架橋は、化学的共有結合によって、2つ以上の分子を連結する方法です。架橋試薬は、タンパク質または他の分子のもつ第一級アミンやスルフヒドリルなど、特定の官能基に対して反応性がある末端を有します。タンパク質およびペプチドは、利用可能ないくつかの化学基を有しており、このような化学基が結合の対象になります。

架橋剤は、近隣タンパク質関係およびリガンド- 受容体相互作用を確認するために用いられます。ホモ官能性かつアミン反応性のNHSエステルまたはイミド酸エステルとヘテロ二官能性かつアミン反応性の光活性化フェニルアジドは、それらのアプリケーション用に最も一般的に用いられている架橋剤です。

また、架橋剤は、一般的に核酸、薬物、および固体表面の修飾にも使用されます。同じ化学的性質は、アミノ酸と核酸の表面修飾や標識に適用されます。化学のこのツールは、バイオコンジュゲーションとしても知られており、架橋、固定化、表面修飾、および生体分子の標識化を含みます。

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注目のタンパク質の架橋のカテゴリー

第一級アミンの選択的コンジュゲーションのためのNHSエステルおよびイミドエステル反応性基に基づいたホモ二官能性アミン特異的なタンパク質の架橋試薬であり、ショート、ロング、切断可能、不可逆的、透過性膜、および多様な細胞表面で利用可能です。

マレイミドとヒドジド反応性基に基づく架橋試薬は、共有結合架橋の結合と形成に関わります。

タンパク質とペプチドチオール(還元システイン)の選択的共有結合のためのマレイミドまたはピリジルジチオール反応性基に基づくホモ二官能性スルフヒドリル特異的架橋試薬は、安定なチオエーテル結合を形成します。

Aryl azide、diazirine、および他の光反応性(光活性)化学的ヘテロ二官能性架橋試薬は、二段階の活性化を介して、受容体-リガンド相互作用複合体に関与するタンパク質、核酸、および他の分子構造を結合させます。

タンパク質および他の分子の第一級アミン(リジン)基とスルフヒドリル(システイン)基との間の結合に関わるヘテロ二官能性タンパク質架橋試薬です。スペ-サーアームの長さや種類を変えて利用いただけます。

化学選択的ライゲーションは、結合試薬の相互に特異的な対の使用のことをいいます。それらは、ほとんどの場合、in vivo代謝標識に用いられます。

細胞表面または細胞内のタンパク質をターゲットにする際に、異なるダウンストリーム分析方法に対応するために、in vivo 架橋試薬には様々な種類の試薬があります。

第一級アミン(リジン、N末端)にカルボキシル基(グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、C末端)を結合させるためのカルボジイミド架橋試薬、さらには、DCCおよびEDC(EDAC)と、アミン結合のためのカルボキシレートの安定な活性化のためのN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)があります。