Trypsin, TPCK-Behandlung

Thermo Scientific Pierce TPCK-Trypsin ist eine Serin-Endoprotease, die für die Aminosäurenanalyse und Proteinsequenzierung, Kartierung und Strukturstudien geeignet ist. Die immobilisierte Form ermöglicht die Probentrennung nach der Behandlung.

Merkmale von Thermo Scientific Pierce TPCK-Trypsin

• Spaltet an der Carboxylseite von Arginin- und Lysinrückständen
• Verdauungsbedingungen: pH 7,5 bis 9,0, 37°

Trypsin bietet eine Vielzahl von Anwendungen, einschließlich Aminosäurenanalyse und Proteinsequenzierung, Kartierung und Strukturstudien. Enzyme wie Trypsin und Chymotrypsin sind zu wichtigen Werkzeugen in Sequenzierungsstudien geworden, da sie in ihrer Spaltung von Peptidbindungen sehr selektiv sind. Trypsin spaltet nur Peptidbindungen, bei denen die Carboxylgruppe durch einen Lysin- oder Argininrest beigesteuert wird, unabhängig von der Länge oder Aminosäuresequenz der Kette. Immobilisiertes TPCK-Trypsinkann in jeder Anwendung durch freies Pepsin ersetzt werden und ist von Vorteil, da es die Autolyse praktisch eliminiert, die Kontamination einer Probe mit der Protease verhindert und die Kontrolle der Verdauung durch Entfernen des Trypsin ermöglicht. Immobilisiertes Pepsin ist außerdem stabiler gegen wärmeinduzierte Denaturierung, was zu einer längeren Aufrechterhaltung der Aktivität führt.

Anwendungen:
• Entfernung adhärenter Zellen aus Gewebekulturflaschen
• Vorbereitung tryptischer Fragmente für die Sequenzierung des Edman-Degradation
• Immobilisiertes Trypsin kann zur Reinigung von Sojabohnen-Trypsin-Inhibitorenverwendet werden
• Verwenden Sie unseren Pierce Trypsin, MS-Grade (Art.Nr. 90057) für Massenspektrometrie-Arbeitsabläufe

Trypsin ist eine 23,8 kDa pankreatische Serin-Endoprotease aus Trypsinogen, Ein inaktives Vorläuferzymogen, nach enzymatischer Entfernung einer N-terminalen Führungssequenz durch Enterokinase. Sobald etwas Trypsin gebildet wurde, kann es die Umwandlung von mehr Trypsinogen in seine katalytisch-aktive Form katalysieren. Trypsin wird mit L-1-Tosylamido-2-Phenylethylchloromethylketon (TPCK) behandelt, um die kontaminierende Chymotrypsin-Aktivität zu hemmen, ohne die Trypsin-Aktivität zu beeinträchtigen.

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