Mammalian Cell Line Engineering Services  

La création de lignées cellulaires stables est un travail complexe et chronophage. Les développeurs fiables et expérimentés des systèmes Invitrogen GeneArt™ TAL et Invitrogen GeneArt™ CRISPR peuvent concevoir des lignées cellulaires stables, générées sur mesure grâce à une des technologies les plus robustes et fiables du marché. En utilisant des produits de qualité tout au long du processus, des milieux et réactifs de culture cellulaire Gibco™ et dosages de santé cellulaire au séquençage de nouvelle génération à l’aide des séquenceurs Ion Torrent™, nos scientifiques travaillent avec vous pour concevoir votre lignée cellulaire stable et réaliser les tests de contrôle qualité permettant de garantir que la lignée cellulaire répond à vos exigences.

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Technologie CRISPR

Modifications rapides et efficaces, avec des capacités de multiplexage. Pour en savoir plus sur la technologie et son fonctionnement.

Technologie TALEN (TAL)

Modifications précises et flexibles, ciblant n’importe quel gène d’une cellule. Pour en savoir plus sur la technologie et son fonctionnement.

Conception CRISPR optimale sur simple effleurement du doigt

Effectuez des recherches rapides et concevez des ARNg CRISPR optimum, avec peu d’effets hors cible sur votre bureau.

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Comparaison des technologies de modification CRISPR et à effecteur de TAL

  CRISPR Effecteur de TAL
De quoi s’agit-il ? Une protéine de clivage d’ADN guidée par une molécule d’ARN, capable de modifier un gène d’intérêt spécifique Une protéine contenant une activité de clivage d’ADN et une région de liaison de l’ADN pouvant être programmée pour reconnaître n’importe quel gène d’intérêt
Avantages Cette technique abordable et simple à utiliser permet de réaliser des expériences multigéniques à haut débit
 Cette technique est plus simple et moins chère à personnaliser pour des cibles spécifiques que les autres technologies et se caractérise généralement par moins de clivages hors cible
Inconvénients Cette méthode peut cliver des sites hors cibles. Les constructions sont plus difficiles à obtenir et à transmettre

Services proposés

Les technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR permettent d’apporter de façon efficace des modifications précises au niveau du génome de cellules de mammifère. Quelques-unes de ces applications clés de modification des gènes sont répertoriées dans le tableau ci-dessous. Discutez avec notre expert en matière de services et bénéficiez d’une consultation gratuite concernant la conception de la lignée cellulaire la mieux adaptée à vos travaux de recherche.

Service de génération de lignée cellulaire stable Description Outil  de modification génomique Synthèse de l’ADN du donneur
Génération d’une lignée cellulaire stable activée Ajoutez des marqueurs (par ex. : luciférase, GFP) au gène d’intérêt, introduisez / corrigez des mutations de points ; sécurisez un site refuge (AAVS1) TAL ou CRISPR Obligatoire
Génération d’une lignée cellulaire stable désactivée Désactivez un gène endogène ou effectuez des délétions TAL ou CRISPR Recommandé
Génération d’une lignée cellulaire stable avec activateur Activez / régulez à la hausse l’expression de gènes endogènes TAL ou CRISPR S.O.
Génération d’une lignée cellulaire stable avec répresseurs Réprimez / régulez à la baisse l’expression de gènes endogènes TAL ou CRISPR S.O.

Ce que comprend le service

Nous mettrons notre expertise en application en vue de créer des lignées cellulaires stables permettant de concevoir, développer et valider une lignée cellulaire sur mesure stable, comme décrit ci-après, à partir de technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR et d’une lignée cellulaire fournie par le client.

  • Service d’optimisation de transfection et de transfert de protocole
  • Production sur mesure de solutions GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR
  • Validation de l’efficacité des technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR sur mesure
  • Génération de lignée cellulaire stable
  • Analyse de contrôle de la qualité d’une lignée cellulaire stable

Processus et calendrier

La vitesse à laquelle nous pouvons générer une lignée cellulaire sur mesure stable dépend des caractéristiques de croissance de chaque lignée cellulaire, ainsi que des exigences relatives à la mise en culture. Les projets sont généralement menés à bien dans un délai de 23 à 30 semaines.

Workflow for GeneArt® TALs or GeneArt® CRISPR stable cell lines

Processus de création de lignées cellulaires stables selon des technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR

Foire aux questions

Q. Comment se positionne le système CRISPR/Cas9 doté de produits TALEN en termes de spécificité de la cible ?
R. Il est de croyance générale que les TALEN ont un clivage spécifique de la cible supérieur à celui des CRISPR. Une conception soigneuse de la cible CRISPR permet généralement d’obtenir moins d’effets hors cible. L’efficacité du clivage via les méthodes CRISPR ou TALEN pour le locus ciblé peut être mesurée à l’aide du kit de détection de clivage génomique GeneArt®.

Q. Pourquoi utiliser CRISPR en tant qu’outil d’analyse avant de passer aux TAL ?
R. L’efficacité de clivage d’un locus donné dépendant de l’accessibilité du locus, de la séquence et de l’état de la chromatine, il est conseillé de tester plusieurs loci / régions différent(e)s pour un même gène. Dans le cas d’une modification de génome selon la méthode CRISPR/Cas9, l’utilisateur ne doit changer que l’oligo cible 19-20 bp pour chaque cible. Une fois les cibles analysées et la séquence / le locus offrant le clivage le plus efficace identifié(e) avec le système GeneArt® CRISPR facile et rapide à utiliser, les mutations biologiques significatives peuvent être créées de façon précise avec des GeneArt® TAL de haute spécificité.

