSf™ 是首个化学成分确定的昆虫蛋白表达系统,可实现一致的细胞生长和蛋白表达,彻底告别波动的结果。 蛋白产量远超传统的昆虫表达平台,且所需时间更短。其适用于从开发到生产的各种 规模,可实现相同体积得率,是发现新疗法的理想系统。

哺乳动物蛋白表达系统

Expi293 哺乳动物蛋白表达系统

Expi293™ 表达系统是瞬时表达技术的一次巨大进步,可在哺乳动物细胞中实现快速且超高产量的蛋白生 产, 高效表达正确折叠的活性蛋白, 特别适合于结构生物学研究。

  • 在哺乳动物细胞中实现快速且超高产量的蛋白生产
  • 生产正确折叠的活性蛋白和组装复合物
  • 快速简单的实验方案

Expi293™ 表达系统还可与MembranePro™ 技术相结合,膜蛋白产量增长 > 20 倍

  • 高效- 相比贴壁培养系统,膜蛋白产量增长>20 倍
  • 规模可扩展- 无需多个培养瓶即可轻松扩大培养规模
  • 易于使用- 无需通过酶或机械方法解离细胞

ExpiCHO 哺乳动物蛋白表达系统

Gibco™ ExpiCHO™ 哺乳动物瞬时表达系统在CHO 细胞的重组蛋白瞬时生成方面带来了革命性的飞跃。 这款已经过全面优化的系统可以获得高达3 克/ 升的蛋白产量,可使您在药物研发过程的早期快速且经济 地获得CHO 表达的蛋白,为您提供了很高的可信度,瞬时表达的候选药物将模拟在CHO 中生产的下游 生物治疗药物。

  • 更出色的瞬时表达系统

该表达系统将高表达的CHO 细胞系、化学成分确定的无动物 源性培养基、优化的培养辅料及高效转染试剂相结合,滴度较 Gibco FreeStyle CHO 表达系统高160 倍, 较Gibco Expi293 表达系统高3 倍,人IgG 表达水平可达3g/L。

  • 简单且规模可调的蛋白生产

ExpiCHO 表达系统提供了简单且灵活的实验方案,可以在蛋白 产量、速度和规模上实现完美的平衡,满足您特定的需要或应 用要求。

蛋白分离和纯化

基因工程表达的蛋白,由于蛋白质的异质性,没有一种方法或试剂能适用于所有蛋白质的分离和纯化。 蛋白分析的第一步是细胞抽提。裂解完成后,抽提所得蛋白可能需要进一步纯化 ( 采用诸如透析、脱盐或 浓缩等技术),也可以通过免疫沉淀或亲和纯化进行目的蛋白的富集或完全分离,具体取决于工作流程的 后续步骤。

research-protein-separation

蛋白分离

蛋白质抽提

特点:配方温和,可很大程度地提高蛋白产量和活性

  • 优化 —— 配方可很大程度提高蛋白质产量并保留蛋白质活性
  • 高效 —— 不同的亚细胞结构之间几乎无交叉污染
  • 兼容 —— 提取物可直接用于大多数下游应用
  • 温和 —— 无需机械法破碎细胞,适用于大多数样品类型

透析

易于操作的装置、透析卡和透析瓶,实现安全的样品处理

产品特点及应用

  • 卓越的样品回收率 —— 相较于过滤和树脂体系,低结合性的塑料和膜可以很大程度地减少样品损失
  • 方便 —— 易于握持,方便使用注射器和/ 或移液器进行加样和取样
  • 安全 —— 密封膜有助于防止渗漏,而透析袋和自制装置可能产生渗漏
  • 经过验证 —— 每个产品装置都在生产过程中通过漏液检测

脱盐

方便的离心柱和离心多孔板形式,帮助确保快速脱盐和高蛋白回收率

Zeba 脱盐产品
Zeba 脱盐产品

特点

  • 高效 —— 专有的树脂具备出色的蛋白回收率 和干扰物去除率
  • 灵活 —— 根据需求提供一系列的产品形式, 包括离心柱、离心多孔板和色谱柱
  • 快速 —— 无需坐等蛋白重力排出,也无需检 测流份
  • 经济 —— 提供比其他同类产品更优异的性价比ThermoScientific™ Zeba™ 脱盐产品,具有高水平的蛋回收率,对盐和其他小分子的截留率 ( 即去除率) 高于 95%

