Medio de expresión Freestyle™ 293
Medio de expresión Freestyle™ 293
Citas y referencias (6)
Gibco™

Medio de expresión Freestyle™ 293

El medio de expresión FreeStyle™ 293 es un medio libre de origen animal, definido químicamente y libre de proteínas queMás información
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoCantidad
123380181 L
123380266 x 1 L
Número de catálogo 12338018
Precio (USD)
275,40
Each
Añadir al carro de la compra
Cantidad:
1 L
Customize this product
Precio (USD)
275,40
Each
Añadir al carro de la compra
El medio de expresión FreeStyle™ 293 es un medio libre de origen animal, definido químicamente y libre de proteínas que se ha desarrollado específicamente para apoyar el crecimiento y la transfección de células 293-F en suspensión sin adaptación. El medio está completo y listo para usar, sin necesidad de usar suplementos. Características del medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293:

• Formato completo y listo para usar que contiene suplemento GlutaMAX™
• Capacidad para apoyar el crecimiento de la suspensión y la transfección de células 293-F
• Formulación libre de origen animal y de proteínas, y definida químicamente
• Fácil de usar con los sistemas de expresión FreeStyle™ 293
• Capacidad de ampliación en matraces para dispositivos giratorios y biorreactores

Formato completo y listo para usar que contiene suplemento GlutaMAX™
El medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 está listo para usar. No requiere la adición de suero, glutamina o surfactantes. El medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 contiene el suplemento GlutaMAX™ para minimizar la acumulación de amoníaco tóxico y mejorar el crecimiento y la viabilidad celular en un formato fácil de usar.

Capacidad para apoyar el crecimiento de la suspensión y la transfección de células 293-F
Las células Gibco™ 293-F, 293-H y FreeStyle™ 293-F en suspensión se pueden cultivar directamente en el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 sin adaptación. Las células adaptadas a otros medios sin suero disponibles comercialmente se pueden subcultivar directamente en el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293, generalmente sin ninguna otra adaptación. Las células normalmente requieren adaptación de formulaciones que contienen suero. Las células cultivadas en el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 se pueden transfectar utilizando reactivos de transfección basados en lípidos, como reactivo 293fectin™ y reactivo Freestyle™ MAX.

Formulación libre de origen animal y de proteínas, y definida químicamente
El medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 no contiene origen animal ni proteínas y se ha definido químicamente, lo que permite una purificación más sencilla de la proteína de interés. Los medios químicamente definidos Gibco™ no contienen proteínas, hidrolisatos ni componentes de composición desconocida.

Uso sencillo como parte del sistema de expresión FreeStyle™ 293 y el sistema de expresión FreeStyle™ MAX para la producción de proteínas
El sistema de expresión FreeStyle™ 293 es un completo sistema de cultivo celular en suspensión para la generación de grandes cantidades de proteínas recombinantes de mamíferos (véase la figura). El sistema de expresión FreeStyle™ 293 combina el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 con el reactivo 293fectin™, una formulación de lípidos-catiónicos diseñada para transfectar células FreeStyle™ 293-F en suspensión con alta eficacia. El sistema de expresión FreeStyle™ MAX es una tecnología revolucionaria para una producción de proteínas de mamíferos rápida y de alto rendimiento. El sistema de expresión FreeStyle™ combina los medios Gibco™ FreeStyle™, el reactivo FreeStyle™ MAX y células FreeStyle™ CHO-S o FreeStyle™ 293-F.

Capacidad de ampliación en matraces para dispositivos giratorios y biorreactores
La producción de proteínas con el medio de expresión Gibco™ FreeStyle™ 293 se puede ampliar en matraces para dispositivos giratorios o biorreactores. Se deben optimizar para cada sistema la velocidad apropiada del dispositivo giratorio o del propulsor y la densidad de siembra. En función del diseño y la velocidad del rotor, puede que sea necesario suplementar el medio de expresión Gibco™ Freestyle™ 293 con Pluronic™ F-68 adicional para evitar el esfuerzo de cizallamiento en el cultivo.

