我们提供了多种灵敏易用的试剂盒,用于染色质免疫沉淀(ChIP)检测、电泳迁移率检测(EMSA)和DNA Pull-down检测。这些试剂盒可用于测定与DNA或RNA相互作用的蛋白质,分析发生相互作用的蛋白质种类,接下还可鉴定形成这些复合物所需的核酸序列,从而帮助我们最终理解特定细胞进程的调控过程。

  • 更多选择—提供不同的研究策略,以便满足各种蛋白质-核酸间相互作用和下游分析需求
  • 齐全—涵盖了应用所需的所有对照物和试剂
  • 快速—所有试剂盒均可最大限度缩短制备和样品处理时间

哪种蛋白质-核酸相互作用产品最适合您?

 
  LightShift化学发光DNA EMSA MAGnify™染色质免疫沉淀体系 Pierce琼脂糖ChIP试剂盒 LightShift化学发光RNA EMSA RNA蛋白质 Pull-down试剂盒
检测目标 蛋白质-DNA相互作用 蛋白质-DNA相互作用 蛋白质-DNA相互作用 蛋白质-RNA相互作用 蛋白质-RNA相互作用
相互作用条件 体外 体内 体内 体外 体外
核酸标记方法 生物素 无需 无需 生物素 脱硫生物素(包含在试剂盒内
基质 无需 Dynabeads® 蛋白 A/G 磁珠 ChIP级蛋白 A/G Plus琼脂糖 无需 Pierce核酸相容型链霉亲和素磁珠
主要优势 非放射性检测 定量式 定量式 非放射性检测 可以富集低丰度靶标
检测方法 免疫印迹 qPCR qPCR 免疫印迹 免疫印迹或质谱
制备和样品处理时间 4.5–5 hrs 5.5 hrs 7.5 hrs <8 hrs 3h(仅指手动操作时间)
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蛋白质-核酸相互作用产品的特征数据

四种DNA:蛋白质复合物的化学发光EMSA

生物标记的DNA探针大小为21-25 bp。EBNA反应物添加了2.5% 甘油和0.05% NP-40;AP1反应物中添加了10%甘油。Oct-1、AP1和NF-κB 转录因子的来自HeLa细胞核提取物。试剂盒中提供EBNA-1提取物作为阳性对照。非标记竞争性冷探针与标记DNA探针摩尔数相差200倍。EBNA、Oct-1和AP1的X射线曝光时间为2分钟,NF-κB的曝光时间为5分钟。

 

相对于其他厂商的ChIP 级蛋白G琼脂糖,Thermo Scientific Pierce ChIP级蛋白A/G琼脂糖提高了ChIP检测的信号特异性并降低了背景信号。

甲醛交联之后,使用Pierce ChIP检测试剂盒的染色质制备模块制备HeLa细胞裂解液。使用抗RNA聚合酶(RNA Pol II)抗体或常规兔IgG (IgG)进行免疫沉淀。分别使用封闭或未封闭的Pierce 蛋白A/G Plus琼脂糖或其他两家厂商的ChIP级蛋白G琼脂糖捕捉抗体-抗原复合物。剩余其他步骤使用Pierce ChIP检测试剂盒进行。使用扩增毗邻GAPDH启动子区域的引物进行荧光定量PCR。

RNA-蛋白 Pull-down实验实例:突变对于雄激素受体3′-UTR RNA与HuR和Poly(C)BP结合能力的影响

依照试剂盒操作流程标记野生型和突变AR 3′-UTR RNA (50 pmol)并进行 Pull-down实验。根据体积对样品进行归一化处理。.L =上样裂解液;FT =流穿;E = 洗脱。 PCBP1抗体 (1:1000)。

四种DNA:蛋白质复合物的化学发光EMSA

生物标记的DNA探针大小为21-25 bp。EBNA反应物添加了2.5% 甘油和0.05% NP-40;AP1反应物中添加了10%甘油。Oct-1、AP1和NF-κB 转录因子的来自HeLa细胞核提取物。试剂盒中提供EBNA-1提取物作为阳性对照。非标记竞争性冷探针与标记DNA探针摩尔数相差200倍。EBNA、Oct-1和AP1的X射线曝光时间为2分钟,NF-κB的曝光时间为5分钟。

 

相对于其他厂商的ChIP 级蛋白G琼脂糖,Thermo Scientific Pierce ChIP级蛋白A/G琼脂糖提高了ChIP检测的信号特异性并降低了背景信号。

甲醛交联之后,使用Pierce ChIP检测试剂盒的染色质制备模块制备HeLa细胞裂解液。使用抗RNA聚合酶(RNA Pol II)抗体或常规兔IgG (IgG)进行免疫沉淀。分别使用封闭或未封闭的Pierce 蛋白A/G Plus琼脂糖或其他两家厂商的ChIP级蛋白G琼脂糖捕捉抗体-抗原复合物。剩余其他步骤使用Pierce ChIP检测试剂盒进行。使用扩增毗邻GAPDH启动子区域的引物进行荧光定量PCR。

RNA-蛋白 Pull-down实验实例:突变对于雄激素受体3′-UTR RNA与HuR和Poly(C)BP结合能力的影响

依照试剂盒操作流程标记野生型和突变AR 3′-UTR RNA (50 pmol)并进行 Pull-down实验。根据体积对样品进行归一化处理。.L =上样裂解液;FT =流穿;E = 洗脱。 PCBP1抗体 (1:1000)。

相关产品

Thermo Scientific提供齐全、易用,能在0.5-2 h内对DNA和RNA探针进行非放射性标记的产品,同时提供分离、制备和检测蛋白质-核酸相互作用的所有其他试剂。

资源

Learning resources

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