HEPES
HEPES (4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸) 是一种两性离子有机化学缓冲剂,属于"Good"缓冲液,它是从Norman Good博士及其同事配制的一组缓冲液1966 (Good et. al., Biochemistry 1966) 演变而来。

“好的缓冲液”如HEPES具有以下特征:
  • pKa 值介于 6.0 和 8.0 之间
  • 高溶解度
  • 膜不透性
  • 对生化反应影响有限
  • 极低的可见光和紫外光吸收
  • 耐化学作用和酶解作用
  • 易于制备。

HEPES广泛应用于多种生物化学反应,并在某些细胞培养基中用作缓冲试剂。
碳酸氢盐是最常用的培养基缓冲系统。 这是由于碳酸氢盐对细胞具有营养作用的优势,尽管在生理 pH 下,其缓冲能力会有所降低。 加入HEPES,在pH 7.2至7.6下为细胞培养基提供了其它缓冲系统。

细胞培养基中的HEPES浓度范围为10 mM至25 mM。 Invitrogen公司的 Gibco DMEM 中其浓度达到 25mM. 在Invitrogen's Gibco DMEM培养基/F-12中,其为 15mM。 最常用的浓度为 25mM。

HEPES 不为细胞供给营养。 只有在细胞培养过程中需要长时间在 CO 2 培养箱外处理细胞时,才将其加入培养基,增强缓冲能力。