少量的样品也能获得灵敏的 qPCR 结果和快速的检出通量

当每个反应使用少于 10,000 个细胞(甚至低至 1 个细胞)进行测试时,CellsDirect™ qRT-PCR 试剂盒都能够直接从细胞获得高度灵敏和特异性的实时 qPCR 结果,而无需 RNA 纯化步骤。 CellsDirect™ 技术设计用于使用少量样品时可以有最大的灵敏度(图 1)。 该技术省去了成本高昂且耗时的 RNA 纯化过程(图 2),尤其适合高通量应用,是基因表达和 RNAi 抑制实验的理想选择。

  • Increased sensitivity - No RNA isolation steps to avoid sample loss and PCR inhibition - use of SSIII for extensive sensitivity down to 1 cell / reaction.
  • 可观的成本节省 – 与 RNA 纯化试剂盒相比,减少了操作时间并降低了成本
  • 稳定可靠的 qPCR 结果 – 可从单个到 10,000 个细胞中实时检测靶标
  • 出色的多能性 – 与多种细胞系以及来自激光捕获显微切割 (LCM) 的样品兼容

CellDirect 检测
图1. CellsDirect™ qRT-PCR kits provide sensitive detection down to a single cell

HeLa cells were lysed and resuspended according to the CellsDirect™ protocol. 制备从 10,000 个细胞到一个细胞的 10 倍系列稀释的细胞裂解物稀释液。 A low abundance target, RRKCA, was detected using a TaqMan® probe with the CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit with ROX on an ABI PRISM® 7700 instrument. Efficiency as measured from a standard curve (not shown) was 97%, with an R² value of 0.998.

CellsDirect 通量
Figure 2. CellsDirect™ technology increases throughput

CellsDirect™ qRT-PCR technology provides a significant savings of hands-on time and cost compared to conventional qRT-PCR methods involving expensive and lengthy RNA purification
steps.

CellsDirect™ 一步法 qRT-PCR 试剂盒

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR 试剂盒结合了灵敏性高、操作简便、通量高的优点。 使用 CellsDirect™ 一步法试剂盒,只需直接将细胞裂解液添加到 qRT–PCR 反应混合物中,将其放置在实时定量仪器中,然后运行。 如果要对使用 LCM 收集的样品进行基因表达检测,这些试剂盒是理想的选择(见图 3)。

CellsDirect 灵敏的结果
图 3. CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kits provide sensitive results with LCM samples

CellsDirect™ 两步法 qRT-PCR 试剂盒

CellsDirect™ 两步法 qRT - PCR 试剂盒不但具有 CellsDirect™ 技术的高灵敏度(见图 4),同时还能保存一部分 cDNA 留作它用。 Two-step kits are available for either probe/primer or SYBR® Green detection.


CellsDirect 两步法
图 4. CellsDirect™ Two-Step qRT-PCR Kit detects from one to 10,000 cells