Platinum™ SuperFi II DNA Polymerase
Platinum™ SuperFi II DNA Polymerase
Invitrogen™

Platinum™ SuperFi II DNA Polymerase

Invitrogen Platinum SuperFi II DNA-Polymerase ist eine Proofreading-DNA-Polymerase, die überlegene Genauigkeit mit einem innovativen Puffer kombiniert, um universelles Primer-Glühen fürWeitere Informationen
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KatalognummerAnzahl Reaktionen
12361010100 Reaktionen
12361050500 Reaktionen
123612505 x 500 Reaktionen
Katalognummer 12361010
Preis (EUR)
254,65
Exklusiv online
274,00
Ersparnis 19,35 (7%)
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Anzahl Reaktionen:
100 Reaktionen
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Invitrogen Platinum SuperFi II DNA-Polymerase ist eine Proofreading-DNA-Polymerase, die überlegene Genauigkeit mit einem innovativen Puffer kombiniert, um universelles Primer-Glühen für optimale Erfolgsraten in der PCR zu ermöglichen. Sie eignet sich ideal für Klonierung, Mutagenese und andere Anwendungen, die von höchster Sequenzgenauigkeit profitieren.

Merkmale der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase:
• Außergewöhnliche >300X Taq-Genauigkeit
• Universelles Primer-Glühen bei 60 °C
• Hervorragende Spezifität, Empfindlichkeit und Ausbeute
• Robuste Amplifikation von schwer zu amplifizierenden Zielen (z. B. solche mit suboptimaler Reinheit oder mit einem GC-Gehalt von ˃ 65 %, lange PCR-Anforderung)

Platinum SuperFi DNA-Polymerase ist ein speziell entwickeltes Enzym mit hoher Prozessivität und erhöhter Resistenz gegen PCR-Inhibitoren. Sie ermöglicht auch schnelle Protokolle und Amplifikation langer Zielsegmente (bis zu 20 kb). Die Platinum Heißstart-Technologie basiert auf firmeneigenen Antikörpern, die die Enzymaktivität bis zum ersten PCR-Denaturierungsschritt hemmen und unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau verhindern. Diese Technologie ermöglicht zudem ein Ansetzen der Reaktion bei Raumtemperatur und sorgt für eine höhere Empfindlichkeit und Ausbeute.

Aufgrund der einzigartigen Zusammensetzung des SuperFi II PCR-Puffers beträgt die Annealing-Temperatur für die meisten Primerpaare, die gemäß den allgemeinen Konstruktionsregeln hergestellt wurden, 60 °C. Isostabilisierende Moleküle im Puffer erhöhen die Duplexstabilität des Primer-Templates während des Glühschritts und tragen zu einer verbesserten Spezifität bei, ohne dass die Glühtemperatur für jedes Primer-Paar optimiert werden muss. Mit der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase können verschiedene PCR-Assays unter Verwendung desselben Protokolls mit universeller Primer-Annealing-Temperatur und dem Extensions-Schritt, der für das längste zu amplifizierende Fragment ausgewählt wurde, zusammen durchgeführt werden.

Anwendungen der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase:
• High-Fidelity PCR
• Klonierung und Subklonierung
• Vor Ort gesteuerte Mutagenese
• Amplifikation GC-reicher Templates
• Template-Generierung für Sequenzierung
• PCR mit hohem Durchsatz
• Amplifikation von Proben mit suboptimaler Reinheit
• Long PCR
• Schnell PCR

Für mehr Komfort bieten wir Platinum SuperFi II Master Mix mit Platinum SuperFi II DNA-Polymerase in einer gebrauchsfertigen Mischung zusammen mit SuperFi II PCR-Puffer und dNTPs an, wodurch die Anzahl der Pipettierschritte während der PCR-Reaktionseinrichtung reduziert wird. Platinum SuperFi II Green PCR Master Mix ist ebenfalls erhältlich, das zusätzlich ein Dichtereagenz und zwei Elektrophorese-Farbstoffe zum direkten Auftragen von PCR-Produkten auf ein Gel enthält und den PCR-Arbeitsablauf von der Einrichtung bis zur Endanalyse weiter optimiert.

Weitere Informationen zu Platinum SuperFi II DNA-Polymerase-Produkten ›
Specifications
Wiedergabetreue (vs. Taq)>300 X
Hot-StartIntegrierter Heißstart
Anzahl Reaktionen100 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymerasePlatinum SuperFi II DNA-Polymerase
Menge100 Reaktionen
ReaktionsformatEigenständig
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)20 kb oder weniger
Zur Verwendung mit (Anwendung)Heißstart-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 100 μl Platinum SuperFi II-DNA-Polymerase
• 1,25 ml SuperFi II-Puffer (5X)

Ausreichend für 100 50-μl-Reaktionen

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What is the longest amplicon I can get using Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Platinum SuperFi II DNA Polymerase enables amplification of long targets (up to 20 kb).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

I'm having a hard time amplifying/cloning low copy cDNAs via PCR. Do you have any suggestions for me?

