细胞裂解及细胞器分析

此类试剂盒经过特别优化,可用于在1-3小时内从不同的细胞组分之中逐步分离、富集和提取蛋白质,适用于细胞质、细胞膜、细胞核、染色质结合蛋白以及细胞支架蛋白等。分离所得大多数组分与蛋白质检测和常规的下游应用兼容。

选择适合您的哺乳动物组织或细胞的亚细胞组分分离试剂盒

NE-PER核蛋白提取试剂盒 Mem-PER Plus膜蛋白提取试剂盒 细胞表面蛋白分离试剂盒 亚细胞蛋白组分分离试剂盒(细胞或组织) 突触蛋白分离试剂盒
兼容的样品类型 组织和培养的哺乳动物细胞 组织和培养的哺乳动物细胞 培养的哺乳动物细胞 组织或培养的哺乳动物细胞 大脑组织和原代神经细胞
分离的组分 细胞核、细胞质 膜内在蛋白和膜相关蛋白 表面膜蛋白 细胞核、细胞质、细胞膜、细胞骨架、染色质结合蛋白 突触蛋白
样品处理时间 2小时 1小时 <1小时 2-3小时 <1小时
需要机械破碎 需要,处理组织时需要 是的,处理组织时需要 不需要 是的,处理组织时需要 是的,处理组织时需要
处理的样品量 50个样品,各含2百万细胞(20 µL) 50个样品(各含5百万细胞);或25个样品(来自于20-40 mg组织的的样品) 8次实验,四个长满的T75培养瓶 25个样品(来自于200 mg组织的提取物),或者50个样品(各含2百万细胞,20 µL) 10 g组织或500 个35 mm原代神经细胞培养皿
兼容的蛋白质定量方法 BCA (CER 1:4稀释)、Coomassie™ Plus (CER 1:4稀释)、 Pierce 660、去垢剂兼容型 Bradford BCA、Pierce 660、去垢剂兼容型 Bradford Pierce 660(需要使用兼容性试剂) BCA(所有组分)、Pierce 660(PEB除外);NEB,同时兼容Coomassie™ Plus和去垢剂兼容型 Bradford BCA
兼容的下游应用 二者同时适用:蛋白质免疫印迹、ELISA、 EMSA、报告基因检测、酶活性测定、胺反应标记 仅CER:RNA EMSA、激酶检测及RT-PCR 免疫沉淀、蛋白质免疫印迹、ELISA、胺反应标记 蛋白质免疫印迹、ELISA 免疫沉淀、蛋白质免疫印迹、ELISA、 EMSA、报告基因检测、酶活性测定、胺反应标记 神经递质释放检测、酶活性测定、免疫分析、色谱分析、电泳
建议采用蛋白酶或磷酸酶抑制剂? 是的,二者均建议使用 是的,二者均建议使用 是的,二者均建议使用 二者均包含在试剂盒中 是的,二者均建议使用
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亚细胞组分分离概述

亚细胞组分分离操作流程概览图。先用细胞质抽提缓冲液(CEB)同细胞进行孵育,再使用细胞膜抽提取缓冲液(MEB)及细胞核抽提取缓冲液(NEB),依次提取细胞区室。随后向细胞沉淀中含有染色质结合蛋白的NEB提取物中加入微球菌核酸酶(MNase),最后再加入沉淀提取缓冲液(PEB)以溶解细胞骨架蛋白。

从不同的小鼠组织制备的细胞质和细胞核提取物蛋白解读。采集Swiss Webster小鼠组织(40 mg),用PBS漂洗后采用NE-PER细胞核和细胞质提取试剂盒进行裂解。使用Pierce 660nm蛋白质定量试剂盒(货号22660)测定提取物浓度。所得的值为两次独立操作的平均值。