综述性文章

siRNA设计指导准则
描述:使用siRNA进行基因沉默是分子生物学中的一种快速发展的工具。

siRNA实验成功的十大技巧

优化siRNA进入培养细胞的十大方式

确保RNAi数据有效的十大方法

实验方案

siRNA寡核苷酸的保护与操作
描述:
所有用于Ambion的siRNA合成及纯化过程的试剂均经过检测,确保不含核酸酶。然而,RNA寡核苷酸对操作过程中引入的外源性核糖核酸酶非常敏感,容易发生降解。

技术说明

评估siRNA转染效率的新方法  -  技术说明 12(3)
描述: 使用我们全新的KDalert™ GAPDH Assay Kit及微孔板荧光计,您可在不到30分钟的时间内完成对培养的人、小鼠或大鼠细胞中的GAPDH酶活性的可靠测量。

siRNA库使用便捷吗?   -  技术说明 12(1)
描述: 对两种不同的大规模筛选实验方案进行了对比。

Assessing Gene Function with siRNA Libraries  - 技术说明 11(3)
描述: 这里会介绍一项实验,其中会对Silencer™ Kinase siRNA文库中的每条siRNA都进行了测试,以确定其对细胞增殖和有丝分裂指数的影响

Cells-to-cDNA™ II应用 | 对siRNA靶向基因表达进行定量
描述: 在不提取RNA的情况下对转染了siRNA的细胞中的基因表达进行定量

设计RNAi实验时控制细胞实验的可变性

控制您的siRNA研究 | 经验证的siRNA对照及相应的一抗  - 技术说明 10(1)
描述: Ambion引入了一条靶向ß-actin的对照siRNA,以及可识别ß-actin的一抗,可用于在免疫荧光实验中检测由RNAi诱导的蛋白质水平的下降。

描述生存素在肿瘤形成中的作用:一项siRNA研究   -  技术说明 13(4)
描述:在该研究中,使用靶向siRNA来改变生存素的表达水平,然后对转染细胞进行一系列的生物化学及细胞基础上的分析,以评估已知的可作为细胞凋亡的指示因子水平,从而进一步了解生存素在癌症中扮演的角色。

siRNA诱导的基因沉默的持续时间:解答您的问题   -  技术说明 15(3)
描述: 在本文中,我们回答了一系列与转染siRNA至人细胞后RNAi效应的持续时间相关的问题。

增强型siRNA转染及长效基因沉默  -  技术说明 12(1)
描述: 使用Ambion全新的pSilencer™ 5.1 Retro System,利用逆转录载体稳定表达siRNA

确保RNAi成功  -  技术说明 13(4)
描述: Ambion与Applied Biosystems共同提供了一整套用于基因沉默实验的便捷的解决方案。

siRNA实验中的实验可变性及重复组   -  技术说明 14(4)
描述: 本文描述了RNAi实验中几种不同来源的变量,以及如何确定重复组的恰当数量。

对基因沉默进行快速精确的验证 | Silencer® siRNA及TaqMan® Gene Expression Assay  -  技术说明 14(1)
描述: 本文阐释了综合使用Ambion的Silencer® siRNA及Applied Biosystems的TaqMan® Gene Expression Assay从而获得高质量、精确且可重复的基因沉默数据。

对siRNA介导的基因沉默进行快速精确的评估   - 技术说明 12(2)
描述: 本文阐释了综合使用Ambion的Silencer® siRNA及Applied Biosystems的TaqMan®基因表达Assays可以获得高质量、精确、可重复的基因沉默数据。

五种制备siRNA的方式   -  技术说明 10(3)
描述: 本文综述了制备用于基因沉默研究的siRNA的五种方法。

对siRNA进行荧光标记从而在活细胞中对其进行追踪  -  技术说明 9(4)
描述: 使用Cy3或FAM来标记siRNA,从而对其亚细胞定位、转染效率进行分析,并可用于鉴定已转染细胞以进行进一步分析。

使用RNAi进行基因特异性沉默  - 技术说明 10(1)
描述: 对RNAi机制的概述(配图)。

控制您的siRNA实验
描述: Applied Biosystems的研发人员提供了关于正确使用siRNA实验对照的建议。

开始进行RNAi  - 技术说明 13(1)
描述: Ambion最新提供的RNA干扰研究指南中的一些介绍信息举例。

开始进行体内RNAi  -  技术说明 15(2)
描述: 本文描述了使用动物模型进行的RNAi实验,其中使用了流体动力尾部静脉注射的方式来注射siRNA。

siRNA的高通量转染:示例   -  技术说明 12(3)
描述: 浏览Ambion最近发表的文章中的siRNA筛选数据,这些数据可用来鉴定细胞增殖过程中相关的激酶基因。

匹配siRNA与Assays   -  技术说明 11(4)
描述: Ambion的siRNA免去了siRNA设计及测试过程中的猜测工作,而Applied Biosystems的Taqman®基因表达Assays则提供了一种快速简单的mRNA敲减检测方法

新一代siRNA让您的沉默实验更加得心应手 - 技术说明 15(1)
描述: Ambion® Silencer® Select siRNA采用了最新的siRNA设计方法以及针对脱靶效应的预测算法的改进,并进行了化学修饰,可确保获得具有无与伦比的效率、性能及特异性的siRNA。

优化RNAi中的siRNA转染   -  技术说明 12(1)
描述: 
低转染效率和低细胞活性是基因沉默实验失败的最常见原因。

在动物体内进行RNAi实验  -  技术说明 13(1)
描述: 本文介绍体内RNAi,并包含对siRNA局部注射及系统性转运的讨论。

在同一实验中对siRNA转染及细胞活性进行快速评估  -  技术说明 13(1)
描述: Ambion的KDalert™ GAPDH Assay仅需简单3步即可对培养细胞中siRNA诱导的GAPDH敲减进行定量,是优化转染实验的一种理想工具。

