在吞噬作用(phagocytosis)中,细胞将微生物等颗粒物质内化,这一过程对于免疫反应的发生以及凋亡细胞的清除非常重要。研究吞噬作用的荧光标记探针包括 BioParticles 指示剂,一种荧光染料标记的细菌和酵母。

也可以利用基于淬灭/洗涤的方法追踪细胞吞噬作用,通过是否摄取进行简单检测,或者也可以利用 pH 指示剂检测吞噬过程的各个阶段。

 

 


免洗检测法

使用 pHrodo™ 指示剂可快速准确地检测吞噬过程中的不同阶段。pHrodo™ Red 和 pHrodo™ Green 均可与一系列颗粒共轭结合,进行吞噬作用测定,且无需淬灭无需洗涤。

pHrodo™ 染料在中性 pH 值时几乎不发荧光,随着 pH 降低,Red(红色)或 Green(绿色)荧光信号增强。而荧光信号的增强则可用于检测细胞吞噬途径的整个过程。

吞噬作用

小鼠单核细胞/巨噬细胞(MMM 细胞,ATCC)用 NucBlue Live ReadyProbes 试剂标记,然后与 pHrodo™ Red E. coli一起在活细胞成像溶液中孵育 60 分钟。


基于淬灭或洗涤方法的检测

基于淬灭或洗涤方法的检测可通过均一的信号指示吞噬作用,通常用作吞噬作用研究的对照。

Alexa Fluor 染料可与一系列颗粒结合,提供多种波长选择及各自单次发射检测。荧光素Fluorescein可提供pH 敏感性信号,随着吞噬体的酸化而减弱。

吞噬作用

MMM 巨噬细胞与Zymosan A(S. cerevisiae )BioParticles,Alexa Fluor 594 偶联物一起孵育,成像前用活细胞成像溶液洗涤。


吞噬作用产品选择指南

 
读值
无需洗涤、无需淬灭的荧光强度检测形式,整个吞噬过程中荧光信号增强
检测范围
检测早期吞噬体到早期溶酶体的形成过程
载体
金黄色葡萄球菌S. aureus
大肠杆菌E. coli
酵母聚糖 A(Zymosan A)
酵母聚糖 A(Zymosan A)
大肠杆菌E. coli
金黄色葡萄球菌S. aureus
常用检测通道
TRITC
 
 
FITC
 
 
标记颜色
pHrodo™ Red
pHrodo™ Green
Ex/Em (nm)
500/585
509/533
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台
I, M, FC
规格*
5 x 2 mg
5 x 2 mg
5 x 1 mg
5 x 1 mg
5 x 2 mg
5 x 2 mg
货号
*I = 显微镜成像,M = 微孔板,FC = 流式细胞分析。
 
读值
通过流式细胞仪测量全血样品的吞噬活性
检测范围
 检吞噬体形成
载体或方法
大肠杆菌E. coli
标记您的颗粒物
大肠杆菌E. coli 
金黄色葡萄球菌S. aureus 
常用检测通道
TRITC
 
 
FITC
 
 
标记颜色
pHrodo™ Red
pHrodo™ Green
Ex/Em (nm)
500/585
509/533
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台
流式细胞分析 
产品规格
1试剂盒
1试剂盒
1试剂盒
1试剂盒
货号
 
读值
需要淬灭或洗涤;检测内化染料的荧光信号,外部染料被淬灭/洗涤掉 
检测范围
整个吞噬过程中信号稳定,无需调节 
载体或方法
金黄色葡萄球菌S. aureus
大肠杆菌E. coli
酵母聚糖 A (Zymosan A)
 酵母聚糖 A (Zymosan A)
大肠杆菌E. coli
金黄色葡萄球菌S. aureus
常用检测通道
FITC
Texas Red®
标记颜色
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 594
Ex/Em (nm)
494/517
590/617
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
固定
对活细胞或固定后的细胞成像
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台
显微镜成像 
产品规格
2 mg
2 mg
2 mg
2 mg
2 mg
2 mg
货号
 
读值
内化的染料发出荧光,需要减去阴性对照本地
检测范围
早期吞噬时荧光减弱 
载体
大肠杆菌E. coli
大肠杆菌E. coli
金黄色葡萄球菌S. aureus
酵母聚糖 A(Zymosan A)
常用检测通道
FITC
标记颜色
荧光素Fluorescein
Ex/Em (nm)
480/520
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
固定
对活细胞或固定后的细胞成像
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台*
I, M
显微镜成像
产品规格
1试剂盒
10 mg
10 mg
10 mg
货号
* I = 显微镜成像,M = 微孔板,FC = 流式细胞分析。
 
读值
无需洗涤、无需淬灭的荧光强度检测形式,整个吞噬过程中荧光信号增强
检测范围
检测早期吞噬体到早期溶酶体的形成过程
载体
金黄色葡萄球菌S. aureus
大肠杆菌E. coli
酵母聚糖 A(Zymosan A)
酵母聚糖 A(Zymosan A)
大肠杆菌E. coli
金黄色葡萄球菌S. aureus
常用检测通道
TRITC
 
 
FITC
 
 
标记颜色
pHrodo™ Red
pHrodo™ Green
Ex/Em (nm)
500/585
509/533
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台
I, M, FC
规格*
5 x 2 mg
5 x 2 mg
5 x 1 mg
5 x 1 mg
5 x 2 mg
5 x 2 mg
货号
*I = 显微镜成像,M = 微孔板,FC = 流式细胞分析。
 
读值
通过流式细胞仪测量全血样品的吞噬活性
检测范围
 检吞噬体形成
载体或方法
大肠杆菌E. coli
标记您的颗粒物
大肠杆菌E. coli 
金黄色葡萄球菌S. aureus 
常用检测通道
TRITC
 
 
FITC
 
 
标记颜色
pHrodo™ Red
pHrodo™ Green
Ex/Em (nm)
500/585
509/533
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台
流式细胞分析 
产品规格
1试剂盒
1试剂盒
1试剂盒
1试剂盒
货号
 
读值
需要淬灭或洗涤;检测内化染料的荧光信号,外部染料被淬灭/洗涤掉 
检测范围
整个吞噬过程中信号稳定,无需调节 
载体或方法
金黄色葡萄球菌S. aureus
大肠杆菌E. coli
酵母聚糖 A (Zymosan A)
 酵母聚糖 A (Zymosan A)
大肠杆菌E. coli
金黄色葡萄球菌S. aureus
常用检测通道
FITC
Texas Red®
标记颜色
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 594
Ex/Em (nm)
494/517
590/617
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
固定
对活细胞或固定后的细胞成像
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台
显微镜成像 
产品规格
2 mg
2 mg
2 mg
2 mg
2 mg
2 mg
货号
 
读值
内化的染料发出荧光,需要减去阴性对照本地
检测范围
早期吞噬时荧光减弱 
载体
大肠杆菌E. coli
大肠杆菌E. coli
金黄色葡萄球菌S. aureus
酵母聚糖 A(Zymosan A)
常用检测通道
FITC
标记颜色
荧光素Fluorescein
Ex/Em (nm)
480/520
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
固定
对活细胞或固定后的细胞成像
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台*
I, M
显微镜成像
产品规格
1试剂盒
10 mg
10 mg
10 mg
货号
* I = 显微镜成像,M = 微孔板,FC = 流式细胞分析。

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