photograph showing 8 different types of cell culture vessels  

请在实验开始前确定细胞的存放方式

尽管有很多培养和成像的器皿可供细胞成像实验使用,但能否选择到最适宜的器皿仍依赖于实验开始前周密的计划。是否要进行多重处理?细胞是否需要特定的温度、空气或光照条件?显微镜是什么配置?

下面提供的信息可帮助您了解应该如何进行实验规划,才能确保细胞在培养和存放的实验器皿中能获得所需的图像。


可选择的实验器皿类型

可供成像实验使用的器皿有多种类型,具体选择哪一种,取决于所进行的实验类型以及您所使用的显微镜的性能。

玻璃底器皿

 

多孔板

 

培养瓶

photograph of a glass slide with coverslip and a 35 mm glass-bottom culture dish   photograph of multi-well plate   photograph of a rectangular, 25 square cm culture flask


器皿架及适配器

       
photograph of vessel holder designed to accommodate two 25 square cm culture flasks   photograph of vessel holder designed to accommodate four 35 mm culture dishes   photograph of vessel holder designed to accommodate two glass slides


选择实验器皿注意事项

您所选的器皿类型还取决于您的显微镜配置,以下为您需要考虑到的一些配置信息:

您使用的是正置显微镜还是倒置显微镜?

微镜兼容的器皿类型部分取决于物镜处于载物台下方(倒置显微镜)还是上方 (正置显微镜)(图1).

正置显微镜适于对玻璃盖玻片上的样品成像,这是因为物镜可以非常接近盛放样品的盖玻片。但在使用培养皿和培养瓶时,正置显微镜就不是最好的选择,因为在这些器皿中,成像的细胞处于器皿的底部,而装在顶部的物镜必须透过样品和物镜之间的全部空气才能成像,大多数正置物镜都无法得到理想的效果。

图 1. 显微镜物镜相对于样品载物台的位置将决定哪种器皿最适合于您的成像实验。

  diagram showing a culture dish with a microscope objective positioned both above and below it, to illustrate the sample's position with respect to the objective in both an upright and in an inverted microscope

 

选择的实验器皿是否适合于显微镜的载物台?

有些载物台需要接适配器才能适用某些类型的器皿,请务必确认自己将要使用的显微镜,确认其具有适合在成像时固定您的实验器皿的配置、支架或适配器附件。

 

您要使用哪种类型的物镜?

您需要使用匹配物镜工作距离的样品器皿 (图 2).

是否存在一些实验设计方面的注意事项?

有时,您的实验设计会限制您所能使用的实验器皿类型,以下为部分实例:

  • 如果您希望在不加任何干预的情况下,观察处于培养阶段的细胞,则您需要使用能对培养瓶或培养皿内样品进行成像的显微镜配置(如具有长工作距离物镜的倒置显微镜)。
  • 塑料器皿在细胞培养过程中使用方便、广泛,但塑料材质可能会发出荧光。如果您的实验遇到类似这样的问题,则可能需要考虑在玻璃底器皿内或玻璃盖玻片上培养细胞。
  • 如果您希望在细胞染色后采用封固剂来保存细胞,则把细胞种在盖玻片是最佳的。
  • 如果您的实验需要在多种条件下检测,则采用多孔板进行实验更为轻松,您可以在单块板上并排种上所有检测条件的样本。
图 2. 对于在玻璃盖玻片或载片上的样品,通常正置显微镜最适合。
  Photograph of an upright microscope, with objective positioned over a glass slide, ready for imaging.  
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