浓 缩

易于使用的装置,可实现快速高效的浓缩

蛋白浓缩管
蛋白浓缩管

特点

  • 快速处理 —— 独特的设计可以很大程度地减少膜堵塞,使用10K MWCO ( 其他 MWCO 装置的时间可能有所差异) 在 5–30 分钟内完成样品的 10 至 30 倍浓缩,包括颗粒负载型溶液
  • 高回收率 —— 保留 >90% 的蛋白质样品,同时可以去除污染物或置换缓冲液
  • 便捷 —— 标识清晰,样本槽宽,可拆卸的滤室使操作变得简单轻松
  • 仪器兼容 —— 可与采用定角或水平转头的标准离心机结合使用

蛋白纯化

蛋白结构生物学的上游工作只是为了拿到正确表达产物的基础,克隆与表达的关键是要拿到纯的表达产 物,研究其生物学功能。相对与上游工作来说,分子克隆的下游蛋白纯化工作非常复杂,除了要保证纯度外, 还必须保持其生物学活性,重复性要好,所以这就要求要选择应用适应性非常强的方法去纯化蛋白。

选择合适的纯化策略

 
离子交换纯化
抗体纯化
融化蛋白质纯化
生物素亲和纯化
蛋白质固定
纯化程度
中到高(取决于具体应用)
可选的配体或化学试剂
强阴离子交换(SAX)、强阳离子交换(SCX)
Protein A,Protein G,Protein A/G,Protein L,Melon™ 凝胶
Ni-NTA,钴,谷胱甘肽,Anti-c-Myc,Anti-HA,Anti-Flay
亲和素,链霉亲和素NeutrAvidin™ 中性亲和素,单体亲和素
与氨基、巯基、羰基、羧酸以及其它基团反应的活化基质
可选填料类型
POROS 树脂
琼脂糖、磁珠、POROS 树脂磁性琼脂糖
琼脂糖、Superflow琼脂糖、磁珠、磁性琼脂糖
琼脂糖、磁珠
琼脂糖、磁珠
包装规格
散装树脂
散装树脂或微珠、离心柱和试剂盒、色谱滤芯、96 孔离心板
散装树脂或微珠、离心柱和试剂盒、色谱滤芯、96 孔离心板
散装树脂或微珠、离心柱和试剂盒、色谱滤芯、96孔离心板
散装树脂或微珠、干粉、离心柱和试剂盒

选择您的分离策略并查找您的产品

选择情况
磁珠的表面包被
需要的配体类型
质谱兼容性
非特异性结合
IP 实验方案耗时
主要优点
产品
蛋白特异的抗体
蛋白 A、G 或 L
大多数种属的一抗。蛋白 A、G 和L 结合不同的抗体种属和亚类,特异性不同。
Dynabeads:<40 分钟Pierce 磁珠:130–180分钟
Dynabeads —— 快速、简单的实验方案,非特异性结合水平较低、产量和可重复性较高
Dynabeads 蛋白 A
Dynabeads 蛋白 G
Dynabeads 蛋白 A 免疫沉淀试剂盒
Dynabeads 蛋白 G 免疫沉淀试剂盒
Pierce 蛋白A/G 经典免疫沉淀试剂盒
Pierce 蛋白A/G 交联法免疫沉淀试剂盒
Pierce 蛋白 A/G 磁珠
Pierce 蛋白 L 磁珠
二抗
小鼠 IgG 或兔 IgG
否†
Dynabeads:<40 分钟
• 快速简单的实验方案
• 低非特异性结合
• 小鼠或兔 IgG 的特异性
结合
Dynabeads M-280 山羊抗小鼠 IgG
Dynabeads M-280 山羊抗兔IgG
环氧树脂 活化的 磁珠
任意蛋白质配体( 如抗体、肽)
超低
Dynabeads:抗体结合时间:过夜;Co-IP 实验方案时间:30–40 分钟
• 抗体的共价结合可实现超低的非特异性结合
• 无需交联
• 针对较大的蛋白质复合实现温和高效的Co-IP
Dynabeads 抗体偶联试剂盒
Pierce 免疫共沉淀试剂盒
生物素化的抗体
链霉亲和素
任意生物素化的抗体或配体
30–40 分钟
• 结合任意生物素化蛋白
• 适用于可溶性 IgG 含量高的样本
• 可结合缺乏 Fc 区域的重组抗体
Dynabeads M-280 链霉亲和素
Dynabeads M-270 链霉亲和素
Dynabeads MyOne 链霉亲和素 C1
Dynabeads MyOne 链霉亲和素 T1
Pierce 链霉亲和素磁珠
重组蛋白
融合标签
不同磁珠结合具有下列标签的蛋白质(His、GST、HA、cmyc、Flag)
 
