Mammalian Cell Line Engineering Services  

创建稳定细胞系是费时且复杂的。Invitrogen GeneArt™ TAL 和 Invitrogen GeneArt™ CRISPR 的开发人员有着丰富的经验,值得信赖,他们使用市面上最稳定且最可靠的的技术之一生成定制设计的稳定细胞系。整个过程中每样物品均使用高品质产品——从 Gibco™ 细胞培养基和试剂以及细胞健康测定盒至使用 Ion Torrent™ 测序仪的新一代测序——我们的科学家将与您一起工作来设计您的稳定细胞系并实施质量控制检测来帮助确保细胞系符合您的要求。

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CRISPR 技术

通过多通路能力实现快速高效的编辑。 了解有关技术及其工作原理的更多信息。

TALEN (TAL) 技术

精确而灵活的编辑,靶向任何细胞中的任何基因。 了解有关技术及其工作原理的更多信息。

触动手指即可显现最佳 CRISPR 设计

在您的桌面上快速搜索和设计最佳 CRISPR gRNA(具有最低脱靶效应)。

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CRISPR 和 TAL 效应器编辑技术的比较

  CRISPR TAL 效应器
它是什么? RNA 分子引导的 DNA 剪切蛋白能够修饰特定的感兴趣基因 具有 DNA 裂解活性和 DNA 结合区域的蛋白通过编程以识别任何感兴趣的基因
优点 该技术价格低廉且易于使用,适用于高通量、多基因的实验
该技术针对特定靶点定制时,相比其他技术更简单和更便宜,通常出现脱靶剪切的情况更少
不足: 该技术可能会剪切非靶向位点 相关结构的生产和交付难度更大

提供的服务

GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 是用于哺乳动物细胞基因组精确修饰的高效技术;下表突出显示了仅仅一小部分关键的基因编辑应用。与我们的服务专家交谈,免费咨询适合您研究的细胞系的设计。

稳定细胞系生成服务 描述 基因组编辑 工具 供体 DNA 合成
基因敲入稳定细胞系生成 向您感兴趣的基因添加标记(如 荧光素酶、GFP);引入/纠正点突变;安全锚定位点 (AAVS1) TAL 或 CRISPR 需要
基因敲除稳定细胞系生成 基因敲除内源基因或引入缺失 TAL 或 CRISPR 建议
激活因子稳定细胞系生成 激活/上调内源基因表达 TAL 或 CRISPR NA
阻遏因子稳定细胞系生成 阻遏/下调内源基因表达 TAL 或 CRISPR NA

包括哪些服务

运用我们的专长创建稳定细胞系,使用经过验证的 GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 以及客户提供的细胞系来设计、开发和验证定制如下所述的稳定细胞系。

  • 方案转移和转染优化服务
  • 定制 GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 生产
  • 定制 GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 效率验证
  • 稳定细胞系生成
  • 稳定细胞系质量控制分析

过程与时间表

定制的稳定细胞系的交付时间具体取决于每个细胞系的生长特性和培养要求。通常项目将在 23-30 周内完成。

Workflow for GeneArt TALs or GeneArt CRISPR stable cell lines

GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 稳定细胞系的创建过程

常见问题

问题:你们如何比较 CRISPR/Cas9 系统与 TALEN 在靶点特异性方面的差异?
回答:
通常认为 TALEN 比 CRISPR 具有更高的靶点特异性剪切能力。但精心设计的 CRISPR 靶点通常产生的脱靶情况更低。CRISPR 或 TALEN 对于靶向基因座的剪切效率可以使用 GeneArt 基因组剪切检测试剂盒加以测量。

问题:为什么在使用 TAL 前需使用 CRISPR 作为筛选工具?
回答:
由于特定基因座的剪切效率取决于基因座的可接近性、染色质状态以及序列,因此建议测试感兴趣基因内的多个不同基因座/区域。采用 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑,对于每个感兴趣靶点,用户仅需修改 19-20 bp 靶标特异性的寡核苷酸。采用快速且易于使用的 GeneArt CRISPR 系统筛选出靶标并识别出具有最佳剪切效率的序列/基因座后,可以采用高特异性的 GeneArt TAL 来精确创建生物相关突变。

