Yeast Viability and Vitality Assays for Flow Cytometry

我们用于流式细胞分析 FungaLight 系列酵母活性及活力检测试剂盒针对酵母细胞优化,可基于一系列细胞特性实现活细胞和死细胞的有效区分。 由于真核细胞和原核细胞存在固有的差异,对酵母的活细胞和死细胞群进行区分时必须采用专门的染料。

酵母膜完整性活力检测试剂盒

用于流式细胞分析的 LIVE/DEAD FungaLight 酵母细胞活力检测试剂使研究人员能够轻松地、可靠地在几分钟内将活的和死的酵母细胞定量区分开来。 该试剂盒包含 SYTO 9 绿光荧光核酸染色剂和红色荧光核酸染色剂碘化丙啶。 这些染料在其光谱特性和穿透健康酵母细胞的能力方面都有不同。

单独使用这两种染料时,SYTO 9 染料通常能够标记在一个群体中所有的酵母细胞,其中包括具有完整细胞膜与具有受损细胞膜的酵母细胞。 相反,碘化丙啶只能够穿透至具有受损细胞膜的酵母细胞中,从而导致当两种染料同时存在时,SYTO 9 染色剂荧光会由于荧光共振能量转移 (FRET) 而减弱。 因此,具有完整细胞膜的酵母发绿色荧光,而细胞膜受损的酵母则发红色荧光。

采用 LIVE/DEAD FungaLight 酵母活力检测试剂盒染色的酵母细胞悬浮液

图1: 采用LIVE/DEAD FungaLight 酵母活力检测试剂盒染色的酵母细胞悬浮液。 图 A:未处理的酵母培养液经洗涤并按照 SYTO 9 染料和碘化丙啶按操作说明染色后,前向散射和侧向散射散点图。 R1 区含有正常大小的酵母细胞微粒;前向散射触发器设置为排除样品中的碎片。 图 B:对混有活酵母细胞和死酵母细胞样品分析后的 R1-gated 染色图案。

引用文献

参阅 LIVE/DEAD FungaLight 酵母活力检测试剂盒的引用文献

产品 激光 Ex/Em* 活细胞染色 死细胞染色 货 号
LIVE/DEAD FungaLight 酵母活力检测试剂盒 488 nm 480/500 nm (L),
490/635 nm (D)
SYTO 9 碘化丙啶 L34952
*表示激发和发射光。 L = 存活,D = 死亡。

酵母代谢活性/活力检测试剂盒

FungaLight Yeast CFDA, AM/碘化丙啶酵母活力检测试剂盒结合了细胞可透过性酯酶底物和细胞膜完整性指示剂,从而利用流式细胞仪或显微镜对酵母细胞活力进行评估。 该试剂盒含有细胞可通透的酯酶底物 5’-二醋酸羧基荧光素(CFDA)以及细胞不可通透的核酸染料碘化丙啶。 通过使用 CFDA AM 和碘化丙啶染料的混合试剂染色,具有完整细胞膜的酯酶活性酵母细胞会被染上绿色荧光,而具有受损细胞膜的酵母细胞则会被染上红色荧光。

混有活细胞或酒精灭活细胞的酵母样品分析

图 2. FungaLight CFDA AM/碘化丙啶酵母活力流式细胞检测试剂盒. 采用 CFDA AM 染料以及碘化丙啶对酵母细胞悬浮液进行染色并采用流式细胞仪进行分析。 散点图展示的是对混有活酵母细胞或酒精灭活死酵母细胞的样品进行分析后的染色图案。 样品通过散射激光对酵母细胞群进行分群,并进行荧光补偿调节。 活性细胞可根据酯酶活性和膜完整性而与非活性细胞进行区分。

引用文献

参阅 LIVE/DEAD FungaLight 酵母活力检测试剂盒的引用文献

产品 激光 Ex/Em* 活细胞染色剂 死细胞染色剂 货 号
FungaLight CFDA, AM/碘化丙啶活力检测试剂盒 488 nm 492/517 nm (L),
490/635 nm (D)
CFDA 碘化丙啶 F34953
*表示激发和发射光。

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