• 纯化具有同标签的许多不同的蛋白质
• 无需抗体
请登录 thermofisher.com/fusionprotein purification 查看产品概述

蛋白定量和分析

对细胞裂解物或纯化的蛋白质进行分析,以确认产量或将多个样本标准化从而进行平行比较。除免疫沉 淀、凝胶电泳和蛋白质免疫印迹技术外,还可以采用各种分析方法定量蛋白质或进一步鉴定蛋白质性质, 包括 ELISA、Luminex 分析、蛋白质芯片、酶和蛋白质活性分析、报告基因分析和蛋白质相互作用分析。

蛋白质定量检测

Pierce™ BCA 蛋白检测试剂盒

research-ion-5
  • 高兼容性
  • 高灵敏度
  • 极好的一致性

Micro BCA™ 蛋白检测试剂盒

research-ion-7
  • 高灵敏度
  • 高线性工作范围
  • 检测低丰度蛋白

Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白检测试剂盒

research-ion-6
  • 高灵敏度
  • 快速检测
  • 使用更便捷,室温孵育 5 分钟即可完成

Luminex 分析

引用广泛的产品,适用于单重分析或多重分析的蛋白质定量

Invitrogen™ 多重分析产品采用 Luminex™ x MAP™ ( 多靶点检测) 技术,可在单个孔内实现快速高效的 多种蛋白质分析。当样品量有限时,这一点非常关键。重要的是,进行多重分析,您能够对珍贵样品 进行更全面的蛋白信号转导研究。

特点

  • 快速高效的多重分析技术 —— 仅使用 15-50 μL 样品/ 孔同时分析多个点
  • 高度特异的结果 —— 与其他靶点几乎无交叉反应性的定量分析
  • 业内优秀服务 —— 我们的技术支持团队可在每个步骤为您提供帮助

蛋白分析

质谱 (MS) 是一种功能强大的分析工具,用于蛋白质组学研究和药物开发。MS 可以通过显示化合物的结 构和化学特性,鉴别并定量已知和未知的化合物。由于样品抽提和制备的质量和可重复性对质谱仪的分 离及鉴定性能影响很大,因此用于 MS 分析的样品制备是否得当,是蛋白质组学工作流程的关键步骤。

质谱流程图

Western Blotting

research-Western-Invitrogen-iBright

蛋白凝胶成像系统— Invitrogen iBright 智能成像系统

Invitrogen iBright 智能成像系统CL1000 和FL1000, 主要应用于生命科学领域的蛋白质研究,可以轻松、高 效实现化学发光Western blot 印迹、荧光印迹、蛋白 凝胶、核酸凝胶成像以及数据分析。

主要特点

  • 小体积,大视野:集成化的12.1 寸全触屏一体机,一次可成像四块小型印迹膜或者凝胶
  • 智能化,强劲的拍照系统,一键式优化成像
  • 轻松实现多重成像,包括RGB、近红外和化学发光,可同时检测4 种荧光,无需反复剥离,可同时检测更多样本
  • 绿色环保— 绿色LED 透射光源,不使用有害的紫外线,不产生含汞废物,使用寿命更长
  • 内置分析软件,实验数据分析更轻松
  • 可连接网络,与Thermo Scientific iCloud 云平台对接,随时随地调取和处理数据

