Qué hay que tener en cuenta al analizar muestras de clorofila mediante espectrometría UV-Vis

Por Jennifer Empey-Kohl, especialista en aplicaciones de productos, 

En algunas industrias alimentarias, puede ser importante determinar las concentraciones de clorofila presentes en los productos alimenticios. La clorofila es el pigmento responsable del color verde de las plantas y es un componente clave en la fotosíntesis.21 Existen múltiples compuestos de clorofila diferentes en la naturaleza y, por extensión, en los productos alimenticios, con estructuras químicas variadas.

El análisis del contenido de clorofila en los productos alimenticios puede ayudar a evaluar su valor nutricional y a detectar adulteraciones, y también puede servir como indicador de la calidad y los métodos de procesamiento. Por ejemplo, en el aceite de canola, la clorofila es un contaminante indeseable, ya que no solo altera el color del aceite, sino que puede participar en reacciones no deseadas, reduciendo la calidad general5-7. En estas circunstancias, la determinación del contenido de clorofila puede ser vital.

Un método de análisis común es la espectroscopia de absorción UV-Visible.

La espectroscopia UV-Vis es una técnica utilizada para medir la cantidad de luz ultravioleta (UV) y visible (Vis) que absorbe una sustancia. En este método, se dirige un haz de luz UV o visible hacia una muestra, que puede ser líquida o sólida. La luz es absorbida por la muestra o pasa a través de ella. Mediante la medición de la intensidad de la luz que es capaz de atravesar la muestra y la intensidad de la luz sin la presencia de la muestra, se puede determinar la absorbancia y registrarse en función de la longitud de onda. Diferentes sustancias absorben la luz en diferentes longitudes de onda, creando un espectro de absorción único. Mediante el análisis de este espectro, se puede identificar la sustancia y, a través de la ley de Beer, determinar su concentración en la muestra.

Hemos realizado un estudio de la clorofila utilizando la técnica UV-Vis.

El estudio de la clorofila

La clorofila existe en dos formas principales, la clorofila a y la clorofila b, cada una de las cuales absorbe la luz en diferentes longitudes de onda. Esta propiedad única permite analizar y cuantificar el contenido de clorofila en los productos alimenticios, lo que proporciona información sobre la calidad, la frescura y el historial de procesamiento del producto.

Utilizamos un espectrofotómetro UV-Visible para analizar la clorofila extraída de muestras de espinacas disponibles en el mercado, así como para analizar el contenido de clorofila presente en muestras de aceite de oliva y de canola. Los espectros UV-Visible resultantes se compararon con los estándares de clorofila medidos en el instrumento y se realizaron análisis matemáticos adicionales para determinar las concentraciones de clorofila a y b. En el caso del aceite de canola, la concentración de clorofila se cuantificó siguiendo los procedimientos descritos por la American Oil Chemists Society (AOCS).

Espectroscopia de absorción UV-Visible, preparación de muestras, procesos y retos

La espectroscopia de absorción UV-Visible es una potente técnica analítica utilizada para medir la absorbancia de la luz por la clorofila en longitudes de onda específicas. Este método es el preferido debido a su precisión, simplicidad y naturaleza no destructiva. Mediante la medición de la absorbancia a 665 nm y 645 nm, los científicos pueden determinar las concentraciones de clorofila a y b, respectivamente.

La precisión del análisis de la clorofila depende en gran medida de la preparación adecuada de la muestra. Las muestras de alimentos se homogeneizan y se extraen normalmente utilizando disolventes como la acetona o el etanol. A continuación, el extracto se filtra para eliminar las partículas en suspensión, lo que garantiza una solución clara para el análisis espectroscópico.

El procedimiento de espectroscopia UV-Visible consiste en calibrar el espectrofotómetro con soluciones estándar de clorofila para establecer una línea de base. A continuación, se mide la absorbancia de la muestra de alimento preparada y se calcula la concentración de clorofila utilizando ecuaciones establecidas. La calibración es fundamental para tener en cuenta cualquier posible variabilidad del instrumento y garantizar resultados precisos.

Dado que esta técnica no es destructiva, no altera la muestra, lo que permite realizar análisis adicionales si es necesario. Tiene una alta sensibilidad y puede detectar bajas concentraciones de clorofila, lo que la hace adecuada para una amplia gama de productos alimenticios. Además, el procedimiento es relativamente rápido, lo que permite un análisis de alto rendimiento en entornos industriales.

Aunque la espectroscopia de absorción UV-Visible es un método robusto, hay que tener en cuenta algunos retos:

• Interferencias: Otros compuestos presentes en las muestras alimentarias pueden absorber la luz en longitudes de onda similares, lo que puede interferir en la medición de la clorofila. Una preparación adecuada de las muestras y la optimización del método pueden mitigar estas interferencias.
• Selección del disolvente: La elección del disolvente para la extracción puede afectar a la eficiencia y la precisión del análisis de la clorofila. Seleccionar el disolvente adecuado y garantizar unos procedimientos de extracción coherentes es fundamental para obtener resultados fiables.

Conclusión

Puede leer los resultados y el análisis del estudio de muestras de espinacas y aceite en nuestra nota de aplicación, Análisis del contenido de clorofila en productos alimenticios mediante mediciones de absorción UV-Visible. En ella se describen detalladamente la preparación, la instrumentación, los espectros de absorción, las tablas de longitudes de onda máximas, los resultados y las referencias. A partir de estos resultados, llegamos a la conclusión de que la espectroscopia de absorción UV-Visible proporciona información valiosa sobre la calidad, los métodos de procesamiento y el desarrollo de los productos, lo que ayuda a garantizar que los productos alimenticios que contienen clorofila cumplan con los más altos estándares.

A medida que avanza la tecnología, este método analítico seguirá desempeñando un papel importante en el control de calidad y la innovación de los alimentos.

Recursos adicionales y referencias

• Nota de aplicación: Análisis del contenido de clorofila en productos alimenticios mediante mediciones de absorción UV-Visible
• Información sobre el instrumento: Espectrofotómetros UV-Visible
• Visita en 3D del instrumento

Referencias utilizadas anteriormente y en la nota de aplicación:

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