蛋白质控制着细胞内的所有生物体系。虽然很多蛋白质各自独立地执行自身的功能,但绝大多数蛋白质需要与其他蛋白质相互作用才能保有完整的生物活性。通过免疫共沉淀(co-IP)、pull-down检测、交联、标记转移以及Far-Western印迹分析等手段对蛋白质间相互作用进行鉴定,是理解细胞内的蛋白质功能和生物学特征的关键。表1中列出根据蛋白质间的不同相互作用强度而推荐的各种分析方法。

特色蛋白质-蛋白质相互作用类别

研究体内蛋白质间相互作用的可靠工具,进行基因功能分析和药物发现研究的有价值补充手段。

包含针对定量免疫沉淀而设计的试剂盒、克隆载体和试剂

磁珠适于对各种生物筛选方法(包括噬菌体展示),可提供适宜、稳定的固相支撑。

通过凝胶电泳分离方法,对稳定的蛋白质复合物进行分析

鉴定蛋白质间相互作用时最流行的技术之一。

研究体内蛋白质间相互作用的可靠工具,进行基因功能分析和药物发现研究的有价值补充手段。

表1. 研究各种类型的蛋白质间相互作用的常见方法

方法 蛋白质间相互作用
免疫共沉淀(Co-IP) 稳定或强烈
Pull-Down检测 稳定或强烈
蛋白质相互作用交联分析 瞬时或微弱
Label 蛋白质相互作用标记转移分析 瞬时或微弱
Far-Western印迹分析 中等稳定

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