显示两种不同的荧光峰的流式细胞术直方图部分

采用活性染料对活细胞染色并在固定后依然可以保持染色图案,对于细胞内免疫分型至关重要。 从数据中排除死细胞将会实现细胞群更为准确的分离与鉴定。 Invitrogen Molecular Probes LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂是一种有助于确认在固定或通透处理后可对细胞活性进行准确评估的可固定活性染料。

查看可固定活性染料选择指南

这些基于流式细胞术的试剂盒具有如下优势:

  • 灵活—三种包装规格,八个单通道荧光色,涵盖 UV、405、488、532、561 及 633nm 激光,灵活满足实验的需求
  • 特异—活细胞和死细胞可被清晰的区分,即便是在固定后也可轻松排除影响结果准确性的死细胞
  • 简便性—几乎兼容所有染色及免疫分型方案

另请参见用于荧光成像微孔板的活性检测产品


LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂

LIVE/DEAD 可固定死细胞染色试剂盒基于荧光反应染料与细胞蛋白(胺)的反应。 这些染料不能穿透活细胞膜,所以仅有细胞表面的蛋白可与染料发生反应,产生微弱染色(图1,活细胞)。 这些反应染料可穿透受损的死细胞细胞膜并对内部和外部的胺进行染色,从而实现更明亮的染色(图1,死细胞

使用 LIVE/DEAD 染色后的两种细胞的艺术渲染图;一个不发荧光的活细胞紧挨着一个发荧光的死细胞
图1: LIVE/DEAD 可固定死细胞染色原理。  非细胞通透的胺反应染料仅能结合到活细胞的表面,产生非常微弱的荧光。 这些染料可穿透死细胞的细胞膜并与内部的蛋白发生结合,从而产生极强的荧光。

活细胞和死细胞群之间的荧光强度差异通常在50倍以上,因此两者之间可实现完全区分(图 2A)。 此外,染料与之间的共价结合方式使得在通过福尔马林固定(常用于细胞内的免疫分型以及病原体失活)后依然可以保留活细胞和死细胞群之间的差异(图2B)。

两个流式细胞术直方图显示,非固定和固定细胞中检测到的荧光强度峰无变化

图 2. 固定后 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色保留。 LIVE/DEAD 可固定 Aqua 死细胞染色试剂盒用于对活细胞(左侧峰)和热处理 Jurkat 细胞(右侧峰)的混合物进行差异染色。 (A) 中的细胞没有固定;(B)中的细胞在 3.7% 福尔马林中固定后进行染色。 在流式细胞仪上采用 405nm 激发波长及 ~525nm 散射波长分析样品。

