Verwenden Sie diese biotinylierte Form von Thermo Scientific Pierce Protein A, um Kaninchen- und Human-Antikörper, insbesondere IgG-Isotypen, in Western-Blotting-, ELISA-, IHC- und anderen Immunassay-Protokollen zu untersuchen und nachzuweisen.
Merkmale von Protein A:
• Enthält vier Fc-bindende Domänen pro Protein
• Besser als Protein G für polyklonales IgG von Kaninchen-, Schwein-, Hund- und Katzenserum
• Schlechter als Protein G für Maus-IgG1, humanes IgG3 und Ratten, Ziegen- und Kuhantikörper
Protein A ist eine Zellwandkomponente, die von mehreren
Staphylococcus aureus-Stämmen erzeugt wird und aus einer einzelnen Polypeptidkette besteht und wenig oder kein Kohlenhydrat enthält. Das Protein A-Molekül enthält vier hochaffine Bindungsstellen, die mit der Fc-Region von IgG mehrerer Spezies interagieren können, einschließlich Mensch und Kaninchen. Die optimale Bindung erfolgt bei einem pH-Wert von 8,2, ist aber auch bei neutralen oder physiologischen Bedingungen (pH 7,0 bis 7,6) wirksam.
Eigenschaften des nativen Proteins A:• Quelle:
Staphylococcus aureus• Molekulargewicht: 46.762 (Apelent MW von SDS-PAGE: 42.000)
• Form: salzfreies Pulver
• A280 aus 0,1 %-iger Lösung: ∼0,137 (theoretisch)
• Isoelektrischer Punkt (pI): 5,16 (theoretisch)
Die Interaktion zwischen Protein A und IgG ist nicht für alle Spezies äquivalent. Auch innerhalb einer Spezies interagiert Protein A mit einigen Subklassen von IgG und nicht mit anderen. Zum Beispiel binden humanes IgG1, IgG2 und IgG4 stark, während IgG3 nicht bindet. Es gibt auch viele Fälle, in denen monoklonale Antikörper nicht an Protein A binden, insbesondere die Mehrheit der Immunglobuline von Ratten sowie Maus-IgG1.
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