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En raison d’un bruit de fond important, le clonage de produits de PCR longs et à extrémités franches peut s’avérer difficiles et ne donner qu’un faible pourcentage de recombinants. Notre technologie Zero Background™ unique s’appuie sur le gène ccdB létal (contrôle de la mort cellulaire) pour un clonage des plus efficaces.
Le gène ccdB est intégré au site de clonage des vecteurs Zero Background™. La protéine CcdB empoisonne la gyrase bactérienne, provoquant ainsi la dégradation du chromosome HOSE et la mort cellulaire. Lorsqu’un insert est ligaturé au vecteur, le gène ccdB est perturbé, permettant ainsi la croissance exclusive des colonies de recombinants. L’élimination du bruit de fond à vecteur élevé permet à la technologie Zero Background™ de procurer un taux de recombinants de quasiment 100 %, vous évitant ainsi d’avoir à analyser des centaines de colonies du bruit de fond.
Les kits de clonage Zero Blunt® sont désormais dotés de la fonction de ligase d’ADN T4 ExpressLink™, permettant ainsi de réaliser des ligatures à température ambiante en 5 minutes seulement, avec des réactions permettant généralement d’obtenir > 80 % de recombinants avec des inserts.
Passez de la PCR au clonage en tout juste 5 minutes grâce à la technologie Zero Blunt® TOPO®. Zero Blunt® TOPO® permet d’obtenir jusqu’à 95 % de clones avec l’insert correct, sans qu’aucune ligase, procédure post-PCR ni amorce de PCR contenant des séquences spécifiques ne soit nécessaire.
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