RNAi四步法工作流程  - 技术说明 15(1)
描述: 该文章简要概括了使用siRNA进行典型RNAi实验的工作流程。

RNAi作为哺乳动物基因分析的工具:siRNA的应用   -  技术说明 10(5)
描述: Ambion的一位资深科学家探讨了RNAi在哺乳动物系统中的一些更卓越的应用,以及来自文献中的部分应用实例。

RNAi:长度很重要  -  技术说明 9(5)
描述:  dsRNA的长度与基因沉默效率之间是如何相关的。

成功进行siRNA文库筛选的建议  -  技术说明 11(6)
描述: Ambion的科学家确定出5种可以显著改善siRNA文库筛选结果的流程。

siRNA浓度降低减少了脱靶效应  -  技术说明 15(2)
描述: Silencer® Select siRNA能够实现更高的性能和特异性以及更低的脱靶效应,因而可在使用更低浓度siRNA的情况下实现最高的敲减水平。

可重复转染siRNA至细胞  -  技术说明 14(2)
描述: siPORT™ NeoFX™是一种脂质体类转染试剂,可用于对贴壁细胞分板再培养后的高效转染,并且不会提高细胞毒性。

新用户如何运用RNAi  -  技术说明 11(5)
描述:
RNA干扰的生物学机制是通过双链RNA(dsRNA)靶向互补mRNA并使其发生降解从而诱导基因沉默,该机制正在改变研究人员进行基因功能研究的方式。

选择siRNA序列以插入pSilencer载体   -  技术说明 9(5)
描述: 本文是识别对siRNA诱导的降解敏感的靶向基因序列的指南。

建立成功的siRNA文库筛选    -  技术说明 11(6)
描述: 对有效筛选流程的概述。

Silencer® siRNA文库 | 靶向重要功能基因的siRNA文库
描述: 新版Ambion 0.25 nmol规格的Silencer® siRNA文库已经推出。本文含有该文库的相关细节信息,包括每个文库靶向基因的数量和类别等。

Silencer® siRNA Screening Control Panel | RNAi筛选实验的有效对照  - 技术说明 13(1)
描述: 概述了Ambion最新的Silencer® siRNA Screening Control Panel,包括用于确定siRNA筛选实验中转染效率及生效阈值的阳性和阴性对照siRNA。

Silencer® siRNA Starter Kit | 专供新用户进行基因沉默的试剂盒   -  技术说明 13(1)
描述: Silencer siRNA文库是由一组靶向功能基因组到全基因组中特定基因群的siRNA组成的,所以特别适于通路分析和标靶鉴定及验证。

Silencer® siRNA文库 | “照亮”基因的功能  -  技术说明 14(2)
描述: Silencer siRNA文库是由一组靶向功能基因组到全基因组中特定基因群的siRNA组成的,所以特别适于通路分析和标靶鉴定及验证。.

带有筛选标记物的siRNA表达载体  - 技术说明 10(1)
描述:
现推出六种全新的pSilencer™ siRNA表达载体,每一种均带有有助于在哺乳动物培养细胞中进行筛选的抗生素抗性基因。

通过siRNA筛选一周内完成对上千个标靶基因的验证   - 技术说明 16(1)
描述: 对siRNA敲减进行验证通常要比对其进行筛选花费更长时间。Applied Biosystems的两位科学家对这一步骤进行了超过10倍的改进,对靶向超过500个基因的1500多条siRNA进行验证仅需一周时间。

siRNA设计全部包含在算法内   - 技术说明 11(3)
描述: Ambion的 Silencer™ Pre-designed, Validated and Library siRNA设计的算法的有效性已经通过大约1100条不同的siRNA及400个内源转录进行验证。

siRNA诱导的mRNA敲减及表型:如何测量及何时进行测量 -  技术说明 15(3)
描述:在该报告中,Applied Biosystems的科学家们对siRNA转染后不同时间点的预期表型持续时间与mRNA敲减测量进行了平行对比研究。

改进您的siRNA转染  - 技术说明 11(6)
描述: 使用siPORT™ NeoFX™转染试剂来进行快速可重复的siRNA转染。

使用更低成本测试更多siRNA  -  技术说明 9(6) 
描述: Ambion的全新Silencer™ siRNA Contruction Kit制得可用于转染的siRNA,而价格则比化学合成方法低不少。

优化siRNA转运的工具 | 确定培养细胞中siRNA转染的最佳条件   -  技术说明 14(2)
描述: Ambion的siRNA转染优化试剂盒和试剂非常易于使用,并且包含了关于快速进行流程优化的详细介绍。

理解siRNA数据的计算方法  -  技术说明 14(3)
描述:
本文描述了如何使用实时定量RT-PCR对siRNA效率进行评估时确定剩余基因表达水平百分比及基因表达敲减百分比。

在功能性基因组实验中使用验证过的siRNA  -  技术说明 10(3)
描述: 使用经验证的靶向TNFalpha受体的Silencer siRNA来鉴定与NF-kappaB通路中TNFalpha诱导激活相关的基因产物。

可视化哺乳动物细胞中的siRNA  -  技术说明 9(3)
描述:
使用荧光素或Cy3对靶向GAPDH和c-myc的 siRNA进行标记已被证实对沉默效率没有影响,而且该方法可以在转染后实现对这些分子的分布规律的可视化观察。

将siRNA克隆至pSilencer时应当使用何种感受态细胞
描述: Applied Biosystems的研发人员提供了关于合理利用siRNA实验对照的建议。