问题:OFP 与 CD4 在 GeneArt CRISPR 核酸酶载体中的优势/不足各是什么?
回答:
客户可以采用 OFP(橙色荧光蛋白)进行基于 FACS 的分选,或者针对 CD4 采用 FACS 或磁珠富集。请在用户手册中查找更多详细信息。

CRISPR 和 TAL 效应器编辑技术的比较

  CRISPR TAL 效应器
它是什么? RNA 分子引导的 DNA 剪切蛋白能够修饰特定的感兴趣基因 具有 DNA 裂解活性和 DNA 结合区域的蛋白通过编程以识别任何感兴趣的基因
优点 该技术价格低廉且易于使用,适用于高通量、多基因的实验
该技术针对特定靶点定制时,相比其他技术更简单和更便宜,通常出现脱靶剪切的情况更少
不足: 该技术可能会剪切非靶向位点 相关结构的生产和交付难度更大

提供的服务

GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 是用于哺乳动物细胞基因组精确修饰的高效技术;下表突出显示了仅仅一小部分关键的基因编辑应用。与我们的服务专家交谈,免费咨询适合您研究的细胞系的设计。

稳定细胞系生成服务 描述 基因组编辑 工具 供体 DNA 合成
基因敲入稳定细胞系生成 向您感兴趣的基因添加标记(如 荧光素酶、GFP);引入/纠正点突变;安全锚定位点 (AAVS1) TAL 或 CRISPR 需要
基因敲除稳定细胞系生成 基因敲除内源基因或引入缺失 TAL 或 CRISPR 建议
激活因子稳定细胞系生成 激活/上调内源基因表达 TAL 或 CRISPR NA
阻遏因子稳定细胞系生成 阻遏/下调内源基因表达 TAL 或 CRISPR NA

包括哪些服务

运用我们的专长创建稳定细胞系,使用经过验证的 GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 以及客户提供的细胞系来设计、开发和验证定制如下所述的稳定细胞系。

  • 方案转移和转染优化服务
  • 定制 GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 生产
  • 定制 GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 效率验证
  • 稳定细胞系生成
  • 稳定细胞系质量控制分析

过程与时间表

定制的稳定细胞系的交付时间具体取决于每个细胞系的生长特性和培养要求。通常项目将在 23-30 周内完成。

Workflow for GeneArt TALs or GeneArt CRISPR stable cell lines

GeneArt TAL 或 GeneArt CRISPR 稳定细胞系的创建过程

常见问题

问题:你们如何比较 CRISPR/Cas9 系统与 TALEN 在靶点特异性方面的差异?
回答:
通常认为 TALEN 比 CRISPR 具有更高的靶点特异性剪切能力。但精心设计的 CRISPR 靶点通常产生的脱靶情况更低。CRISPR 或 TALEN 对于靶向基因座的剪切效率可以使用 GeneArt 基因组剪切检测试剂盒加以测量。

问题:为什么在使用 TAL 前需使用 CRISPR 作为筛选工具?
回答:
由于特定基因座的剪切效率取决于基因座的可接近性、染色质状态以及序列,因此建议测试感兴趣基因内的多个不同基因座/区域。采用 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑,对于每个感兴趣靶点,用户仅需修改 19-20 bp 靶标特异性的寡核苷酸。采用快速且易于使用的 GeneArt CRISPR 系统筛选出靶标并识别出具有最佳剪切效率的序列/基因座后,可以采用高特异性的 GeneArt TAL 来精确创建生物相关突变。

问题:OFP 与 CD4 在 GeneArt CRISPR 核酸酶载体中的优势/不足各是什么?
回答:
客户可以采用 OFP(橙色荧光蛋白)进行基于 FACS 的分选,或者针对 CD4 采用 FACS 或磁珠富集。请在用户手册中查找更多详细信息。

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