可固定活力染料选择指南

  LIVE/DEAD Fixable Blue 染色剂 LIVE/DEAD Fixable Violet 染色剂 LIVE/DEAD Fixable Aqua 染色剂 LIVE/DEAD Fixable Yellow 染色剂
测定基础 LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
读取 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)
UV
405
405
405
Ex/Em (nm)
350/450
416/451
367/526
400/575
参考文献
引用文献
多重
染料相容性 不可与Indo-1(蓝色)、DAPI或Hoechst 33342等Invitrogen产品系列一起使用 不可与 Pacific Blue 染料、CellTrace Violet 染色剂、FxCycle Violet 染色剂、BV421 或 eFluor 450 等 Invitrogen 产品系列一起使用 不可与Pacific Green染料、F2N12S凋亡检测试剂盒、AmCyan或BV510等Invitrogen产品系列一起使用 不可与Pacific Orange染料、Qdot 605、F2N12S凋亡检测试剂盒或BV605等Invitrogen产品系列一起使用
可固定
样品类型
活细胞
货 号 80 个反应
200 个反应
400 个反应
  LIVE/DEAD 可固定细胞死活绿色染色剂 LIVE/DEAD 可固定细胞死活红色染色剂
测定基础 LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
读取 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)
488
488
561
Ex/Em (nm)
495/520
595/615
参考文献
引用文献
多重
染料相容性 不可与FITC、Alexa Fluor 488、GFP或CellTrace CSFE染色剂等I产品一起使用 不可与R-PE、碘化丙啶、SYTOX AADvanced染色剂、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610和PE-Texas Red串联染料等产品一起使用
可固定
样品类型
活细胞
货 号 80 个反应
200 个反应
400 个反应
  LIVE/DEAD 可固定细胞死活远红外染色剂 LIVE/DEAD 可固定细胞死活近红外染色剂
测定基础 LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
读取 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)
633/635
633/635
Ex/Em (nm)
650/665
750/775
参考文献
引用文献
多重
染料相容性 不可与APC、 Alexa Fluor 647 染料、FxCycle Far Red 和 CellTrace Far Red 染色剂等产品一起使用 不可与APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7 或 Vybrant DyeCycle Ruby 染色剂等 产品一起使用
可固定
样品类型
活细胞
货 号 80 个反应
L34973
L34975
200 个反应
L10120
L10119
400 个反应
L34974
L34976
  LIVE/DEAD Fixable Blue 染色剂 LIVE/DEAD Fixable Violet 染色剂 LIVE/DEAD Fixable Aqua 染色剂 LIVE/DEAD Fixable Yellow 染色剂
测定基础 LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
读取 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)
UV
405
405
405
Ex/Em (nm)
350/450
416/451
367/526
400/575
参考文献
引用文献
多重
染料相容性 不可与Indo-1(蓝色)、DAPI或Hoechst 33342等Invitrogen产品系列一起使用 不可与 Pacific Blue 染料、CellTrace Violet 染色剂、FxCycle Violet 染色剂、BV421 或 eFluor 450 等 Invitrogen 产品系列一起使用 不可与Pacific Green染料、F2N12S凋亡检测试剂盒、AmCyan或BV510等Invitrogen产品系列一起使用 不可与Pacific Orange染料、Qdot 605、F2N12S凋亡检测试剂盒或BV605等Invitrogen产品系列一起使用
可固定
样品类型
活细胞
货 号 80 个反应
200 个反应
400 个反应
  LIVE/DEAD 可固定细胞死活绿色染色剂 LIVE/DEAD 可固定细胞死活红色染色剂
测定基础 LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
读取 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)
488
488
561
Ex/Em (nm)
495/520
595/615
参考文献
引用文献
多重
染料相容性 不可与FITC、Alexa Fluor 488、GFP或CellTrace CSFE染色剂等I产品一起使用 不可与R-PE、碘化丙啶、SYTOX AADvanced染色剂、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610和PE-Texas Red串联染料等产品一起使用
可固定
样品类型
活细胞
货 号 80 个反应
200 个反应
400 个反应
  LIVE/DEAD 可固定细胞死活远红外染色剂 LIVE/DEAD 可固定细胞死活近红外染色剂
测定基础 LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料,可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测,而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。
读取 死细胞发出强烈的荧光,而活细胞的荧光强度极低,两者易于区分。
激光(nm)
633/635
633/635
Ex/Em (nm)
650/665
750/775
参考文献
引用文献
多重
染料相容性 不可与APC、 Alexa Fluor 647 染料、FxCycle Far Red 和 CellTrace Far Red 染色剂等产品一起使用 不可与APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7 或 Vybrant DyeCycle Ruby 染色剂等 产品一起使用
可固定
样品类型
活细胞
货 号 80 个反应
L34973
L34975
200 个反应
L10120
L10119
400 个反应
L34974
L34976

LIVE/DEAD 可固定死细胞染料试用装

不确定哪种染料更适合于您的实验,或者您的实验还需要更多的灵活性? 试试我们的 LIVE/DEAD 可固定死细胞染料试用装,其中含有足够每种颜色染料 40 个反应的量。

LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂补偿

在使用任何 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色试剂盒或任何胺反应染料时,Invitrogen ArC 胺反应补偿微球试剂盒均可提供一致、准确并且便于使用的技术用于流式细胞仪的补偿设置。 这些试剂盒的优点包括:

  • 无需对细胞进行热处理
  • 针对 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色试剂盒优化
  • 快速而简单的微球式流失细胞补偿
  • 无需稀少珍贵的样品用于补偿设置
  • 准确并一致的结果

 

ArC 胺反应补偿微球试剂盒

来自于 Arc 微珠试剂盒的微球通过 LIVE/DEAD 可固定 Violet 死细胞染色试剂盒(V34955)进行染色并经流式细胞仪分析。 ArC 微球试剂盒(A 10346)中的阳性及阴性微珠混合物通过 LIVE/DEAD 可固定Violet死细胞染色试剂盒(V34955)进行染色,洗涤后,通过装备有 405/7 nm 激光以及 450/50 带通滤波器的流式细胞仪进行分析。 直方图结果表明阳性以及阴性的峰可以实现清晰的区分。

资源

流式细胞术学习中心—获取流式细胞术学习资源以帮助您更好的计划和进行实验。

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支持

流式细胞支持中心—查找流式细胞工作流程中各种技术支持,包括实验技巧和深入疑难解答等。

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