ProLong Antifade Reagents for Live Cells

即使是在高强度照明环境下,ProLong Live 抗淬灭剂仍然可以抑制发生光漂白,保护荧光标记靶标分子的信号,以便进行长期成像和分析。经标准延时成像方案进行120次曝光后,采用ProLong Live 试剂处理的样品比未处理的细胞样品亮度可高出20%以上,从而确保您有更多时间从成像实验中进行数据收集。

产品特点:

  • 可抑制活细胞中的光漂白
  • 兼容整个光谱范围内的荧光染料和荧光蛋白
  • 延长延时实验的成像时间
  • 即用型100x优化配方

选择与您的实验相匹配的抗淬灭剂

ProLong Live 抗淬灭剂的特点

您可通过直接向活细胞成像培养基中添加ProLong Live 抗淬灭剂,以减少光漂白效应,延长细胞成像时间。研究人员通常需要在信号强度降低至起始水平的50%之前追踪细胞行为。而使用ProLong Live 抗淬灭剂,您可在降低至该50%信号水平之前最多可延长20%的成像时间,从而观察到更多更详尽的细胞过程。

使用ProLong Live 抗淬灭剂,您可以保护荧光蛋白、MitoTracker 染料等功能性探针以及Hoechst 33342(图1)等复染剂的信号,从而获得更长的成像时间和更精确的检测结果。

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图 1:Hoechst和GFP的光漂白保护作用定量分析。使用CellLight Mitochondria-GFP转导HeLa细胞24小时,然后使用Hoechst 33342标记孵育15分钟。在样品A中添加ProLong Live 抗淬灭剂并孵育2小时。与只使用完全培养基孵育的对照样品(B)相比,使用ProLong Live 抗淬灭剂孵育的样品(A)在所有时间点的信号都更强。

有效保护多种荧光基团

ProLong Live 抗淬灭剂可保护活细胞中多种荧光基团的信号(图 2)

这6张图是荧光强度随共聚焦扫描数变化的曲线图;使用ProLong Live 抗淬灭剂处理的样品在每次扫描中的荧光信号水平都高于未处理样品。

图2:有效抑制多种荧光基团发生光漂白。使用ProLong Live试剂处理表达荧光蛋白(CellLight MitoGFP和MitoRFP)或使用荧光染料(MitoTracker Green、Red或Deep Red或Hoechst 33342染料)标记的HeLa或U2OS细胞,并使用高内涵分析仪的共聚焦模式扫描。光漂白保护作用强度表示为初始荧光强度在后续重复曝光中的保留比例。每张图都已注明EC50(半数最大荧光信号),然后基于处理样品和未处理样品达到EC50值时对应的扫描数对ProLong Live试剂总体信号保护强度(与未处理样品对比)进行计算。使用ProLong Live试剂,可以使(A)CellLight MitoGFP(EmGFP)的成像时间延长50%以上;使(B)CellLight MitoRFP(TagRFP)的成像时间延长100%以上;使(C)MitoTracker Green的成像时间延长120%以上;使(D)MitoTracker Red的成像时间延长67%以上;使(E)MitoTracker Deep Red 的成像时间延长85%以上;使(F)Hoechst 33342的成像时间延长(具体时间未计算)。

细胞干扰作用最小

根据实验方案,使用ProLong Live抗淬灭试剂进行孵育,对细胞活性或细胞增殖产生的影响极小(图 3)

这4张图分别为使用LIVE/DEAD Red染料、CyQUANT Direct试剂检测细胞活性和使用PrestoBlue试剂检测细胞增殖的柱状图。
图3:ProLong Live抗淬灭试剂处理不会影响细胞活性和细胞增殖。将HeLa细胞以1,000 cells/孔的浓度接种到96孔板中,并使用工作浓度的ProLong Live 抗淬灭剂按规定时间孵育。使用A. LIVE/DEAD Red染料B. CyQUANT Direct试剂C. PrestoBlue试剂检测细胞活性。使用D. Click-iT Plus EdU 试剂检测细胞增殖。误差线=标准偏差。

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