为从低丰度蛋白质中检测肽和/或降低用于蛋白质组分析的样品复杂性,后消化、肽富集和/或分馏往往非常必要。

采用以下策略有助于增强目标蛋白质的鉴定:利用翻译后修饰(PTM)特异性亲和结合(例如磷酸肽富集),或通过分馏(例如通过疏水性分离肽的高pH反相色谱)。

新型Thermo Scientific™ ActivX™探针和富集试剂盒可对几种酶类进行特异性定位,其中包括激酶、GTP酶以及丝氨酸水解酶。这些探针可在蛋白质水平的活性位点进行共价标记,并可在消化后进行富集。

  • 全面——适用于多种多肽富集和/或分馏方法的试剂和试剂盒
  • 优化——所有试剂盒都可最大限度提高蛋白质产量并增加靶蛋白的I.D.
  • 方便——易于使用的离心柱、吸头或磁性材料可以快速处理多肽样品
  • 灵活兼容——与培养的哺乳动物细胞或组织均可兼容
  • 确保验证——所有的产品均已经过全面的测试,经试剂盒检测过的样品也在Thermo Scientific™质谱平台上做过进一步分析验证

为您的应用选择合适的肽富集或分馏产品

 
  Fe-NTA 磷酸肽富集试剂盒 TiO2 磷酸肽富集和清洗试剂盒 磁性TiO2 磷酸肽富集试剂盒 高pH反相分馏试剂盒 带有ATP探针的激酶富集试剂盒
靶标 磷酸肽 磷酸肽 磷酸肽 所有多肽 ATP结合位点
结合/标记机制 金属离子螯合物对磷酸基团的亲和力 金属氧化物对磷酸基团的亲和力 金属氧化物对磷酸基团的亲和力 疏水性相互作用 生物素化ATP类似物识别活性位点的赖氨酸
富集方法 IMAC-琼脂糖树脂

球形多孔TiO2

TiO2 涂层磁性颗粒 疏水性聚合物基树脂 固定化链霉亲和素琼脂糖树脂
装载量/反应* 0.5–5 mg 0.5–3 mg 100 µg 10–100 µg 冻干粉
规格 离心柱 吸头 磁珠 离心柱 离心柱
#洗脱馏分数 1 1 1 8 1
处理时间 45–60 min 45–60 min 15 min 30–60 min 6.5小时+消化
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*每个反应的装载量均基于典型哺乳动物细胞培养的蛋白消化样品而确定
 

用于质谱肽富集和分馏的其他产品

性能数据

The Thermo Scientific Pierce Fe-NTA Phosphopeptide Enrichment Kit effectively captures phosphopeptides with multiple phosphates.

Thermo Scientific Pierce Fe-NTA磷酸肽富集试剂盒可有效捕获含多种磷酸酯的磷酸肽。

每个肽的磷酸数量

1 2 3 4 5 6 总计
TiO2 492 103 8 4 0 1 608
Fe-NTA IMAC 234 34 216 3 1 0 488
重叠 155 0 1 0 0 0 156

用TiO2和Fe-NTA IMAC选择性富集单一和多磷酸化的磷酸肽。多次重复实验后,所得磷酸肽富集结果的平均值显示了,使用任一(以上两者之中)方法进行富集所得到的每个肽含有一个或多个磷酸的磷酸肽的数目。肽谱综合结果由Proteome Software Scaffold 3.0中导出,并通过Microsoft™ Excel™软件分析得到。

The Thermo Scientific Pierce Fe-NTA Phosphopeptide Enrichment Kit effectively captures phosphopeptides with multiple phosphates.

Thermo Scientific Pierce Fe-NTA磷酸肽富集试剂盒可有效捕获含多种磷酸酯的磷酸肽。

每个肽的磷酸数量

1 2 3 4 5 6 总计
TiO2 492 103 8 4 0 1 608
Fe-NTA IMAC 234 34 216 3 1 0 488
重叠 155 0 1 0 0 0 156

用TiO2和Fe-NTA IMAC选择性富集单一和多磷酸化的磷酸肽。多次重复实验后,所得磷酸肽富集结果的平均值显示了,使用任一(以上两者之中)方法进行富集所得到的每个肽含有一个或多个磷酸的磷酸肽的数目。肽谱综合结果由Proteome Software Scaffold 3.0中导出,并通过Microsoft™ Excel™软件分析得到。

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