体内外筛选

 

全球抗体药物市场增长强劲,被业内认为是生物制药产业中最为活跃的组成部分,已成为未来生物医 药领域发展的“潜力股”。随着国家医药生物产业规划升级的推动,中国抗体药将迎来新的发展机遇期。

抗体药前期研发的核心是文库筛选,获得高特异性、高亲和力单克隆抗体。主流文库筛选有两大技术 平台:噬菌体/ 酵母展示文库筛选和杂交瘤细胞筛选。

噬菌体/ 酵母展示文库筛选

文库筛选又称Biopanning,通过“ 结合- 清洗- 洗脱- 扩增” 多轮循环操作,筛选出特异性强,亲和力高的 单克隆抗体。传统筛选多基于96 微孔板,步骤繁琐, 结果一致性差。

research-cizhu

Thermo Scientific Kingfisher Flex 高通量自动磁珠纯化系统

Kingfisher Flex 磁珠纯化系统是新一代自动化噬菌体文 库筛选平台,将手动筛选过程实现自动化。

Kingfisher Flex 磁珠纯化系统优势

  • 可以快速平行提取96 个样品
  • 优化的3D 加热模块
  • 与自动化系统兼容
  • 大体积样本提取(工作体积可达到5mL,8 个提取板位)
  • 图形化超大LCD 人机界面,运行状态和参数一目了然

杂交瘤细胞筛选

杂交瘤细胞筛选关键是杂交瘤细胞的单克隆化,经典方法是采用有限稀释法,形成单细胞克隆,通过 ELISA 检测培养基上清效价,确定阳性克隆。传统细胞分液,尤其是对于杂交瘤细胞单克隆化借助于移液 器进行微孔板分液,效率低、一致性差。采用 Multidrop Combi 自动分液系统可以实现快速、自动化分液, 提高分液效率与一致性。

杂交瘤细胞快速分液

Multidrop Combi 微孔板自动分液器可以实现快速的细胞分液。10 秒钟即可自动完成一块96 孔板 每孔100μL 的细胞分液,整个过程自动化、快速、一致性高。

research-fenye

快速自动细胞分液及培养系统

research-Multidrop-Combi

Multidrop Combi 自动分液器

高通量杂交瘤细胞培养中心
高通量杂交瘤细胞培养中心

高通量杂交瘤细胞培养

Cytomat 培养箱是基于贺利氏技术的自动化培养箱, 使用Cytomat 48C 可以将通量提高到1008 块标准 板,实现细胞培养的自动化和标准化。

单克隆抗体效价测定

整个抗体筛选流程中ELISA 检测通量非常大,整合Orbitor 机械臂、Wellwash Versa 洗板机、Multidrop Combi 分液器及酶标仪的自动化ELISA 检测系统,可实现自动化高通量的ELISA 检测。多功能酶标 仪Varioskan LUX, 作为通用检测平台,可进行包括光吸收、荧光、化学发光、时间分辨荧光、HTRF、 FRET、Alpha 等多种方式检测。

research-ELISA

高通量ELISA检测系统

research-Varioskan-LUX

Varioskan LUX检测平台

单克隆抗体热稳定性测定

基于热稳定性Protein thermal shift 分析技术

抗体蛋白热稳定性是一个重要检测指标。借助Protein thermal shift 分析技术通过Tm 值的变化可以直观 判定抗体蛋白的热稳定性。QuantStudio™ 7 Flex 实时荧光定量PCR 系统及其配套的Protein Thermal Shift 试剂及软件可以很好的检测抗体蛋白Tm 值的变化,以及促进蛋白稳定性的缓冲液条件的优化。

research-QuantStudio-7-FLEX

QuantStudio 7 FLEX 荧光定量PCR 仪

research-Tm

抗体蛋白Tm 值确定

QuantStudio™ 7 Flex 实时荧光定量 PCR 系统,可获得高分辨率熔解曲线,并且具有速度快、通量高、 定量准、重复性好等特点。

实验室自动化

 

