Durch den hohen Background kann das Klonieren von Produkten mit stumpfen Enden und langer PCR Schwierigkeiten bereiten und ergibt oft nur einen geringen Prozentsatz an Rekombinanten. Unsere spezielle Zero Background™ Technologie verwendet das letale ccdB-Gen (control of cell death), um eine hocheffiziente Klonierung zu ermöglichen.

Das ccdB-Gen wird in die Klonierungsstelle des Zero Background™ Vektors eingebracht. Das ccdB-Protein vergiftet die bakterielle Gyrase, was zur Schädigung des Hose-Chromosoms und zum Zelltod führt. Wenn ein Insert in den Vektor ligiert wird, wird das ccdB-Gene gestört, sodass nur Kolonien von Rekombinanten wachsen können. Durch die Eliminierung des hohen Vektor-Backgrounds wird mit der Zero Background™ Technologie eine Ausbeute an Rekombinanten von nahezu 100 % erzielt, d. h. das Screening von Hunderten von Background-Kolonien kann entfallen.

Zero Blunt® Klonierungs-Kits

Zum Lieferumfang von Zero Blunt® Klonierungs-Kits gehört außer den eigentlichen Zero Blunt® Klonierungs-Kits auch die ExpressLink™ T4 DNA-Ligase , so dass die Ligation bei Raumtemperatur innerhalb von nur 15 Minuten durchgeführt werden kann, wobei mit den Reaktionen üblicherweise eine Ausbeute an Inserts enthaltenden Rekombinanten von >80 % erzielt wird.

Zero Blunt® TOPO® Klonierung

Kommen Sie in nur 5 Minuten von der PCR zum Klon – mit der Zero Blunt® TOPO® Technologie. Zero Blunt® TOPO® erzielt eine Ausbeute an Klonen mit dem richtigen Insert von bis zu 95 %, und dies ohne Ligase, Post-PCR-Verfahren oder PCR-Primer, die spezifische Sequenzen enthalten.