经优化的HCS自动检测方法

检测新DNA合成是衡量单细胞、细胞群或组织增殖的最精确的方法。这种自动化检测新DNA合成是基于DNA中掺入EdU的核苷的方法。一种铜催化的快速反应,加入Invitrogen™ Alexa Fluor™荧光染料标记的EdU,能轻松检测到一定波长范围内的多标记信号。在所有细胞中,细胞核染色和Alexa Fluor染料标记的新合成DNA(即增殖)可通过2通道荧光检测。剩余的荧光通道可用于其它细胞参数检测。

经典的细胞凋亡TUNEL检测

固定细胞检测方案

成像模式

  • 广角或共聚焦
  • 20倍放大倍率

自动测量的内容

  • 每个对象的荧光强度,形态学和计数值
  • 不同细胞区域标记点的荧光强度,形态学和计数值
  • 不同细胞区域之间的平均荧光强度差异和比值
  • 每个细胞不同区域不同通道的强度和次数之比

TUNEL assay images

HeLa cells treated to induce apoptosis and imaged. Untreated (Left) and staurosporine-treated (Right) HeLa cells stained using the Invitrogen Molecular Probes Click-iT TUNEL Alexa Fluor 594 Imaging Assay, for Microscopy & HCS and Invitrogen Molecular Probes Hoechst 33342. Cells were imaged using a Thermo Scientific ArrayScan VTI HCS instrument, and fluorescence intensities and count ratios were measured using Thermo Scientific HCS Studio Software.

TUNEL检测法图像

Two-panel HCS image of nonapoptotic and apoptotic cells
对HeLa细胞作处理以诱导其凋亡并成像。 未处理的(左侧) 和星形孢菌素处理(右侧) 的HeLa细胞使用Invitrogen™ Molecular Probes™ Click-iT™ TUNEL Alexa Fluor™ 594 Imaging Assay, for Microscopy & HCS 和Invitrogen™ Molecular Probes™ Hoechst™ 33342进行染色.细胞使用Thermo Scientific™ ArrayScan™ VTI HCS 设备进行成像,荧光强度和计数比率使用Thermo Scientific™ HCS Studio™软件进行测定。

Sample experimental data

Dose-response plots for a variety of compounds and cell types using Invitrogen Molecular Probes Click-iT TUNEL Alexa Fluor 647 to measure apoptosis. Responses were measured automatically using Thermo Scientific ArrayScan VTI with Thermo Scientific HCS Studio 2.0 Cell Analysis Software and plotted using GraphPad Prism software.

样本实验数据

Four-panel graph of data for different angiogenesis assays
使用Invitrogen™ Molecular Probes™ Click-iT™ TUNEL Alexa Fluor™ 647检测细胞凋亡获得的针对不同化合物和细胞类型的剂量反应曲线。反应数据由Thermo Scientific ArrayScan VTI和Thermo Scientific™ HCS Studio™ 2.0细胞分析软件测量获得,使用GraphPad Prism™进行作图。