Estreptavidina poli-HRP Pierce™

El conjugado de estreptavidina poli-HRP Thermo Scientific Pierce es una proteína de unión de biotina conjugada con polímeros de peroxidasa de rábano, lo que permite la amplificación de la señal y la detección de anticuerpos biotinilados para IHC y otros métodos.

Características de la estreptavidina poli-HRP:

• Alta sensibilidad: permite detectar elementos diana con poca abundancia (intervalo bajo de picogramos a femtogramos) con altas relaciones señal-ruido.
• Resistente: fabricación y purificación coherentes para eliminar moléculas pequeñas y no conjugadas y así obtener una señal de fondo mínimo y una alta sensibilidad.
• Flexible: compatible con sustratos cromogénicos, fluorogénicos y quimioluminiscentes.
• Versátil: compatible con ELISA, Western blot e inmunohistoquímica (IHC)
• Fácil de usar: se puede sustituir directamente en inmunoensayos y otros ensayos de detección.
• Práctico: formato líquido estabilizado listo para usar almacenado a 4 °C
.• Rentable: requiere menos conjugado por ensayo y conjugados HRP estándar.

El conjugado de estreptavidina poli-HRP está diseñado para proporcionar la máxima sensibilidad y la mínima señal de fondo en inmunoensayos en los que los volúmenes de muestras son limitados o en los que la molécula diana está presente a niveles bajos. La estreptavidina poli-HRP se purifica para eliminar moléculas de estreptavidina no conjugadas que reducen la intensidad de la señal al competir por sitios de unión con moléculas conjugadas con peroxidasa de rábano (HRP). Además, el conjugado está desprovisto de monómeros de HRP que pueden causar la señal de fondo. La estreptavidina poli-HRP Pierce es compatible con sustratos de HRP cromogénicos, fluorogénicos y quimioluminiscentes utilizados en ensayos ELISA, Western blot, inmunohistoquímica (IHC) e hibridación de ácidos nucleicos.

Existen varias formas de conjugados de estreptavidina-HRP que no contienen HRP polimerizado (poli-HRP) y son adecuados para la mayoría de ensayos de detección de biotina. Estos y otros anticuerpos conjugados con HRP de uso común y proteínas de unión a biotina tienen entre una y tres moléculas de HRP por proteína para mantener la funcionalidad del conjugado. Esta proporción molar de conjugación es eficaz en experimentos rutinarios pero puede carecer de la sensibilidad necesaria para detectar elementos diana presentes en cantidades bajas de picogramos a femtogramos sin el uso de pasos adicionales para amplificar la señal.

Cuando se necesita un mayor grado de amplificación de la señal con conjugados estándar de HRP, se pueden utilizar métodos como los sistemas de peroxidasa anti-peroxidasa (PAP) o los complejos de avidina-biotina (ABC). Sin embargo, estos métodos aumentan el coste del ensayo y el número de pasos que deben optimizarse. Gracias a la estreptavidina poli-HRP Pierce se evitan estos problemas, ya que emplea polímeros de moléculas de HRP que se conjugan con estreptavidina en un proceso de fabricación patentado que aumenta la relación molar del HRP en el conjugado al tiempo que mantiene la funcionalidad. El aumento de la relación molar entre las moléculas de HRP y la estreptavidina da como resultado que haya más moléculas de HRP disponibles por evento de unión para reaccionar con el sustrato. Por lo tanto, la estreptavidina poli-HRP Pierce proporciona una importante amplificación de la señal en comparación con otros conjugados de HRP, elimina la necesidad de pasos adicionales y ahorra tiempo y costes.

Como ocurre con todos los inmunoensayos, resulta necesaria una optimización para obtener la mejor relación señal-ruido. El cambio a sustratos y conjugados de mayor sensibilidad puede mostrar una mayor señal, así como una mayor señal de fondo. Si esto ocurre, siga las técnicas estándar de dilución primaria y secundaria o realice la optimización del tampón de bloqueo.