流式细胞术细胞核凋亡分析

细胞凋亡晚期以细胞核形态学变化为特征,包括DNA片段化、染色质凝聚、核膜降解、细胞核起泡以及DNA链断裂。 Invitrogen提供了多种独特的试剂,用以分析细胞凋亡中细胞核的变化;其中很多试剂和流式细胞仪中检测其他细胞凋亡参数所使用的试剂相兼容。

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核染色质凝聚

处于凋亡中的细胞表现出细胞核染色质凝聚的增强。 随着染色质的凝聚,细胞可渗透核酸染料发出超亮荧光,使得结合传统的死亡细胞染色就可以确认凋亡细胞。


图1. 用Vybrant® DyeCycle™ Violet染料及SYTOX® AADvanced™染料进行染色质凝聚分析。 Jurkat细胞 (人T细胞白血病细胞) 用10 μM喜树碱处理6小时 (3B) 或不处理 (3A) 用作对照。 接着将细胞和凋亡试剂盒——Vybrant® DyeCycle™ Violet/SYTOX® AADvanced™试剂盒中的试剂混合,并用流式细胞仪405/488 nm 双激发分析。 注意:与对照组细胞 (3A) 中所见的细胞凋亡基础水平相比,喜树碱处理过的细胞 (3B) 凋亡细胞比例更高。 A = 凋亡细胞,V = 活细胞,N = 坏死细胞。

产品 激光 激发/发射光波长 目录号  
Hoechst 33342 UV 350/461 H1399 产品详情
Vybrant® DyeCycle™ Violet 405 369/437 V35003 产品详情
YO-PRO®-1碘化物 488 491/509 Y3603 产品详情

DNA片段化 (TUNEL分析)

细胞凋亡时出现的DNA片段化会产生DNA链断裂,能够用TUNEL (末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 分析。 APO-BrdU TUNEL分析是标记DNA断裂和细胞所有DNA的双染色分析,通过成像技术或流式细胞仪来检测凋亡细胞。 也可使用碘化丙啶 (PI) 来分析总DNA含量或细胞周期阶段。

产品 激光 激发/发射光波长 目录号  
含有Alexa Fluor® 488 抗BrdU抗体的APO-BrdU TUNEL分析试剂盒 488 495/519 A23210 产品详情

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