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  活细胞成像是件棘手的工作。人们不仅需要根据特定检测读取方式、光谱兼容性以及信噪比水平要求来优化染色方法,而且由于活细胞动态变化,还需长时间地仔细观测。

在延时成像实验及细胞需要长时间接触环境条件的实验中,培养基的选择尤为重要。通过去除标记溶液、用新鲜的培养基洗涤等方法将有助于降低相关细胞的干扰本底水平以便于继续培养。

如果实验的最后一步是活细胞成像(即不再进行后续培养),可采用本底抑制剂优化信号。

活细胞成像培养基

为获得可靠的活细胞成像结果,必须确保细胞健康,同时尽可能维持接近生理状态的温度、pH、氧分压等条件。  

通过一系列活细胞成像培养基和洗涤缓冲液,您可在整个成像过程中优化成像清晰度、信噪比及细胞活力。

  • PBS—适用于对不需要长时间孵育的细胞进行洗涤和短时成像
  • 活细胞成像溶液-—一种光学透明生理性溶液,可维持细胞健康长达4小时
  • FluoroBrite™ DMEM—一种光学透明溶液,适合长时间成像和后续细胞培养
 
Oxidative stress detection in human osteosarcoma (U2OS) cells.
试剂 细胞洗涤 短时成像 成像时间达4小时 长时间成像
PBS, pH 7.4
   
活细胞成像溶液
 
FluoroBrite™ DMEM

背景抑制

BackDrop™ Background Suppressor ReadyProbes™试剂是一种新型试剂,可有效抑制活细胞成像样本中的背景荧光。本品以超方便的即用型滴瓶(6小瓶装)形式提供:蓝色、绿色及红色背景抑制剂各两小瓶。

如果在蓝色、绿色或红色荧光通道内观察到较高的背景信号或荧光信号较弱,不妨体验一下我们的BackDrop Background Suppressor如何助您提升画质、提高对比度,改善数据质量。

 
在含有20%FBS的DMEM培养基中培养BPAE细胞,两份培养基中分别不加(-)和加入(+)BackDrop Background Suppressor。

抗淬灭试剂

不可逆的光漂白过程会造成荧光损失,进而导致检测灵敏度显著下降,尤其是靶标分子丰度较低或激发光强度较高或激发时间较长时,例如长时程实验时。

为了最大限度降低实验样本的光漂白效应,我们研发了一系列用于活细胞和固定细胞成像的抗淬灭试剂。这些产品在多种类型的样本中都表现出了更高的荧光稳定性。光漂白效应降低,也就意味着我们可以更长久地跟踪时程实验,实现更高的灵敏度,获得更佳的荧光信号定量结果。

更多了解抗淬灭试剂

Hoechst™和GFP的防光漂白定量分析结果。使用CellLight™线粒体GFP处理Hela细胞24小时,然后使用Hoechst 33342标记15分钟。将ProLong™ Live抗淬灭试剂加入到样本B中并孵育两小时。在所有时间点, ProLong Live抗淬灭试剂样本 (A) 的信号强度都强于仅使用完全培养基的对照样本 (B)