cell proliferation flow cytometry  

細胞増殖解析は、細胞の成長および分化の研究にとって極めて重要であり、薬物開発において、化合物の毒性および腫瘍細胞の増殖阻害を評価するためにしばしば使用されます。増殖の測定は一般的には、DNA含量の平均値または細胞代謝パラメーターに基づいて行われます。アッセイでは、全細胞数や生細胞数のレポート、または単一細胞におけるDNA合成の測定を行うことができます。

Molecular Probes®細胞増殖アッセイは、個別または一緒に用いて、DNA合成の評価、分裂期のモニター、または細胞数倍加の追跡を行うことにより、細胞の健康状態や細胞分をモニターすることができます。

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DNA合成測定のアッセイ

DNA synthesis measurement assays新生DNA合成を測定することにより、単一細胞中または細胞集団における細胞増殖の正確なアッセイ法が実現します。DNA合成ベースの細胞増殖アッセイは、修飾ヌクレオシドの取り込みを基に、新生DNA合成を測定します。Click-iT® Plus EdU細胞増殖アッセイは、クリックケミストリーの検出力と修飾ヌクレオシドEdUを利用することにより、新たに合成されたDNAを検出・定量化するための、BrdU染色よりも優れた別法を提供します。

Click-iT® Plus EdUアッセイで細胞増殖を測定することで、細胞増殖測定と、GFPのような発現タンパク質、R-PEのようなタンパク質標識、および広範囲の有機蛍光物質とを容易にマルチプレックス化できます。

  • 精度——変動（低いCV）がわずかでBrdUアッセイよりも優れています
  • 簡便さ——簡素化された5ステップのプロトコール
  • 共存性——GFP、mCherry、APC、PerCP、PEおよびその他蛍光物質によるマルチプレックスが容易

DNA合成検出アッセイの選択ガイド

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細胞増殖の色素希釈アッセイ

Dye dilution assays for cell proliferation細胞増殖の色素希釈アッセイは、細胞膜透過性蛍光分子に基づいています。色素は、細胞内に入ると、タンパク質のアミン基に共有結合的に結合するため、長期にわたり色素が細胞内で保持されます。

その後の細胞分裂を通じ、各娘細胞は親細胞の約半分の蛍光を受け継ぎます。標識を適用した後、細胞集団の蛍光強度をフローサイトメトリーで解析すれば、細胞または細胞集団の増殖に伴う世代数を測定することができます。

CellTrace™蛍光試薬は、形態または生理に影響を及ぼすことなく、in vivoまたはin vitroでの世代の追跡に使用することができます。

  • 長期のシグナル安定性——染色後の数日間、細胞内で十分に保持
  • 非細胞毒性——細胞の増殖能や生物学へ影響は確認されていません。

色素希釈アッセイの選択ガイド

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細胞増殖製品の選択ガイド

  Click-iT® Plus EdU Pacific Blue™ Flow Cytometry Kit Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 488 Flow Cytometry Kit Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 Flow Cytometry Kit
アッセイの基礎 従来のBrdUアッセイの代替として、修飾型チミジン類似体EdUは、増殖している細胞中で新たに合成されるDNAに取り込まれます。そのEdUは、明るい、光安定性のAlexa Fluor®色素により、高速かつ非常に特異的なクリック反応で細胞を標識します。
リードアウト Eduのインキュベーション中、蛍光シグナルはDNAが合成される細胞の核の中に蓄積します。
蛍光 標識 Pacific Blue®ピコリルアジド Alexa Fluor®488ピコリルアジド Alexa Fluor® 647 picolyl azide
標準 フィルター DAPI FITC Cy®5
励起/蛍光 (nm) 410/455 495/519 650/668
マルチプレックス利用 （BrdUプロトコールとは異なり）細胞のエピトープを破壊せず、抗体標識、蛍光タンパク質および一般的な細胞染色法に適しているマイルドなクリックケミストリープロトコール。
サンプルタイプ 生細胞に対して最適化された、固定後のクリック検出ステップ
フォーマット 50アッセイ 50アッセイ 100アッセイ 50アッセイ 100アッセイ
カタログ 番号 C10636 C10632 C10633 C10634 C10635
文献
  CellTrace™ Violet Cell Proliferation Kit, for Flow cytometry CellTrace™ CFSE Cell Proliferation Kit, for Flow Cytometry CellTrace™ Far Red Cell Proliferation Kit
アッセイの基礎 細胞を蛍光試薬で永久的に標識して、形態や生理に影響を及ぼすことなく、in vivoまたはin vitroでの世代または分裂を追跡してください。
リードアウト 蛍光標識を適用した後、細胞集団の蛍光強度により、細胞の増殖に伴う世代数を測定することができます。
蛍光 標識
CellTrace™ Violet
CFSE
CellTrace™ Far Red
標準フィルター
DAPI
FITC
APC
励起/蛍光 (nm)
405/450
495/519
630/661
マルチプレックス
フォーマット
1キット/180テスト
1キット
1キット/180テスト
カタログ 番号
C34557
C34554
C34564
文献


細胞増殖のポスター

  ポスター 発表 年
Improved Click Chemistry Demonstrating EdU Cell Proliferation with GFP-expressing Cells and R-PE-based Immunophenotyping CYTO 2013
Rapid, in vitro T lymphocyte cell tracing by acoustic focusing cytometry CYTO 2012
The next step in the analysis of lymphocyte proliferation AAI 2011
Proliferative and phenotypic characterization of human mesenchymal stem cells by flow cytometry and imaging CYTO 2010
Functional Characterization of a Novel Fluorescent Dye for Proliferation Analysis CYTO 2010
Dual Pulse Labeling of S-Phase Population Using Click Chemistry to Measure Changes In Cell Proliferation ASCB 2009
Dual Pulse Labeling Using a New Thymidine analog 5-Ethynyl-2’-Deoxyuridine (Edu) to Detect alterations In S-Phase Progression by Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry ASCB 2009
Proliferative and Phenotypic Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells by Flow Cytometry ASCB, AAI 2009
Effects of The Thymidine analogues Edu and Brdu On Cell Viability and Cycle Progression ISAC 2008
Evaluation of Click Chemistry Based Alternative to BrdU Antibody Labeling in Tissue and Cultured Cells Using Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry ASCB 2007

リソース

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研究ツール

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.