多肽分离后,可使用反相(RP)树脂去除盐和缓冲液,其中C18基质是用于捕获疏水肽最理想基质。多肽在高水相流动相中与反相柱结合,盐和缓冲液被洗去,然后用高有机相流动相洗脱多肽。然而,包括磷酸化多肽在内的亲水肽可能不能与C18树脂很好地结合,因此建议使用石墨离心柱,可更好地进行回收。但是,C18和石墨树脂不能有效去除去垢剂,这会组分污染仪器并干扰多肽与色谱柱的结合、洗脱和电离。Thermo Scientific去垢剂去除产品可有效地结合并去除样品处理过程中常用的各种高浓度组分。

  • 种类丰富——树脂和试剂盒可用于多种多肽纯化策略
  • 经过优化—所有产品均旨在最大限度地提高多肽得率和LC-MS兼容性
  • 方便—易用的离心吸头和离心柱可更快速地纯化多肽
  • 灵活——装置可以与培养的哺乳动物细胞或组织一起使用
  • 经过验证——所有的产品均已经过全面的测试,样品也在Thermo Scientific质谱仪平台上做过进一步分析验证
     

为您的应用选择合适的多肽纯化产品

 
  Pierce 多肽脱盐柱 Pierce C18 吸头 Pierce C18 离心柱 Pierce C18 离心吸头 石墨离心柱
主要应用 采用微量离心机进行高通量多肽脱盐 采用微量离心管进行多肽脱盐 采用微量离心机进行多肽脱盐 采用微量离心机和 Stage 吸头进行多肽脱盐 采用微量离心机进行磷酸化多肽脱盐
规格 离心柱 吸头 离心柱 离心吸头 离心柱
最大结合容量 5 mg 10 µg 或 80 µg 30 µg 10 µg 100 µg
最大上样体积 300 µL 10 µL 或 100 µL 150 µL 20 µl 500 µL
处理时间 15 min 5 min 25 min 5-10 分钟 10 分钟
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性能数据

天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率

图 1. 在不同载量下使用Pierce多肽脱盐离心柱处理天然多肽的回收率。将消化的HeLa细胞裂解物(5-5,000 μg)添加到Pierce多肽脱盐离心柱并根据方案进行处理。使用Pierce 定量多肽测定法(比色法)评估回收后脱盐的多肽总量。

天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率

图 2. 天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率。 Pierce 多肽脱盐离心柱为 天然多肽和 TMT 标记多肽样品制备提供了优异的结合和回收性能。 这些色谱柱可以有效地去除冗余的非反应型TMT 分子和污染盐。 用 TMT 标签标记消化的 HeLa 细胞裂解物(500 μg),根据实验方案添加到每个离心柱上并进行处理。 使用Pierce 定量多肽测定法(比色法)评估回收后脱盐的多肽总量。

Thermo Scientific™ Pierce™ C18 离心吸头比其他畅销的 C18 吸头更胜一筹。

图 3. Thermo Scientific Pierce C18离心吸头比其他畅销的C18吸头更胜一筹。 在用Pierce C18离心吸头或 ZipTip™ 吸头(含 0.6 μL C18 树脂的 10 μL 吸头)处理10 μg等份的相同消化液后,将BSA胰蛋白酶消化物在 LTQ Orbitrap XL ETD 质谱仪上进行分析。从数据库中提取多肽洗脱的色谱图来评估样品复杂性和色谱分辨率。 使用SEQUEST搜索引擎和SwissProt数据库分析MS结果,以确定蛋白序列覆盖度。

天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率

图 1. 在不同载量下使用Pierce多肽脱盐离心柱处理天然多肽的回收率。将消化的HeLa细胞裂解物(5-5,000 μg)添加到Pierce多肽脱盐离心柱并根据方案进行处理。使用Pierce 定量多肽测定法(比色法)评估回收后脱盐的多肽总量。

天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率

图 2. 天然多肽和 TMT 标记多肽的回收率。 Pierce 多肽脱盐离心柱为 天然多肽和 TMT 标记多肽样品制备提供了优异的结合和回收性能。 这些色谱柱可以有效地去除冗余的非反应型TMT 分子和污染盐。 用 TMT 标签标记消化的 HeLa 细胞裂解物(500 μg),根据实验方案添加到每个离心柱上并进行处理。 使用Pierce 定量多肽测定法(比色法)评估回收后脱盐的多肽总量。

Thermo Scientific™ Pierce™ C18 离心吸头比其他畅销的 C18 吸头更胜一筹。

图 3. Thermo Scientific Pierce C18离心吸头比其他畅销的C18吸头更胜一筹。 在用Pierce C18离心吸头或 ZipTip™ 吸头(含 0.6 μL C18 树脂的 10 μL 吸头)处理10 μg等份的相同消化液后,将BSA胰蛋白酶消化物在 LTQ Orbitrap XL ETD 质谱仪上进行分析。从数据库中提取多肽洗脱的色谱图来评估样品复杂性和色谱分辨率。 使用SEQUEST搜索引擎和SwissProt数据库分析MS结果,以确定蛋白序列覆盖度。

使用中的的 C18 离心吸头视频


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Resources