赛默飞作为实验室自动化和智能化提供整体解决方案的领导者,拥有30 年自动化机械臂的研发和制造经 验,能够为用户提供一整套包括机械臂、高端分析设备、实验室装备、软件、服务、耗材和试剂在内的 综合解决方案。

自动化机械臂与不同仪器的集成(1+1 组合)

自动化机械臂+ 高内涵ArrayScan™ XTI

自动化机械臂+ 高通量荧光定量PCR仪Quantstudio

自动化机械臂+ 高通量流式细胞仪Attune NxT

自动化机械臂+6 台Luminex FlexMAP 3D 整合

 

实验室自动化平台(1+n 组合)

从小的实验站点,到大的实验平台,您可以随着研究升级随时扩建、变更您的系统。赛默飞为不同的研究领域、不同的实验室提供定制化的自动化系统。

基于高内涵的自动化筛选系统,从细胞培养到鉴定的一站式平台

  • Thermo Scientific Spinnaker 机械臂
  • 微孔板载架
  • Thermo Scientific Cytomat 自动培养箱
  • 高通量高内涵细胞分析系统
  • Thermo Scientific Varioskan 多功能酶标仪
 
research-pcr

高通量核酸提取与荧光定量PCR 分析平台

  • Thermo ScientificSpinnaker机械臂+ 轨道
  • 微孔板载架
  • 自动移液工作站
  • 自动撕膜机
  • 4 台Thermo Scientific Kingfisher Presto自动核酸提取仪
  • Thermo Scientific QuantStudio 12 Flex自动qPCR 仪
  • Thermo Scientific ALPS 3000 自动封膜机
  • Thermo Scientific Multidrop Combi 自动分液器
 

实验室常规仪器

 

Western blotting 全新革命


蛋白电泳仪


iBlot ™ 2 干式转印系统


iBind ™ 蛋白质印迹处理系统


iBright 智能成像系统

 

离心机


Thermo Scientific Heraeus Pico/Fresco 17/12 微量台式离心机


Thermo Scientific Heraeus Multifuge x1/x1R 高性能通用台式离心机


Thermo Scientific Sorvall LYNX 系列高速落地离心机


Thermo Scientific Sorvall BIOS 16 大容量离心机

 

Western blotting 全新革命


蛋白电泳仪


iBlot ™ 2 干式转印系统


iBind ™ 蛋白质印迹处理系统


iBright 智能成像系统

 

移液器

低温储存


Finnpipette F2 单(多)移液器


Finnpipette F1 单(多)移液器


Thermo Scientific Forma 89000 系列超低温冰箱


Thermo Scientific 气相液氮罐、小型液氮罐

 

摇床


Thermo Scientific MaxQ 2000/3000 台式通用摇床


Thermo Scientific MaxQ 4450 小型恒温摇床


Thermo Scientific MaxQ 6000 恒温型或低温型通用摇床


二氧化碳培养箱


BBD6220 大容器 CO2 细胞培养箱


Midi40 小容量 CO2 细胞培养箱


HERAcell150/240 直热式 全能型CO2 细胞培养箱


普通PCR 仪


ProFlex PCR 系统


SimpliAmp PCR 仪


Veriti PCR 仪

生物安全柜


KERASAFE KS 和SPII级生物安全柜


1300 系列II 级A2 型生物安全柜


1300 系列II 级B2 型生物安全柜


核酸电泳仪


Invitrogen™ E-Gel™ Power Snap 核酸电泳仪

核酸定量分析仪


Quit 3 荧光计


Nanodrop 第三代超微量分光光度计


Nanodrop Lite 超微量紫外可见分光光度计


Multiskan Sky 全波长酶标仪

 


药物靶点研究——靶点筛选

 

在生物制药研发过程中,新型药物的设计和筛选都是通过已知的药物靶点来完成的,因此对药物靶点的筛选就成为药物开发过程中的分析系统和常规PCR 系统,对靶点筛选中常用的SNP、CNV、基因突变、 融合、插入和缺失进行检测,尤其芯片技术结合高通量测序技术还可以高效快速地对大样本进行检测, 大大节约了靶点筛选的时间和成本。还可以运用质谱技术对代谢组学和蛋白组学中相关基因的表达差异 性直接进行筛选,直接作为候选靶点研究。