You may want to consider using our Platinum SuperFi II DNA Polymerase (Cat. No. 12361010) and try optimizing your PCR conditions if needed. The Platinum SuperFi II DNA Polymerase demonstrates a superior detection sensitivity with as little as 0.4 ng of genomic DNA. It is also a good idea to include a positive control reaction in parallel to your test PCR to ensure there are no issues with your reagents during handling or use over time. Please note that control templates may be ordered through our GeneArt Gene Synthesis (de novo sequence with 100% guarantee delivered in a vector) or Strings (up to 3 Kb, blunt-ended dsDNA pools, cloned into ZeroBlunt TOPO vector, convenient for multiple controls) services.

What are your recommendations when working with long amplicons using Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Good lab practices are important for long fragment amplification. These include using high-quality templates (pure, fresh, and intact) and fresh primer solutions. Reducing primer concentration to 0.2 µM may also improve the results.

Can I use Platinum SuperFi DNA Polymerase cycling protocol and primer annealing temperature with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Yes, Platinum SuperFi II DNA Polymerase works at both universal 60 degrees C annealing temperature and at annealing temperatures calculated with a Tm calculator.

Can I perform TA cloning with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Platinum SuperFi II DNA Polymerase produces blunt-ended PCR products that can be cloned directly into blunt-ended cloning vectors. TA cloning is also possible if 3' dA-overhangs are added after PCR. We recommend purifying the PCR products of Platinum SuperFi DNA Polymerase before adding the overhangs. The procedure for adding 3' dA-overhangs (TA cloning) includes the following steps:
- Purify the PCR product (e.g., with a PCR purification kit or phenol extraction/DNA precipitation). Before adding the overhangs, PCR product must be purified, as the strong proofreading activity of any remaining Platinum SuperFi DNA Polymerase will degrade the added 3' dA-overhangs.
- Perform 3' dA addition with a Taq DNA polymerase.
Reaction components:
Purified PCR product
0.2 mM dATP
1x Taq Buffer
1 U Taq DNA Polymerase
Incubate the reaction for 20 min at 72 degrees C.
- Proceed to TA cloning. For optimal ligation efficiency, we recommend using fresh PCR products, since 3' dA-overhangs can be lost during storage

Zitierungen und Referenzen (14)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
A PCR amplicon-based SARS-CoV-2 replicon for antiviral evaluation.
Authors:Kotaki T, Xie X, Shi PY, Kameoka M
Journal:Sci Rep
PubMed ID:33500537
'The development of specific antiviral compounds to SARS-CoV-2 is an urgent task. One of the obstacles for the antiviral development is the requirement of biocontainment because infectious SARS-CoV-2 must be handled in a biosafety level-3 laboratory. Replicon, a non-infectious self-replicative viral RNA, could be a safe and effective tool for ... More
Engineering SARS-CoV-2 using a reverse genetic system.
Authors:Xie X, Lokugamage KG, Zhang X, Vu MN, Muruato AE, Menachery VD, Shi PY
Journal:Nat Protoc
PubMed ID:33514944
'Reverse genetic systems are a critical tool for studying viruses and identifying countermeasures. In response to the ongoing COVID-19 pandemic, we recently developed an infectious complementary DNA (cDNA) clone for severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). The reverse genetic system can be used to rapidly engineer viruses with desired ... More
The analysis of GSTA1 promoter genetic and functional diversity of human populations.
Authors:Mlakar V, Curtis PH, Armengol M, Ythier V, Dupanloup I, Hassine KB, Lesne L, Murr R, Mlakar SJ, Nava T, Ansari M
Journal:Sci Rep
PubMed ID:33658540
'GSTA1 encodes a member of a family of enzymes that function to add glutathione to target electrophilic compounds, including carcinogens, therapeutic drugs, environmental toxins, and products of oxidative stress. GSTA1 has several functional SNPs within its promoter region that are responsible for a change in its expression by altering promoter ... More
Epigallocatechin-3-gallate Alleviates Vanadium-Induced Reduction of Antioxidant Capacity via Keap1-Nrf2-sMaf Pathway in the Liver, Kidney, and Ovary of Laying Hens.
Authors:Ma Y, Shi Y, Wu Q, Ma W
Journal:Biol Trace Elem Res
PubMed ID:33405082
'This study evaluated the effect of epigallocatechin-3-gallate (EGCG) alleviating the reduction of antioxidant capacity induced by dietary vanadium (V) in the liver, kidney, and ovary of laying hens. Furthermore, Kelch-like ECH-associated protein 1(Keap1)-nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2)-small Maf proteins (sMaf) pathway was explored to reveal the molecular mechanism. ... More
Human Ubiquitin-Specific Peptidase 18 Is Regulated by microRNAs
Authors:Rubino E, Cruciani M, Tchitchek N, Le Tortorec A, Rolland AD, Veli Ö, Vallet L, Gaggi G, Michel F, Dejucq-Rainsford N, Pellegrini S
Journal:Front Genet
PubMed ID:33633774
'Ubiquitin-specific peptidase 18 (USP18) acts as gatekeeper of type I interferon (IFN) responses by binding to the IFN receptor subunit IFNAR2 and preventing activation of the downstream JAK/STAT pathway. In any given cell type, the level of USP18 is a key determinant of the output of IFN-stimulated transcripts. How the ... More