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吸着イムノアッセイプレート
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受動的結合用表面
受動的表面は多様な生体分子に結合できるため、幅広い用途があります。
受動的結合は主に、複数の接触点を確立できる抗体などの中～大分子の固定化に適しています。 分子相互作用部位の正確な適合は、生体分子の構造とポリマー表面構造の特異的な適合に依存します。 さまざまな生体分子を受動的表面上に固定化し、優れた残存活性を得ることができます。
Thermo Scientificの受動表面シリーズは、親水性の度合いが異なり、4つのサブグループに分類されます： 疎水性、わずかに親水性、親水性、および非常に親水性。 疎水性表面は主に疎水性結合によって機能します。 酸素を含む官能基をを取り込むことで表面の親水性が高まると、静電相互作用が結合においてより大きな役割を果たすため、どの種類の生体分子が表面に強く結合するかに影響を与えます。
上の概略図は、利用可能な修飾表面に結合できる生体高分子の種類を示したものです。 たとえば、脂質を結合する場合は、疎水性表面のPolySorpが最適です。 固定化する生体分子の物理化学的特性に基づいて、堅牢な結合に適した表面を選択できます。 図に示されているように、MaxiSorpはもっとも広範囲の分子を結合できるため、もっとも幅広い用途に使用できます。
| 生体分子 | 分子分類 | Nuncプレートの推奨表面 | 考慮すべきその他のプレート表面 | 主な表面特長 |
|---|---|---|---|---|
| 脂質 | 疎水性 | PolySorp | Immulon 1B Microlite 1+ Microfluor 1 ユニバーサルバインド | これらの表面は通常、脂質に富む生体分子などの疎水性分子の吸着に使用されます。 |
| タンパク質 | わずかに親水性 | MediSorp | Immulon 2HB Microlite 2+ Microfluor 2 | これらのプレートのわずかな親水性により、糖タンパク質、血清を含むサンプル、リポ多糖などの両性分子を含む、さまざまな生体分子を結合する能力が向上します。 これらのプレートにより、血清含有サンプルの非特異的吸着が低減されるため、信号対雑音（S/N）比が向上し、結果的に感度レベルが向上します。 |
抗体 （糖タンパク質） | 親水性 | MaxiSorp | Immulon 4HBX Enhanced Binding | このプレートは、大量のIgG（ポリクローナル）を結合するように最適化されており、抗体サンドイッチアッセイ（ELISAなど）に最適です。 さらに、親水性／疎水性特性を持つ他の多くのタンパク質や生体分子の結合が増加します。 |
| グリカン | 強親水性 | MultiSorp | ---- | 当社のポートフォリオの中でもっとも親水性が高いため、多くの親水性タンパク質がこれらのプレートに高い親和性で結合します。 ただし、結合はpHの影響を受けやすい傾向があります。 |
FAQ
よくある質問を以下にまとめました。 詳細な技術情報とよくある質問については、固相表面ガイド をご覧ください ›
以下のリストでは、Thermo Scientific Nunc製品とその特定のアプリケーションの特長を簡単に説明します。
- Immunoプレート、MaxiSorp表面—このプレートは固相イムノアッセイ用に設計されており、極性基および親水性分子に対して高い親和性を持つポリスチレン表面を有しています。 これらの96ウェルプレートには、平底（F）、丸底（U）、または（C）底のウェル設計があります。
- Immunoプレート、PolySorp表面—これらのプレートは、MaxiSorp表面と比較して極性分子の吸着が少なく、疎水基への親和性が高いポリスチレン表面を有しています。 これらの96ウェルプレートには、平底（F）、丸底（U）、または（C）底のウェル設計があります。
- Immunoモジュール—これらのモジュールは固相イムノアッセイ用に設計されています。 モジュールは、（F）、（U）、（C）底ウェルを備えた8、12、または16ウェルフォーマットと、（C）底ウェル設計を備えた8ウェルBreakApartフォーマットで提供されます。 これらのさまざまなフォーマットにより、アッセイデザインに適したスタイルを選択できます。 ブレイクアパートモジュールとロックウェルモジュールはラジオイムノアッセイに使用できます。
以下のリストは、Immunoプレートおよびモジュールに利用可能なウェルの形状を示しています。
- 平底（F）—光の最大限の透過を可能にします。 これらのプレートは、単色のリーダーで読み取ることができます。
- 丸底（U）—この形状により、洗浄とコーティングが最適化されます。 これらのプレートは、2波長リーダーを使用して読み取ることができます。
- 「C」底（C）—このウェルのデザインは、平底と丸底の両方を組み合わせたものです。 基本的には、底が平らで、底の縁が湾曲したウェルです。 読み取りと洗浄を最適化することにより、単波長リーダーでも読み取ることができます。
- スターウェル—これらのウェルは、底部に8枚のフィンが配置された「C」形状をしています。 この特長により表面積が増加し、より多くの分子を固定できるため、インキュベーション時間が短縮されます。
MaxiSorpおよびPolySorp表面は免疫学アッセイ用に開発されました。 MaxiSorp表面は、極性基または親水基を持つ分子に対して高い親和性を持つ、修飾された高電荷ポリスチレン表面です。 この表面は、適切な方向での球状抗体など、タンパク質に対する高い結合能を有しています。 そのため、2抗体サンドイッチ法において非常に高い感度を提供します。 PolySorp表面は、MaxiSorp表面よりも疎水性が高くなっています。 疎水性の高い分子に対して高い親和性を有しています。 この表面は、ウイルス抗原などの非タンパク質抗原に特に適しています。
分子は受動的吸着によりPolySorpおよびMaxiSorpの表面に結合します。 IgGを参照分子として使用し、それが球状分子であることを考慮すると、理論計算では、単層でのMaxiSorp表面の最大結合は650 ng/cm2であることが示されています。 PolySorp表面の場合、結合能は220 ng/cm2です。 原理と計算に関する詳細な説明は、Thermo Scientific Nunc Bulletin No.6a「Principles in Adsorption to Polystyrene」およびBulletin No.6b「Stability of Thermo Scientific Nunc Immuno MaxiSorp Surfaces 」に掲載されています。
リソース
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.