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Invitrogen™

PCR Cloning System with Gateway™ Technology with pDONR™221 & OmniMAX™2 Competent Cells

Die Gateway™ Technologie ermöglicht das schnelle Klonieren eines oder mehrerer Gene in nahezu allen Systemen für die Proteinexpression. Sobald einWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
1253502920 Reaktionen
Katalognummer 12535029
Preis (EUR)
1.234,00
Each
Menge:
20 Reaktionen
Preis (EUR)
1.234,00
Each
Die Gateway™ Technologie ermöglicht das schnelle Klonieren eines oder mehrerer Gene in nahezu allen Systemen für die Proteinexpression. Sobald ein Entry-Klon vorliegt, können Sie die Sie interessierenden Gene in einer Vielzahl von Expressionsvektoren, die für den Einsatz in der Gateway™ Technologie angepasst wurden, rekombinieren. Das PCR-Klonierungssystem mit Gateway™-Technologie wurde entwickelt, um einen Entry-Klon nach PCR mit attB-modifizierten benutzerdefinierten Primern zu erstellen (Abbildung 1). Das PCR-Produkt wird in der Regel mit einer Effizienz im Bereich von >99 % gerichtet kloniert. Das PCR-Klonierungssystem mit Gateway™-Technologie bietet:

• Schnelles, effizientes, direktionales Klonen von PCR-Produkten
• Vielseitigkeit zur Verwendung von Amplifikationsenzymen
• Klonierung ohne Restriktionsendonukleasen oder Ligase
• Auswahl von Entry-Klonen mit Kanamycin oder Zeocin™

Zusätzlich haben Vektoren pDONR™221- und pDONR™/Zeo-Vektoren einen pUC-Ursprung für hohe Plasmidausbeuten und universelle M13-Sequenzierungsstellen für eine einfache Verwendung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
KlonierungsmethodeGateway™
Anzahl Reaktionen20 reactions
ProduktlinieOne Shot
ProdukttypPCR-Klonierungssystem
Menge20 Reaktionen
VektorpDONR
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Das PCR-Klonierungskit mit Gateway™-Technologie umfasst Gateway™ BP Clonase™ II-Enzymgemisch und Reagenzien, Gateway™ pDONR™221- oder pDONR™/Zeo-Vektor, M13-Sequenzierungs-Primer, PEG/Mg2+ Lösung, Proteinase K, pEXP7-tet Positivkontrolle und One Shot™ Omnimax™2 kompetente Zellen. Lagern Sie kompetente Zellen und Enzymmischung bei -80°C. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?

In the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction, we would not recommend substituting the BP Clonase II/LR Clonase II enzymes with BP Clonase /LR Clonase enzymes as this would result in very low recombination efficiency.

Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?

Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.

How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?

We would recommend performing a BP reaction with a Donor vector in order to obtain an entry clone. This entry clone can then be used in an LR reaction with the Destination vector to obtain the new expression clone.

Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?

We do not offer the 5X LR Clonase buffer and 5X BP Clonase buffer as standalone products. They are available as part of the enzyme kits.

Do you offer Gateway vectors for expression in plants?

We do not offer any Gateway vectors for expression in plants.

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Zitierungen und Referenzen (2)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Participation of an Endomembrane Cation/H+ Exchanger AtCHX20 in Osmoregulation of Guard Cells.
Authors:Padmanaban S, Chanroj S, Kwak JM, Li X, Ward JM, Sze H,
Journal:Plant Physiol
PubMed ID:17337534
'Guard cell movement is induced by environmental and hormonal signals that cause changes in turgor through changes in uptake or release of solutes and water. Several transporters mediating these fluxes at the plasma membrane have been characterized, however less is known about transport at endomembranes. CHX20, a member of a ... More
Cytosolic Hydroxymethyldihydropterin Pyrophosphokinase/Dihydropteroate Synthase from Arabidopsis thaliana: A SPECIFIC ROLE IN EARLY DEVELOPMENT AND STRESS RESPONSE.
Authors:Storozhenko S, Navarrete O, Ravanel S, De Brouwer V, Chaerle P, Zhang GF, Bastien O, Lambert W, Rébeillé F, Van Der Straeten D,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:17289662
In plants, 6-hydroxymethyl-7,8-dihydropterin pyrophosphokinase/7,8-dihydropteroate synthase (mitHPPK/DHPS) is a bifunctional mitochondrial enzyme, which catalyzes the first two consecutive steps of tetrahydrofolate biosynthesis. Mining the Arabidopsis genome data base has revealed a second gene encoding a protein that lacks a potential transit peptide, suggesting a cytosolic localization of the isoenzyme (cytHPPK/DHPS). When ... More