Q. Quels avantages / désavantages présente OFP par rapport à CD4 au niveau des vecteurs de nucléase GeneArt® CRISPR ?
R. Un tri FACS avec OFP (protéine fluorescente orange) peut être effectué ; pour le CD4, FACS ou un enrichissement à partir de microbilles peut être utilisé. Vous trouverez plus d’informations dans le manuel de l’utilisateur.

Comparaison des technologies de modification

Comparaison des technologies de modification CRISPR et à effecteur de TAL

  CRISPR Effecteur de TAL
De quoi s’agit-il ? Une protéine de clivage d’ADN guidée par une molécule d’ARN, capable de modifier un gène d’intérêt spécifique Une protéine contenant une activité de clivage d’ADN et une région de liaison de l’ADN pouvant être programmée pour reconnaître n’importe quel gène d’intérêt
Avantages Cette technique abordable et simple à utiliser permet de réaliser des expériences multigéniques à haut débit
 Cette technique est plus simple et moins chère à personnaliser pour des cibles spécifiques que les autres technologies et se caractérise généralement par moins de clivages hors cible
Inconvénients Cette méthode peut cliver des sites hors cibles. Les constructions sont plus difficiles à obtenir et à transmettre
Services proposés

Services proposés

Les technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR permettent d’apporter de façon efficace des modifications précises au niveau du génome de cellules de mammifère. Quelques-unes de ces applications clés de modification des gènes sont répertoriées dans le tableau ci-dessous. Discutez avec notre expert en matière de services et bénéficiez d’une consultation gratuite concernant la conception de la lignée cellulaire la mieux adaptée à vos travaux de recherche.

Service de génération de lignée cellulaire stable Description Outil  de modification génomique Synthèse de l’ADN du donneur
Génération d’une lignée cellulaire stable activée Ajoutez des marqueurs (par ex. : luciférase, GFP) au gène d’intérêt, introduisez / corrigez des mutations de points ; sécurisez un site refuge (AAVS1) TAL ou CRISPR Obligatoire
Génération d’une lignée cellulaire stable désactivée Désactivez un gène endogène ou effectuez des délétions TAL ou CRISPR Recommandé
Génération d’une lignée cellulaire stable avec activateur Activez / régulez à la hausse l’expression de gènes endogènes TAL ou CRISPR S.O.
Génération d’une lignée cellulaire stable avec répresseurs Réprimez / régulez à la baisse l’expression de gènes endogènes TAL ou CRISPR S.O.
Éléments inclus

Ce que comprend le service

Nous mettrons notre expertise en application en vue de créer des lignées cellulaires stables permettant de concevoir, développer et valider une lignée cellulaire sur mesure stable, comme décrit ci-après, à partir de technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR et d’une lignée cellulaire fournie par le client.

  • Service d’optimisation de transfection et de transfert de protocole
  • Production sur mesure de solutions GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR
  • Validation de l’efficacité des technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR sur mesure
  • Génération de lignée cellulaire stable
  • Analyse de contrôle de la qualité d’une lignée cellulaire stable
Processus et calendrier

Processus et calendrier

La vitesse à laquelle nous pouvons générer une lignée cellulaire sur mesure stable dépend des caractéristiques de croissance de chaque lignée cellulaire, ainsi que des exigences relatives à la mise en culture. Les projets sont généralement menés à bien dans un délai de 23 à 30 semaines.

Workflow for GeneArt® TALs or GeneArt® CRISPR stable cell lines

Processus de création de lignées cellulaires stables selon des technologies GeneArt® TAL ou GeneArt® CRISPR

Foire aux questions

Foire aux questions

Q. Comment se positionne le système CRISPR/Cas9 doté de produits TALEN en termes de spécificité de la cible ?
R. Il est de croyance générale que les TALEN ont un clivage spécifique de la cible supérieur à celui des CRISPR. Une conception soigneuse de la cible CRISPR permet généralement d’obtenir moins d’effets hors cible. L’efficacité du clivage via les méthodes CRISPR ou TALEN pour le locus ciblé peut être mesurée à l’aide du kit de détection de clivage génomique GeneArt®.

Q. Pourquoi utiliser CRISPR en tant qu’outil d’analyse avant de passer aux TAL ?
R. L’efficacité de clivage d’un locus donné dépendant de l’accessibilité du locus, de la séquence et de l’état de la chromatine, il est conseillé de tester plusieurs loci / régions différent(e)s pour un même gène. Dans le cas d’une modification de génome selon la méthode CRISPR/Cas9, l’utilisateur ne doit changer que l’oligo cible 19-20 bp pour chaque cible. Une fois les cibles analysées et la séquence / le locus offrant le clivage le plus efficace identifié(e) avec le système GeneArt® CRISPR facile et rapide à utiliser, les mutations biologiques significatives peuvent être créées de façon précise avec des GeneArt® TAL de haute spécificité.

Q. Quels avantages / désavantages présente OFP par rapport à CD4 au niveau des vecteurs de nucléase GeneArt® CRISPR ?
R. Un tri FACS avec OFP (protéine fluorescente orange) peut être effectué ; pour le CD4, FACS ou un enrichissement à partir de microbilles peut être utilisé. Vous trouverez plus d’informations dans le manuel de l’utilisateur.

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