Pierce™ GST Protein Interaction Pull-Down Kit
Pierce™ GST Protein Interaction Pull-Down Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ GST Protein Interaction Pull-Down Kit

Los kits de extracción de interacción de proteínas con etiqueta GST Thermo Fisher Scientific Pierce contienen los componentes necesarios paraMás información
Have Questions?
Número de catálogoCantidad
215161 kit
Número de catálogo 21516
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 kit
Pedido a granel o personalizado
Los kits de extracción de interacción de proteínas con etiqueta GST Thermo Fisher Scientific Pierce contienen los componentes necesarios para capturar y purificar proteínas que interactúan con las proteínas de fusión con etiqueta GST.

Características del kit de extracción de interacción de proteínas con etiqueta GST:

«Pull-down» de GST (n.° de producto 21516): purifica suavemente los interactores de proteínas de cualquier proteína de fusión con etiqueta GST sin desnaturalizar
Kits completos: proporciona todos los componentes y el protocolo detallado para la purificación de interacciones entre proteínas
No se necesita un equipo especial: utilice reactivos y equipos de laboratorio corrientes (por ejemplo, microcentrífuga)
Práctico: las columnas de centrifugación de microcentrífuga facilitan la manipulación sencilla y eficiente de los gránulos de agarosa, incluido un procesamiento sencillo de múltiples muestras
Flexible: las instrucciones incluyen protocolos para el uso con proteínas de cebo y presa de diferentes fuentes
Unión: une aproximadamente 8 mg de proteína de fusión marcada con GST por ml de resina

Aplicaciones:
• Descubrir nuevas interacciones proteína:proteína a partir de un lisado celular
• Confirmar una supuesta interacción a partir de un lisado celular o con una proteína purificada previamente
• Extraer información de interacciones proteína:proteína a partir de lisados de transcripción/traducción in vitro

El usuario suministra la proteína de fusión etiquetada como el «cebo» y las células que expresan el objetivo de interacción de proteína putativa («presa»), y los kits de extracción proporcionan todo lo demás: tampón de lisis celular, columnas de centrifugación de microcentrífuga, resina de afinidad específica de etiquetas (gránulos de agarosa) y tampones y protocolos optimizados. Los kits de «pull-down» están diseñados como método de aprendizaje para los usuarios noveles y para aumentar la facilidad de uso, la comodidad y la reproducibilidad de los investigadores expertos.

Productos relacionados
Kit de «pull-down» de interacciones de proteínas His Pierce™
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Referencias generales:

  1. El método pull-down es una técnica de purificación por afinidad a pequeña escala similar a la inmunoprecipitación (IP), salvo en que la función del anticuerpo se sustituye por cualquier otro sistema de afinidad. En este caso, el sistema de afinidad es una proteína marcada con GST que se puede capturar con gránulos de agarosa glutatión. La proteína con marcaje de fusión actúa como cebo para capturar al supuesto socio de la unión (es decir, la presa). En un ensayo de pull-down típico, la proteína cebo inmovilizada se incuba con un lisado celular. Tras los pasos de lavado prescritos, los interactores se eluyen selectivamente para su análisis en gel o Western blot.
Especificaciones
ensayoPurificación por afinidad
Volumen del lecho750 μL
Para utilizar con (aplicación)Extracción (basada en etiquetas)
Para utilizar con (equipo)Microcentrífuga
FormatoKit
FormulaciónSlurry: 50 %
Cantidad1 kit
Suficiente para25 reacciones
ObjetivoSin especificidad
Capacidad (métrico)1.5 mL
Línea de productosPierce
TipoKit de extracción
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Suficiente para: Al menos 25 reacciones de «pull-down», cada una con 25 µl de resina
• Glutatión agarosa, 750 µl
• Tampón de lisis de «pull-down» de 250 ml
• Glutatión, 1 g
• Paquete de TBS (produce 500 ml), 1 paquete
• Columnas de centrifugación Pierce y accesorios, 27 columnas
• Tubos de recogida de microcentrífuga, 100 tubos

Tras recibirlo, almacene el tampón de lisis Pierce a temperatura ambiente. Guarde los componentes restantes del kit a 4 °C.

Preguntas frecuentes

If my protein is endogenously expressed, which Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit should I choose?

We recommend the biotin kit for endogenously expressed proteins. The reason for this is the wide variety of biotinylation reagents that can be used to label the detection protein of the binding pair. For help choosing a biotinylation reagent, refer to the Biotinylation Selection Guide available at our website.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How is the tagged protein detected on the membrane using the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

The biotin kit utilizes streptavidin-HRP to detect the biotinylated protein bound to the prey protein on the membrane. The GST kit utilizes a polyclonal goat anti-GST antibody for detection of the glutathione-S-transferase tagged fusion protein bound to another protein on a membrane.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How many reactions can be performed using one Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit?

The Thermo Scientific Pull-Down Protein:Protein Interaction Kits contain a complete, validated set of reagents specifically developed for performing pull-down assays.The kits contain sufficient materials for conducting 25 pull-down assays.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Are all of the conditions for binding the prey protein to the bait protein described in the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

No. Every protein pair will require unique conditions in order to bind with one another. Factors to consider are pH, ionic strength of the buffer, need for cofactors, whether the interaction is long term or transient, etc. The researcher is recommended to perform a literature search or try several different conditions in order to determine what conditions are best for the binding of their proteins of interest. The kit includes a “universal“ wash buffer formed by diluting the lysis buffer 1:1 in TBS.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

With the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits, what methods can be used to detect the prey protein?

The prey protein can be detected following transfer on a membrane. The membrane procedures uses 1:100,000 - 1:500,000 dilution of the anti-GST antibody.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.