Exosome-Streptavidin Isolation/Detection Reagent

Exosome-Streptavidin Isolierungs-/Detektionsreagenz ermöglicht in Kombination mit dem von Ihnen gewählten biotinylierten primären Antikörper die Aufreinigung von Exosomen (auch extrazelluläre Vesikel und multivesikuläre Körper genannt) aus vorangereicherten Proben. Diese Exosomen können dann mit Techniken wie Durchflusszytometrie, Elektronenmikroskopie oder Western Blotting nachgewiesen werden. Die Exosomen müssen vor der Isolierung angereichert werden. Dies kann durch Ultrazentrifugation oder durch die Verwendung des schnellen und effizienten Isolierungsreagenz für Gesamtexosomen (aus Zellkulturmedien) erfolgen.

• Maximale Flexibilität bei der Auswahl des biotinylierten Antikörpers
• „Sehen“ der Probe während der Handhabung
• Einfach zu skalierendes Protokoll
• Nachweis von Exosomen über Durchflusszytometrie in weniger als 1 Stunde

Die Isolierung und Detektion von Exosomen war ein langwieriger, unspezifischer und schwieriger Prozess. Exosom – Streptavidin zur Isolierung bzw. zum Nachweis verwendet die bekannte Dynabeads™ Magnettrennungstechnologie. In Kombination mit dem biotinylierten Antikörper Ihrer Wahl können Sie mit dieser Technologie vorangereicherte Exosomen aus Zellkulturmedien leicht reinigen und anschließend die gereinigten Exosomen mithilfe von Verfahren wie Durchflusszytometrie, Elektronenmikroskopie oder Western Blotting nachweisen.

Nachweis per Durchflusszytometrie
Da freie Exosomen allein zu klein sind, um durch Durchflusszytometrie nachgewiesen zu werden, ist einer der Hauptvorteile der Anwendung der magnetischen Trenntechnologie, dass die gereinigten, beadgebundenen Exosome einfach durch Durchflusszytometrie visualisiert werden können. Die monodispergierten und relativ großen Dynabeads™ (4,5 µm im Durchmesser) sorgen für eindeutige und definierte FFC/SSC-Werte, in der Regel in unter 1 Stunde.

„Sehen“ der Probe
Die superparamagnetischen Dynabeads™ sind nicht nur für ihre Empfindlichkeit, Reproduzierbarkeit und Stabilität bekannt, die magnetische Handhabung ermöglicht auch, dass Sie Ihre Probe aufgrund der hellbraunen Farbe der Beads gut „sehen“. Wenn das Probenröhrchen auf den Magneten gesetzt wird, werden beadgebundene Exosomen seitlich an die Röhrchenwand gezogen. Dies ermöglicht eine einfache Trennung und Reinigung. Darüber hinaus kann das Proben- und Bead-Volumen je nach Probengröße oder nachgelagerten Anwendungen einfach nach oben oder unten skaliert werden.

Gutes Mischen ist entscheidend
Für eine erfolgreiche Exosomisolierung ist es wichtig, einen Mischer zu verwenden, der sich neigt und dreht, um sicherzustellen, dass sich die Beads nicht im Röhrchen absetzen. Vermeiden Sie eine Überkopfdrehung bei kleinen Probenvolumina (z. B. 100 µl). Weitere Richtlinien finden Sie im Benutzerhandbuch weiter unten.