組換えタンパク質の発現は、生命科学研究の様々な領域で ― 細胞タンパク質の解析から、創薬のための高収率タンパク質発現に至るまで、使用することができます。タンパク質発現および精製のアウトソーシングに関心のある方に、当社のタンパク質発現サービスは、一過性にトランスフェクトした哺乳類細胞または昆虫細胞から正しく折りたたまれた天然タンパク質を迅速かつ信頼に足る方法を提供いたします。全ワークフローにおいて最適化された条件を用いて、高収量の精製タンパク質を定期的に効率良く得ることができます。
プロジェクトを始めるための基本要件:
最適な遺伝子発現とデザイン柔軟性を得るため、全てのタンパク質発現プロジェクトの開始に、発現予定生物種にコドン最適化された遺伝子配列と発現ベクターを用いることを推奨します。
詳細情報:
すぐにトランスフェクションできるプラスミドを提供するため、当社の経験豊富な研究者は、検証済みのプロトコル、品質管理システムおよび試薬を用いて、最適化された精製プラスミドDNA（pDNA）を調製します。
詳細情報:
最適化された発現プラスミドを、高収率の組換えタンパク質発現用に適応させた当社の高度な哺乳類発現系と組み合わせることにより、これまでにない結果が得られます。
最適化された発現システムとトランスフェクション条件についての詳細情報 :
通常は最先端の精製プロトコルを使用していますが、お送りいただいたカスタム済みプロトコルも使用可能です。
サービスの特徴:
標準的なプロセスとして、いくつかの基本的な品質管理（QC）ステップが実施され、すべてのタンパク質発現および精製プロジェクトの詳細がドキュメント化されます。これには、SDS-PAGEおよびウェスタンブロッティングによるサンプル解析が含まれます。お客様の特定のプロジェクト要件に基づいて、エンドトキシンテストやHPLCによる分析SECを含む、追加の品質確認を提供いたします。必要に応じて全ての文書はカスタマイズ可能です。全てのQC検査に合格後、精製タンパク質が発送されます。
納品物:
Protein Production Request Formをダウンロードして記入し、受託サービス、jpcustom@lifetech.com にE-mailでお送り下さい。金額と納期のお見積りをお知らせいたします。（価格はプロジェクトの詳細により異なり、問い合わせ後にお知らせいたします。）
全て自社生産: オリゴ合成からタンパク質精製までの各ステップは機密性が保たれます。また外部業者に漏洩する心配がありません。
短い納期: 遺伝子からタンパク質まで、30営業日から可能
信頼性の高い高度な発現システム: FreeStyle™ 293、FreeStyle™ CHO、 Expi293™、Bac-to-Bac™ 細胞株。全ての試薬が当社内で準備可能
優れた遺伝子発現の最適化: 先進のGeneOptimizer™ソフトウェア
スケール範囲: 30mL～25Lの研究スケール
カスタムサービス: すぐに使用できるカスタマー精製プロトコル、拡張機能
専任の経験豊富なプロジェクト管理チーム: 全てのプロジェクトフェーズにおいて密接なコミュニケーション、大規模プロジェクトの経験:
アクティブ 大手製薬企業とのMSA
安全Eビジネスソリューション: 独自のポータル
| サービス | 詳細 | 納品物 |
|---|---|---|
| 遺伝子合成からご希望の培養スケールのタンパク質発現まで | 一過性にトランスフェクトしたHEK293、CHO、または昆虫細胞のご希望の培養スケールからのタンパク質発現および精製 |
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| タンパク質発現量比較や至適培養時間の検討 | 一過性にトランスフェクトしたHEK293、CHO、または昆虫細胞での発現量比較・至適培養条件の検討 |
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プロジェクトの設定とお見積もりは受託サービス、jpcustom@lifetech.comにお問い合わせください。
| サービスプロジェクトのフェーズまたは特徴 | 標準仕様 |
|---|---|
| 哺乳類発現系 |
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| 昆虫発現系 |
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| 発現スケール |
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| 精製方法 |
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| アフィニティタグ |
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| 追加オプション |
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プロジェクトの設定とお見積もりは受託サービス、jpcustom@lifetech.comにお問い合わせください。
| 品質確認の仕様 | ドキュメンテーション |
|---|---|
| SDS-PAGE、CBB染色によるタンパク質の可視化 | 標準品質確認に含む |
| タンパク質濃度の吸光度測定 | 標準品質確認に含む |
| タグ特異的抗体を用いたウェスタンブロット | 標準品質確認に含む |
| キャピラリーゲル電気泳動、UV吸光度および/または蛍光による検出 | ご要望に応じて |
| 分析用SEC（HPLC） | ご要望に応じて |
| エンドトキシン測定のためのLALアッセイ | ご要望に応じて |
このケーススタディでは、最適化された配列に由来する2つの抗体の発現レベルについて、その野生型と比較しました。2つの抗体遺伝子のORFをGeneOptimizerアルゴリズムを用いてヒトのコドン使用頻度に合わせて最適化しました。遺伝子合成、Invitrogen™ pcDNA™ 3.3 ベクターへのサブクローニング、およびプラスミド調製を自社で行いました。得られた4つのプラスミド（2つの抗体について、それぞれ1つの野生型と1つの最適化配列）を 30mLスケールのInvitrogen™ FreeStyle™ 293細胞で2回発現させました。発現レベルは、ProtA BLItz®システム（ForteBio、PALL Corp.）を用いて測定しました。
野生型レベルに標準化後の発現解析は、配列最適化抗体において大幅な増加を示しました（図1）。これは高レベルの精製タンパク質が、低コストのプロジェクトで迅速かつ効率的に得られることを意味します。
図 1. 野生型と配列最適化抗体における発現の比較。 配列最適化抗体の平均タンパク質発現を、野生型配列の平均発現と比較しました。
利用可能な最適化済み発現プラスミドおよび/または発現プロトコルをお持ちの場合、これらを用いて当社の施設でタンパク質を発現することも可能です。詳細はjpcustom@lifetech.com にお問い合わせ下さい。
研究用途にのみお使いください。 診断用には対応していません。
