Das Thermo Scientific QuantaBlu fluorogene Peroxidase-Substratkit ist ein Dreikomponentenkit mit proprietärem fluoreszierendem Substrat, Peroxid und Stopperlösungen für gestoppte (Endpunkt-) oder nicht gestoppte Assays. QuantaBlu fluorogene Peroxidasesubstrate ermöglichen die Durchführung schneller kinetischer ELISA-Assays mit höherer Sensitivität als TMB- und OPD-Substrate
. Merkmale des QuantaBlu fluorogenen Peroxidase-Substratkits:
• Empfindlicher als TMB-, OPD- oder ABTS-Substrate
• Flexibel – gestoppte, nicht gestoppte oder kinetische Assays möglich
•Breiter dynamischer Bereich (4-log-Peroxidase-Konzentrationsbereich)
• Hervorragende Stabilität: Arbeitslösung ist für 24 Stunden lang stabil
• Hohe Stokes-Verschiebung; Erregungs-/Emissionsmaximum 325/420 nm; Bereich von 315 bis 345 / 370 bis 460
• Keine Photobleichung
Zum Nachweis von Peroxidaseaktivität in ELISA-basierten Assays stehen verschiedene Substrate zur Verfügung. Kolorimetrische Substrate (z. B. TMB, OPD und ABTS) sind seit Jahren weit verbreitet. Jedes dieser Substrate variiert stark in Bezug auf seine Leistungsmerkmale wie Nachweisempfindlichkeit, Arbeitsbereich und erreichbare Signal-Rausch-Verhältnisse. Substratflexibilität ist auch ein zentrales Problem, das einen Assay betrifft. Stabilität, Entwicklungszeitanforderungen und die Fähigkeit zur Durchführung gestoppter und/oder kinetischer Assays unterscheiden sich je nach Substrat erheblich. Im Idealfall ist ein Substrat stabil, sehr empfindlich, hat ein hohes erzielbares Signal-Rausch-Verhältnis, verfügt über einen breiten dynamischen Bereich und ermöglicht dem Anwender gestoppte, nicht gestoppte und kinetische Assays.
QuantaBlu fluorogenes Peroxidasesubstrat erfüllt alle Anforderungen an ein ideales Substrat für den Peroxidasenachweis. QuantaBlu Substrate erzeugt bei Reaktion mit Peroxidase ein blau fluoreszierendes Reaktionsprodukt. Am fluoreszierenden Reaktionsprodukt tritt keine Photobleichung auf. Der fluorometrische Nachweis überwindet die Grenzen des kolorimetrischen Substratnachweises, bei dem nur eine Quantifizierung von maximal vier optischen Dichteeinheiten möglich ist. QuantaBlu Substrat ermöglicht die Durchführung gestoppter, nicht gestoppter und kinetischer Assays. Inkubationszeiten mit QuantaBlu Substrat für gestoppte und nicht gestoppte Assays können bei Raumtemperatur oder 37 °C zwischen 1 und 90 Minuten variieren. QuantaBlu Substrat besitzt in Assays eine flache Basislinie, die eine niedrige Nachweisempfindlichkeitsschwelle und ein hohes Signal-Rausch-Verhältnis ermöglicht.
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