Pierce™ Firefly Luc One-Step Glow Assay Kit

El kit de ensayo de brillo de luciferasa de luciérnaga en un paso Thermo Scientific Pierce mide la actividad de la luciferasa de luciérnaga de las células de mamíferos con un solo paso de adición de reactivo, por lo que es ideal para aplicaciones de detección de alto rendimiento (HTS).

Características del kit de ensayo de brillo de luciferasa de luciérnaga en un paso:

• Sensible: detección muy sensible de la actividad de la luciferasa de luciérnaga
• Inoloro: los reactivos no tienen un olor desagradable ni tóxico, lo que elimina la necesidad de trabajar en una campana de humos
• Práctico: protocolo de mezcla y lectura de un paso; no se requieren reactivos adicionales
• Estable: mayor estabilidad y vida media de la señal en comparación con los ensayos de flash
• Simple: no requiere un luminómetro con inyectores
• Fácilmente automatizable: se adapta a ensayos de alto rendimiento

Este kit de ensayo de brillo de luciferasa está diseñado para su uso con células de mamíferos cultivadas que expresan la enzima indicadora de luciferasa de luciérnaga. Varias características hacen que el kit resulte especialmente adecuado para luminómetros sin inyectores y para aplicaciones de detección de alto rendimiento (HTS). El protocolo homogéneo, práctico y de un solo paso minimiza los pasos de manipulación para apoyar el uso de la automatización. Solo tiene que combinar la solución de sustrato y el tampón de ensayo suministrados para crear una única solución de trabajo y, a continuación, añadirla a los pocillos de microplaca que contienen las células tratadas transfectadas. La salida de señal estable (brillo) de este sistema proporciona flexibilidad con respecto al tiempo de incubación. Cuando se utiliza con los plásmidos de luciferasa de luciérnaga Thermo Scientific, el kit proporciona un sistema de ensayo bioluminiscente altamente sensible para la detección de la actividad promotora o de la actividad de la vía.

Incluye:
Tampón de ensayo y solución de sustrato (100X)

Requiere:
Luciferasa de luciérnaga y luminómetro u otro instrumento capaz de controlar la luminiscencia, como los lectores de microplacas Thermo Scientific Luminoskan Ascent y Varioskan Flash.

Aplicaciones:
• Estudios de promotores para analizar los elementos reguladores de acción cis y trans
• Detección de fármacos
• Detección de ARNip y ARNmi
• Ensayos multiplex para estudiar efectos inespecíficos
• Ensayos con indicador de localización de proteínas
• Análisis de vía de transducción de señal

La luciferasa de luciérnaga es una proteína de 62 kDa que producen de forma natural varias especies de la familia de los coleópteros Lampyridae, en la que se incluyen los géneros Photinus y Luciola. La luciferasa de la luciérnaga roja Thermo Scientific tiene un rango de emisión de 560-700 nm (λmáx. = 613 nm). La señal bioluminiscente de la luciferasa de luciérnaga proviene de la oxidación de la D-luciferina. La salida de luz captada con un luminómetro puede correlacionarse con la cantidad de proteína de luciferasa de luciérnaga producida y utilizada para determinar la actividad del promotor que impulsa la expresión de la luciferasa de luciérnaga. La bioluminiscencia de la luciferasa de luciérnaga proporciona a los investigadores un ensayo no radiactivo para medir la actividad transcripcional de los elementos reguladores. La actividad del indicador de luciferasa de luciérnaga puede usarse para determinar la actividad del promotor, para estudiar la actividad de la vía ascendente en la célula, o para determinar el efecto de los activadores o inhibidores.