基因测序技术筛选

research-Ion-Proton

Ion Proton™ 系统台式基因组测序中心

高通量、快速,适于发现新的基因变异

research-ion-2

Ion Chef™ 系统

全自动化减少人为因素造成的差异性,省时省力

research-ion-1

Ion Torrent™ 半导体测序仪

可扩展性、简便性和测序速度,适合于每一个实验室

research-ion-3

Applied Biosystems™ 毛细管基因分析仪

测序和片段分析的金标准

Ion Proton 系统台式基因组测序中心

杂交瘤细胞筛选

Ion Proton™ 测序仪是基于新一代半导体测序技术, 此技术已让Ion PGM™ 测序仪成为世界上销售很快的 测序仪。

数据分析一直是全基因组测序的瓶颈,Ion Proton™ 同样可以在一台独立的服务器上当天完成。

Ion Proton 测序仪优点

快速

利用简单、特异和快速的PCR 技术,全外显子组富集可在一个小时之内完成

高效

能够实现高度均一性,10× 测序时目标碱基覆盖率超过94%

高效

点击按钮进行设置和数据分析,即可完成生物信息学的整合

高效

高达10GB

 

主要应用

  • 全转录组测序
  • 小RNA 测序
  • 甲基化测序
  • microRNA 测序
  • 外显子组测序
  • 人类规模的基因组测序

Ion Torrent 个人化操作基因组测序仪(PGM)

单克隆抗体热稳定性、效价测定

Ion Torrent™ 个人化操作基因组测序仪(PGM™),设计配合 革新性的半导体芯片技术,使整个平台具有极高的扩展性和 快速完成测序的性能。

Ion Torrent 具有以下优点

发现扩展

比拟半导体技术升级的强大扩展性
  • 技术的基础以超过千亿美金规模的半导体产业为支持
  • 芯片密度的提升以40年来累积验证的摩尔定律为证据

发现简捷

简单真实的生物化学原理
  • 真实的离子流测序原理
  • 无修饰的核酸,无需酶化学级联,无需任何荧光和化学发光

发现快速

直接,实时的测序技术
  • 快速的运行时间提速研究周期和文章的发表
  • 革新性的半导体测序芯片,无需光学检测和扫描
 

主要应用

  • 扩增子测序,多重扩增子测序用于快速的检测生殖细胞和体细胞的突变
  • RNA 测序,快速,简单的RNA 测序解决方案
  • 验证全基因组和外显子组的突变
  • 人类全转录组测序RNA-Seq
单克隆抗体热稳定性、效价测定

Ion Chef 系统

简单、重复性好、全自动的模板制备和芯片上样
Ion Chef™ 系统简化了Ion Proton™ 和Ion PGM™ 系 统的流程,为模板制备和芯片上样提供了一个全自动 的高通量解决方案。

Ion Chef 系统的优点如下

  • 简单、自动化的流程
  • 降低人为因素造成的差异性
  • 省时省力
  • 支持IonPGM™ 和Proton™ 系统

主要应用

  • Ion Chef™ 系统简化了Ion S5™、Ion Proton™ 和Ion PGM™ 系统的工作流程。
  • 提供了可无人值守的、可重复的自动化Ion AmpliSeq 文库制备和自动化模板制备及芯片上样的解决方案。

Applied Biosystems 毛细管基因分析仪

利用毛细管电泳开展DNA 测序和片段分析

3500 & 3500XL 基因分析仪

research-ion-3

3500 系列仪器优势

  • 先进的多色荧光分析能力,可对DNA片段进行多达6 种不同
  • 505nm 单波长固态长寿激光源
  • 强大、综合的数据采集和初步分析软件
  • 简单的安装、操作和维护
research-ion-4