Embalaje de bolsa universal
Lasbolsas universales Gibco™ ofrecen un embalaje flexible que le permite integrar un contenedor desechable de un solo uso para medios de gran volumen con una amplia variedad de instrumentos de cultivo celular automatizados, sistemas de biorreactores desechables y procesos de conexión estériles, lo que minimiza la necesidad de una costosa personalización.

Uso de productos
Los clientes que utilizan el medio de expresión Gibco™ Freestyle™ 293 en un proceso de fabricación y que tienen una presentación con la FDA, pueden solicitarnos una carta de autorización en la que haga referencia a nuestro archivo principal sobre fármacos (DMF) de tipo II.

Sistema de fabricación y calidad conforme a las buenas prácticas de fabricación actuales
El medio de expresión Gibco™ Freestyle™ 293 se fabrica en una instalación conforme con las buenas prácticas de fabricación actuales ubicadas en Grand Island, Nueva York (EE. UU.). Las instalaciones se han registrado en la Agencia estadounidense de alimentos y medicamentos (FDA) como fabricante de dispositivos médicos y tienen la certificación según la norma ISO 13485.
Para su uso en investigación o procesos de fabricación posteriores. No apto para uso diagnóstico ni para la administración directa en seres humanos ni en animales.
Especificaciones
Línea de célulasFreeStyle™ 293-F Cells
Línea de productosFreestyle
Tipo de productoExpression Medium
Cantidad1 L
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
ClasificaciónAnimal Origin-free, Chemically-defined, Protein-free, Serum-free
Culture TypeSuspension Cell Culture
FormularioLíquido
Serum LevelSerum-free
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Condiciones de almacenamiento: 2-8 °C. Proteger de la luz
Condiciones de envío: Ambiente
Vida útil: 12 meses a partir de la fecha de fabricación

Preguntas frecuentes

Can I load the FreeStyle 293 Expression Medium or FreeStyle CHO Expression Medium directly onto a nickel column for His-tagged protein purification?

With FreeStyle 293 Expression Medium, we would recommend harvesting the cells a little earlier to reduce any nonspecific binding by host cell proteins and then filtering the culture supernatant through a 0.2 or 0.1 µM membrane before loading onto the column. On the other hand, FreeStyle CHO Expression Medium contains EDTA that will strip the nickel column. The medium can be subjected to dialysis or buffer exchange prior to loading on the column, or the EDTA can be chelated by adding 1-3 mg/L NiSO4 or NiCl to the supernatant. Iron or cobalt salts can also be used.

Can FreeStyle 293-F cells grown in FreeStyle 293 expression medium be transfected with ExpiFectamine293 Reagent along with enhancers? Is so, will the transfection efficiency be higher than that with FreeStyle Max Reagent?

You should be able to use the ExpiFectamine293 Reagent for transfection of Freestyle 293-F cells grown in FreeStyle 293 Expression Medium; however, the enhancers will provide only a little boost in expression as they are designed to work with higher density cultures that FreeStyle 293 Expression Medium cannot support.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Transfection Support Center.

Are there any recommendations for preventing or dispersing cell clumps in a suspension culture?

When cells meant to be grown in suspension are grown in static culture, they may form clumps. These clumps will severely limit transfection efficiency and protein expression. It is suggested that FreeStyle 293 cells in FreeStyle media and CHO-S cells in CD-CHO or CHO-SFM are grown in agitated suspension to reduce the appearance of clumps. However, if clumps do form, you can try the following protocol to select for cells that don't form clumps:

- Transfer cells into an appropriate size centrifuge tube that will hold the entire cell suspension.
- Allow cells to sit undisturbed for about 5 minutes. The time can vary depending on the specific cell line. Larger cell clumps will settle to the bottom of the tube.
- Collect cells from the upper portion of the tube to passage into a new flask.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Culture Support Center.

Is it necessary to grow FreeStyle 293-F cells in 8% CO2 when using the FreeStyle 293 Expression Medium? If 8% CO2 cannot be arranged, can I supplement the media with an additional reagent?

