Pierce™ Iodination Beads

Thermo Scientific Pierce Jodierungs-Beads sind Polystyrol-Beads mit einem Durchmesser von 3 mm, die mit einem Oxidationsreagenz beschichtet sind und eine effiziente Aktivierung von Jod-125- für Protein- oder Peptid-Jodierungsverfahren ermöglichen.

Eigenschaften der Jodierungs-Beads:

• Derivatisierte, gleichmäßige nicht-poröse Polystyrol-Beads
•Bemerkenswert reproduzierbare Jodierungen
• Jod-125-Aufnahme bis zu 99 %; Rückgewinnung markierter Proteine > 90 %
Funktionen für einen breiten pH- und Temperaturbereich
• Jodierung in Abwesenheit von Aziden, Detergenzien, Harnstoff und hohen Salzkonzentrationen
• Effiziente Jodierung von Oberflächenproteinen aus der Zellmembran
• Sanftere Jodierung als mit löslichem Chloramin-T, da es keinen Kontakt zwischen dem Protein und dem immobilisierten Oxidationsmittel gibt (Markwell, 1982)
• Schnelle und einfache Verwendung…Jodierung in 2-15 Minuten
• Reaktionsstopp durch einfaches Entfernen der Beads aus dem Reaktionsgemisch mit einer Zange oder Pasteur-Pipette; kein Reduktionsmittel zur Beendigung der Reaktion erforderlich
• Bessere Kontrolle der Inkubationszeit
• Jodierung von bis zu 500 µg Tyrosin-haltigem Peptid oder Protein/Bead
• Geeignet zur quantitativen Jodierung von Histidin bei pH 8,22

Die beschichteten Jodierungs-Beads ermöglichen die bequeme, effiziente Markierung ohne problematische und gefährliche oxidative Effekte, die normalerweise mit Methoden mit Choramin-T und anderen Lösungen verbunden sind. Pro Milliliter Proteinlösung können ein bis zwei Beads hinzugefügt und nach der Markierungsreaktion bequem entfernt werden, wodurch das Oxidationsreagenz vollständig aus dem Protein entfernt wird.

Jodierung umfasst die Einleitung von radioaktivem Jod in bestimmte Aminosäuren (normalerweise Tyrosine) in Proteinen und Peptiden. Die Jodierung erfolgt an den Ortho-Positionen zur Hydroxylgruppe auf Tyrosin; Mono- oder Di-Substitution kann auftreten. Wenn jodierbare Stellen wie Tyrosine fehlen oder in einem Protein nur eingeschränkt zugänglich sind, können jodierbare Phenolstellen mit Hilfe der Bolton-Hunter-Reagenzien (SHPP und Sulfo-SHPP) eingeführt werden. Die Spacerarme bestimmter Crosslinker enthalten auch jodierbare Tyrosylgruppen.

Radioaktives 125-I oder 131-I kann entweder durch enzymatische oder chemische Oxidation in Proteine eingebettet werden. Bei der chemischen Oxidationsmethode wird Natriumjodid in seine entsprechende reaktive Jodform umgewandelt, die dann spontan in Tyrosylgruppen eingreift. Oxidierende Reagenzien sind zwar für die Jodaktivierung erforderlich, können aber Proteine schädigen. Die Festphasen-Struktur der Jodierungs-Beads (ehemals IODO-BEADS) minimiert schädliche Effekte.