3730 & 3730XL 基因分析仪

3730 和3730XL 仪器优势

  • 毛细管电泳系统上较长的读长
  • 可开展重测序、微卫星分析、AFLPTM、LOH、SNP 筛选和验证
  • 48 小时连续、无手动操作的自动化操作
  • 多重自动化性能可提高生产力,同时减少了人为失误造成的损失

主要应用

  • 利用毛细管电泳开展DNA 测序和片段分析
  • 突变检测和分析、SNP 发现和验证、等位基因鉴定和序列确认
  • 用于甲基化DNA 测序
  • 提供高质量的峰图、共有序列和突变位点测定

药物靶点研究——靶点验证

 

靶点验证通常首先就是确认候选靶点在细胞实验中是否具有调节化合物的生物活性,常用的实验方法有基因沉默和过表达,来正反验证候选靶点是否具有引起细胞生命的相关变化,通常涉及到细胞周期变化,细胞凋亡与坏死,细胞免疫反应等。因此针对靶点验证环节,我们可以可供详尽的筛选验证解决方案,可供选择的筛选验证工具有:高内涵细胞定量成像分析系(HCA)、基因编辑文库、基因编辑检测技术、定量检测技术(RT-PCR/qPCR)、流式细胞筛选技术。

基因编辑文库类型

 
miRNA 模拟物和抑制剂文库
Silencer Select siRNA 文库
LentiPool CRISPR 文库
LentiArray CRISPR 文库
简介
化学修饰的合成核酸,可用于 模拟成熟miRNA,或者结合并 抑制内源
超强siRNA 敲除基因表达
慢病毒表达载体中的 gRNA 混合文库,提供 了强效的导入方法,可 以在同一试管内实现完 全的基因敲除
慢病毒表达载体中的gRNA 阵列文库,提供了强效的导 入方法,可以在同一试管内 实现完全的基因敲除
RNA 类型
miRNA 寡核苷酸
siRNA 寡核苷酸
全长gRNA
全长gRNA
作用机制
内源性RNA 诱导沉默复合体 (RISC)
内源性RNA 诱导沉默复合 体 (RISC)
Cas9 核酸内切酶介导 的插入缺失形成
Cas9 核酸内切酶介导的插入 缺失形成
对基因表达的影响
瞬时抑制
瞬时抑制
永久且完全的基因敲除
永久且完全的基因敲除
作用时间
2-3天
2-3天
2-4天
2-4天
种属
人、小鼠、大鼠
人、小鼠、大鼠
形式
阵列或混合
阵列或混合
混合、即用型慢病毒
阵列、即用型慢病毒或含有 慢病毒载体的细菌甘油储液

RNAi 文库

siRNA 文库

适合体外RNAi 应用的超强siRNA 可以高效敲除基因表达,是研究各种细胞类型中蛋白质功能的很好的途径。 Invitrogen™ Silencer ™ 和Silencer ™ Select siRNA 文库,提供融合了siRNA 设计、脱靶效应预测算法 和化学修饰方面最新进展研究,可改善链偏差,加快各种基因类别的功能基因组筛选,且可保证获得的 高准确度和高精度。

Silencer Select siRNA 主要应用

  • 高效— 保证至少两条siRNA 达到>70% 的靶mRNA 沉默水平,有助于减少额外的siRNA 检测、假阴 性, 也能避免错过有价值的科学发现
  • 特异性— 精确的mRNA 靶点识别有助于避免假阳性,帮助减少耗时且高成本的脱靶验证
  • 效价— 较其他siRNA 的效价高100 倍,降低了单位实验成本和脱靶效应

siRNA 文库类别及特点

特点 类型
Stealth RNAi Stealth RNAi siRNA Silencer Select siRNA
经济高效的 极佳的抑制效果,低脱靶效应 优秀的抑制效果,较低的脱靶效应
效价 20nM推荐浓度 20nM推荐浓度 5nM推荐浓度
高效(抑制率>70%) 保证3条siRNA中的2条 保证3条siRNA中的2条 保证2条siRNA中的2条
特异性 中等 很高
覆盖 编码RNA 编码RNA 编码和非编码RNA
目标种展 人、小鼠、大鼠
( 其他种属使用定制工具)
人、小鼠、大鼠
( 其他种属使用定制工具)
人、小鼠、大鼠
( 其他种属使用定制工具)
推荐产品 Silencer Pre-designed siRNA,
5 nmol ( 货号. No. AM16708)
Stealth RNAi siRNA, tube
( 货号. No. 1299001)
Silencer Select Pre-designed siRNA,
5 nmol ( 货号. No. 4390771)

