ElectroMAX™ Stbl4™ Competent Cells

Description

Les cellules compétentes ElectroMAX™ Stbl4™ sont spécifiquement conçues pour le clonage d’inserts instables. En tant que cellules électrocompétentes, elles possèdent l’une des efficacités de transformation les plus élevées disponibles (> 5×10⁹ cfu/µg), ce qui en fait des cellules idéales pour la génération de bibliothèques d’ADNc et génomiques, ainsi que pour le clonage d’inserts instables. Ces cellules E. coli électrocompétentes :

• Sont idéales pour cloner de l’ADN instable – elles stabilisent les séquences répétées directes et les séquences rétrovirales
• Permettent un clonage efficace d’ADN génomique méthylé
• Supportent le screening bleu/blanc
• Sont conçues pour fournir des préparations plasmidiques à haut rendement pour des applications en aval
• Offrent des efficacités de transformation > 5×10⁹ cfu/µg

Propagation d’ADN instable et de grande taille grâce à des cellules à efficacité de transformation élevée
De nombreuses souches cellulaires compétentes possèdent le génotype recA1, qui réduit la recombinaison. Toutefois, dans certains cas, l’ADN que vous tentez de cloner est encore instable dans ces cellules, peut-être en raison de la présence de séquences répétées inverses ou directes, ou de zones riches en GC. Bien que de telles séquences soient relativement courantes dans les génomes eucaryotes, elles sont rares dans l’E. coli. Par conséquent, des réarrangements peuvent avoir lieu lorsque ces séquences sont introduites dans des souches d’E. coli standard.

Utilisation des cellules ElectroMAX™ Stbl4™
Les cellules E. coli électrocompétentes ElectroMAX™ Stbl4™ sont un dérivé de cellules Stbl2™ et sont idéales pour le clonage d’inserts instables tels que des séquences rétrovirales, des séquences répétées directes et des gènes répétés en tandem. De plus, les cellules ElectroMAX™ Stbl4™ sont utiles pour la génération de bibliothèques d’ADNc à l’aide de vecteurs dérivés de plasmides, et peuvent prendre et conserver de grands plasmides (par ex., des cosmides de 50 kb et des clones P1 de 100 à 200 kb). Les cellules Stbl4™ contiennent également un épisome F’, ce qui leur permet de servir d’hôte pour de l’ADN simple brin comme des vecteurs de clonage M13mp. Le marqueur lacZΔM15 offre une α-complémentation du gène β-galactosidase à partir de pUC ou de vecteurs similaires, et peut donc être utilisé pour le screening bleu/blanc de colonies sur des plaques de gélose contenant du Xgal ou du Bluo-gal et de l’IPTG. La mutation de mcrA et la délétion de mcrBC-hsdRMS-mrr permet le clonage de séquences génomiques méthylées. Finalement, la mutation de endA1 augmente fortement le rendement et la qualité des plasmides.

Génotype : mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 gal^-thi-1 supE44 λ^-relA1 Δ(lac-proAB)/F’ proAB⁺lacI^qZΔM15 Tn10 (Tet^R)

Spécifications

Competent Cell Type:	Electrocompetent
Species:	E. coli
Format:	Tube(s)
Transformation Efficiency:	> 5x10^9
Bacterial or Yeast Strain:	Stbl4™
Product Line:	ElectroMAX™, Stbl4™
Blue-White Screening:	Yes
Cloning Methylated DNA:	Yes
Cloning Unstable DNA:	Suitable for cloning unstable DNA
F' Episome (to make ssDNA):	Contains F' Episome
High Throughput Compatibility:	Not High Throughput-Compatible (Manual)
Improves Plasmid Quality:	Yes
Plasmid Type:	May be used for plasmids > 100 kb
Preparing Unmethylated DNA:	Not Suitable for preparing unmethylated DNA
Product Size:	5 x 100 µL
Propagating ccdB Vectors:	Not for ccdB vector propagation
Reduces Recombination:	Yes
T1 Phage - Resistant (tonA):	No
Shipping Condition:	Dry Ice

Contenu et stockage