Our recommendation of 8% CO2 for the optimal growth of Freestyle 293 cells in Freestyle 293 Expression Medium is based on the bicarbonate content in the media and growth conditions of the cells observed by R&D. That said, you may use lower concentrations of CO2 if necessary (5% is common) to grow these cells. You may observe slightly slower growth kinetics or lower cell concentrations, but functionally the entire system will still work.

Does FreeStyle 293 Expression Medium contain any components that would interfere with concentrating secreted proteins from HEK 293 cells via ammonium sulfate precipitation?

Yes, the FreeStyle 293 Expression Medium contains Pluronic F-68 and lipids that would interfere with ammonium sulfate precipitation. Dialysis or tangential flow filtration can be used to remove lipids and Pluronic F-68 from the medium. Then you can concentrate the medium with ammonium sulfate.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Culture Support Center.

View all Medio de expresión Freestyle™ 293 FAQs

Citations & References (6)

Citations & References
Abstract
Molecular dissection of the alpha-dystroglycan- and integrin-binding sites within the globular domain of human laminin-10.
Authors:Ido H, Harada K, Futaki S, Hayashi Y, Nishiuchi R, Natsuka Y, Li S, Wada Y, Combs AC, Ervasti JM, Sekiguchi K,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:14701821
'The adhesive interactions of cells with laminins are mediated by integrins and non-integrin-type receptors such as alpha-dystroglycan and syndecans. Laminins bind to these receptors at the C-terminal globular domain of their alpha chains, but the regions recognized by these receptors have not been mapped precisely. In this study, we sought ... More
Transient transfection factors for high-level recombinant protein production in suspension cultured mammalian cells.
Authors:Liu C, Dalby B, Chen W, Kilzer JM, Chiou HC,
Journal:Mol Biotechnol
PubMed ID:18327552
'The efficient transfection of cloned genes into mammalian cells system plays a critical role in the production of large quantities of recombinant proteins (r-proteins). In order to establish a simple and scaleable transient protein production system, we have used a cationic lipid-based transfection reagent-FreeStyle MAX to study transient transfection in ... More
Biological activity of follistatin isoforms and follistatin-like-3 is dependent on differential cell surface binding and specificity for activin, myostatin, and bone morphogenetic proteins.
Authors:Sidis Y, Mukherjee A, Keutmann H, Delbaere A, Sadatsuki M, Schneyer A,
Journal:Endocrinology
PubMed ID:16627583
Follistatin (FST) and FST-like-3 (FSTL3) are activin-binding and neutralization proteins that also bind myostatin. Three FST isoforms have been described that differ in tissue distribution and cell-surface binding activity, suggesting that the FST isoforms and FSTL3 may have some nonoverlapping biological actions. We produced recombinant FST isoforms and FSTL3 and ... More
Mutation of key residues of RPE65 abolishes its enzymatic role as isomerohydrolase in the visual cycle.
Authors:Redmond TM, Poliakov E, Yu S, Tsai JY, Lu Z, Gentleman S,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16150724
RPE65 is essential for isomerization of vitamin A to the visual chromophore. Mutations in RPE65 cause early-onset blindness, and Rpe65-deficient mice lack 11-cis-retinal but overaccumulate alltrans-retinyl esters in the retinal pigment epithelium (RPE). RPE65 is proposed to be a substrate chaperone but may have an enzymatic role because it is ... More
T cell immunoglobulin mucin-3 crystal structure reveals a galectin-9-independent ligand-binding surface.
Authors:Cao E, Zang X, Ramagopal UA, Mukhopadhaya A, Fedorov A, Fedorov E, Zencheck WD, Lary JW, Cole JL, Deng H, Xiao H, Dilorenzo TP, Allison JP, Nathenson SG, Almo SC,
Journal:Immunity
PubMed ID:17363302
The T cell immunoglobulin mucin (Tim) family of receptors regulates effector CD4(+) T cell functions and is implicated in autoimmune and allergic diseases. Tim-3 induces immunological tolerance, and engagement of the Tim-3 immunoglobulin variable (IgV) domain by galectin-9 is important for appropriate termination of T helper 1-immune responses. The 2 ... More
View all Medio de expresión Freestyle™ 293 citations