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For superior RT-PCR performance, upgrade to the new SuperScript IV One-Step RT-PCR System.

SuperScript™ III One-Step RT-PCR System with Platinum™ Taq DNA Polymerase

Numéro de catalogue:  12574026

Invitrogen™  Applications liées: Reverse Transcription

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Description

Le système de RT-PCR en une étape SuperScript® III avec l’ADN polymérase Platinum® Taq est conçu pour la détection et l’analyse sensibles et reproductibles en point final de molécules d’ARN par RT-PCR. En utilisant cette formulation pratique en une étape, vous pouvez effectuer la synthèse de l’ADNc et l’amplification par PCR dans un seul et même tube en utilisant des amorces spécifiques aux gènes ainsi que des ARN cibles provenant soit d’ARN total, soit d’ARNm. Le système utilise un mélange de transcriptase inverse SuperScript® III et d’ADN polymérase Platinum® Taq dans un tampon de réaction optimisé, et il peut détecter un large éventail de cibles d’ARN, de 200 bp à 4,5 kb. La quantité de produit de départ peut aller de 0,01 pg à 1 µg d’ARN total. Principaux avantages de ce kit :

Sensible – détection courante pouvant aller jusqu’à 0,01 pg d’ARN total (voir la figure)
Commodité – format en une étape pour plus de vitesse et de praticité, et qui réduit également la variabilité entre les réactions
Spécificité – utilise la RT SuperScript® III pour la synthèse de l’ADNc jusqu’à 55°C, pour un amorçage plus spécifique avec des amorces spécifiques aux gènes (voir la figure)
Taille des amplicons – détection compatible de cibles allant jusqu’à 4,5 kb en longueur pour plus de flexibilité

Transcriptase inverse SuperScript® III
SuperScript® III Reverse Transcriptase est une version de M-MLV RT qui a été conçue pour réduire l’activité RNase H et procurer une meilleure stabilité thermique L’enzyme peut synthétiser de l’ADNc à une plage de température allant de 45 à 60°C, offrant une meilleure spécificité, des rendements plus élevés d’ADNc et davantage de produit de pleine longueur que d’autres transcriptases inverses. Dans la mesure où la SuperScript® III RT n’est pas inhibée sensiblement par l’ARN ribosomique et l’ARN de transfert, elle permet de synthétiser de l’ADNc à partir de l’ARN total.

ADN polymérase Platinum® Taq
L’ADN polymérase Platinum® Taq est un ADN polymérase Taq recombinant complexé avec un anticorps exclusif qui bloque l’activité des polymérases à des températures ambiantes. L’activité est restaurée après l’étape de dénaturation en cyclage PCR à 94°C, offrant un “démarrage à chaud” automatique en PCR pour une amélioration de la sensibilité, de la spécificité et du rendement.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Spécifications

PCR Method: 1-Step RT-PCR
Reverse Transcriptase: SuperScript™ III
Polymerase: Platinum® Taq DNA Polymerase
Hot Start: Built-In Hot Start
Sample Type (General): RNA
Detection Method: Gel Electrophoresis
Final Product Size(s): 4.5 kb or less
Primer-Probe Compatibility: Unlabeled Oligos
Product Line: Platinum®, SuperScript™
Product Size: 100 reactions
Shipping Condition: Dry Ice

Contenu et stockage

Components:
• 200 µL SuperScript® III RT/Platinum® Taq Mix
• 3 × 1 mL 2X Reaction Mix (containing 0.4 mM of each dNTP, 3.2 mM MgSO4)
• 500 µL 5 mM Magnesium Sulfate

Store all components at -30°C to -10°C.

Documents

Manuels et protocoles

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