miRNA 文库

可供选择的miRNA 文库提供Invitrogen™ mir Vana™ miRNA 模拟物和抑制剂是化学修饰的合成核酸,可 用于模拟成熟miRNA,或者结合并抑制内源性miRNA 选择。

  • 出众的miRNA 特异性
  • miRNA 抑制剂可结合并抑制内源性miRNA

mirVana miRNA 模拟物和抑制剂特点

  • 功能多样— 可用于体外和体内的即用型产品,能够在整个研究中提供一致性和特异性
  • 高效价— 无毒性和免疫刺激性,是体内研究的关键
  • 以高通量筛选文库的形式提供— 最新miRBase 序列内容
  • 及时更新— 经常根据miRBase 数据库序列更新

定制文库服务

作为合作伙伴,我们从始至终与您通力合作,帮助您加速研究,并提供定时文库服务。

CRISPR 文库

将CRISPR-Cas9 技术应用于高通量筛选,利用质量控制优化分析设计,高质量的对照是成功筛选的关键。 赛默飞提供阴性对照、阳性对照、导入对照,其靶向基因编辑原理见下图。

LentiArray CRISPR 文库

LentiArray CRISPR 文库是在慢病毒表达载体中构建的gRNA 阵列文库,它提供了一种强效的导入方法, 使您可以在各种细胞类型中进行高通量筛选。

LentiArray CRISPR 文库慢病毒构建图谱

LentiArray 文库的优势

  • 形式灵活的阵列文库
  • 先进的gRNA 设计,使基因敲除效率最大化,且不影响特异性
  • 每个基因靶点提供多达4 种高质量的gRNA
  • 一整套对照简化了分析开发
  • 提供19 种预定义文库和定制方案,使您可以重点研究确定的基因组,或者进行无偏差的全基因组调查
  • 提供单个gRNA和定制阵列,以支持快速分析开发和活性样品验证

LentiPool CRISPR 文库

可提供的预定义文库服务

预定义和定制文库使您可以重点研究确定的基因组,或者进行更广泛的筛选。我们可提供miRNA、 siRNA、gRNA 和慢病毒形式的文库。

基因编辑效率检测

在基因编辑研究基因功能时,我们希望提高编辑的效率, 但同时也要保证不会在基因组的其他部位导致改 变,除了前期提高对设计筛选的质量外,后期也要提高对基因编辑效率的检测技术,以便高效地对候选 靶点进行验证,快速高效地确定功能靶点,因此针对基因编辑技术,我们可以提供配套的快速、高质量 基因编辑表型分析系统服务。

利用显微镜检测基因编辑的效率

EVOS 细胞成像系统在CRISPR 分析中的解决方案

research-CRISPR-2

细胞健康测定

CRISPR 编辑的起点是健康的细胞。在编辑前先进行 细胞健康分析可以作为严格的质控步骤,避免浪费时 间和试剂。

流程优化

抗生素筛选、基因表达和免疫细胞化学分析常用于监 测CRISPR 组分的组装,利用抗生素筛选鉴别转染细 胞时,可采用存活率分析监测筛选,方便的筛选方 法是使用显微镜。

 

Cas-9 表达

免疫细胞化学是鉴别细胞中特定蛋白质的标准技术。 使用抗Cas-9 一抗和标记二抗,利用荧光成像可检测 细胞中的Cas-9 表达。

表型分析

CRISPR-Cas9 系统常用于基因敲除、基因嵌入或基因 表达调控。免疫细胞化学提供了一种监测生物学相关 系统中特定蛋白调控的方法。在有特定的抗体可用的 情况下,成像提供了一种相对简单且高质量的方法, 在细胞水平上探索蛋白质的表达。