我们提供了一系列用于重组蛋白质纯化的Thermo Scientific™纯化树脂,可用于从大肠杆菌或毕赤酵母等培养物中纯化重组蛋白质。此类树脂现可提供多种规格可满足多种需求,可用于筛选、分批纯化、中试及工艺纯化。Superflow树脂已经过充分的化学鉴定。

  • 产品选择范围广– 提供有一系列有助于达成您纯化目标的配体和支持物
  • 高性能 – 树脂可以最大限度提高结合能力、纯度、批次规格和/或处理时间
  • 灵活 – 现可提供多种规格,包括大包装树脂、离心柱和试剂盒、FPLC柱试剂条以及96孔离心反应板

选择合适为您重组蛋白纯化需求选择所需的最的佳树脂

 
  HisPur Ni-NTA 琼脂糖树脂 HisPur Ni-NTA Superflow树脂 HisPur Cobalt 钴琼脂糖树脂 HisPur Cobalt 钴Superflow树脂 谷胱甘肽琼脂糖树脂 谷胱甘肽Superflow树脂
靶标 His标签记的融合蛋白 His标签记的融合蛋白 His标签记的融合蛋白 His标签记的融合蛋白 GST标签记的融合蛋白 GSTt标签记的融合蛋白
静态结合能力† ~60 mg/mL >60 mg/mL ≥15 mg/mL >30 mg/mL ~40 mg/mL ~30 mg/mL
动态结合能力† 18 mg/mL 20 mg/mL ND* >20 mg/mL ~10.5 mg/mL ~10 mg/mL
纯度 更较高 更较高
最大流速 800 cm/hr 1,200 cm/hr 800 cm/hr 1,200 cm/hr 800 cm/hr 1,200 cm/hr
最大压力 0.35 MPa 0.65 MPa 0.35 MPa 0.65 MPa 0.35 MPa 0.65 MPa
支持介质 6%琼脂糖 高度交联6%琼脂糖 6%琼脂糖 高度交联6%琼脂糖 6%琼脂糖 高度交联6%琼脂糖
应用规模 筛选、管式、中试/td> 分批、管式、工艺 筛选、管式、中试 管式、中试、工艺 筛选、管式、中试 管式、中试、工艺
可重复使用次数 5 25 5 25 5 25
  88221 (10 mL),
88222 (100 mL), 88223 (500 mL)
25214 (10 mL), 25215 (50 mL), 25216 (250 mL), 25217 (1 L) 89964 (10 mL), 89965 (100 mL), 89966 (500 mL) 25228 (10 mL), 25229 (50 mL), 25230 (250 mL), 25231 (1 L) 16100 (10 mL), 16101 (100 mL), 16102 (500 mL) 25236 (10 mL), 25237 (50 mL), 25238 (250 mL), 25239 (1 L)

†详见产品页面。
*不确定。

小规模纯化解决方案

除了大包装琼脂糖树脂外,我们还提供可快速处理样品的便捷传统的、基于琼脂糖的离心柱(见下表)。这一类离心柱也可以试剂盒的形式提供,其中包括含有了结合和洗脱所需的所有缓冲液。FPLC柱可兼容目前流行的大多数自动化FPLC体系。为了高通量处理样品,此类树脂也可提供方便传统的96孔离心板形式以用于高通量样品处理规格。

选择适合于您的实试验的小规模纯化产品

Resin Format Resin volume (mL) Catalog #
Ni-NTA Spin Column 0.2 88224
Ni-NTA Spin Column 1 88225
Ni-NTA Spin Column 3 88226
Ni-NTA Spin Column Kit 0.2 88227
Ni-NTA Spin Column Kit 1 88228
Ni-NTA Spin Column Kit 3 88229
Ni-NTA Chromatography Cartridge 1 90098
Ni-NTA Chromatography Cartridge 5 90099
Ni-NTA 96-well Spin Plate 0.1 88230
Cobalt Spin Column 0.2 89967
Cobalt Spin Column 1 89968
Cobalt Spin Column 3 89969
Cobalt Spin Column Kit 0.2 90090
Cobalt Spin Column Kit 1 90091
Cobalt Spin Column Kit 3 90092
Cobalt Chromatography Cartridge 1 90093
Cobalt Chromatography Cartridge 5 90094
Cobalt 96-well Spin Plate 0.1 90095
Glutathione Spin Column 0.2 16103
Glutathione Spin Column 1 16104
Glutathione Spin Column 3 16105
Glutathione Spin Column Kit 0.2 16106
Glutathione Spin Column Kit 1 16107
Glutathione Spin Column Kit 3 16108
Glutathione Chromatography Cartridge 1 16109
Glutathione Chromatography Cartridge 5 16110
Glutathione 96-well Spin Plate 0.1 16111
|6xHis标签记蛋白的高得率、高纯度、中等规模纯化。| 采用200 mL含有HisPur Ni-NTA Superflow琼脂糖或Qiagen™ Ni-NTA Superflow 的层析柱在3小时内纯化超过4 g过量表达的6xHis-GFP。以20 mL/min的速率,上样1 Ll裂解液,再然后采用含有30 mM 咪唑异吡唑的洗涤缓冲液洗涤至基线澄清。然后采用含有300 mM 咪唑异吡唑的洗涤缓冲液洗脱结合的蛋白质。富集含有纯化的6xHis-GFP 的组分,采用Pierce 660 nm 蛋白定量(货号22662)法进行定量。通过分离SDS-PAGE 上样、流穿通、洗涤和洗脱的组分用SDS-PAGE分离,采用Imperial 蛋白染色剂(货号24615)染色,然后采用myImage分析软件(货号62237)测定纯度。
|Thermo Scientific Pierce谷胱甘肽琼脂糖可实现极高的GST融合蛋白得率和纯度。|采用来自于不同供应商的50 µL GSH树脂孵育培养含有过量表达GST的大肠杆菌裂解物(14.4 mg总蛋白),然后分别依照制造商的说明进行纯化。采用Thermo Scientific™ Coomassie Plus考马斯亮蓝蛋白质定量分析测定方法定量树脂中洗脱出的GST(得率)。通过测定染色凝胶电泳道图的光密度,评估蛋白纯度。M= 分子量标准品志物;L=上样裂解物彩照; FT=流穿通;E=洗脱。

其它重组蛋白纯化树脂

其他常用于哺乳动物蛋白表达体系的标签包括HA或c-Myc。此类标签非常适合于蛋白富集应用,如免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀(co-IP)。

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