Pierce™ Peptid-Retentions-Standard

Thermo Scientific Pierce Peptid-Retentionsstandard ist eine Mischung aus fünf Amid-Decapeptiden am C-Terminus, die bei der Umkehrphasen-HPLC Referenzelutionsprofile liefern.

Merkmale des Peptid-Retentionsstandards:

•Bestimmung der relativen Reihenfolge der Peptid-Elution aus einem komplexen Gemisch
• Effektile Vorhersage von Peptid-Elutionsprofilen zur einfacheren Identifizierung und Einsparung von Aufreinigungszeit
• Identifizierung von Peptiden bekannter Aminosäuren-Zusammensetzung auf Umkehrphasen-HPLC-Säulen
• Überwachung der Säulenleistung—Effizienz, Selektivität und Auflösung während der Säulenalterung
• Bewerten der Umkehrphasenunterstützung bei unterschiedlichen n-Alkylkettenlängen und Ligandendichten
• Vergleichen von Umkehrphasensäulen verschiedener Hersteller

Der Peptid-Retentionsstandard ermöglicht eine genaue Vorhersage der Elutionszeit für Peptide mit bekannter Aminosäurezusammensetzung und einer Länge von bis zu 20 Resten.Der Referenzstandard hilft bei der Vorhersage der relativen Reihenfolge der Peptidelution innerhalb eines komplexen Gemisches, was die Identifizierung angegebener Peptide vereinfacht und Zeit bei der Aufreinigung von Peptiden einspart.Durch regelmäßige Tests des Standards über die gesamte Lebensdauer einer Säule hinweg lassen sich Leistungsmerkmale wie Effizienz, Selektivität und Auflösung im Lauf der Säulenalterung überwachen.Der Standard kann auch zur Bewertung verschiedener Umkehrphasenunterstützungen bei unterschiedlichen n-Alkyl-Kettenlängen und Ligandendichten sowie von Säulen verschiedener Hersteller herangezogen werden.

Der Peptid-Retentionsstandard besteht aus fünf Amid-Decapeptiden mit C-Terminus (S1 bis S5) mit der generischen Formel Ac-Arg-Gly-X-X-Gly-Leu-Leu-Gly-Lys-Amid.Vier dieser Peptide sind mit der folgenden Sequenzvariation Na-acetyliert:Gly3-Gly4, Ala3-Gly4, Val3-Gly4 und Val3-Val4.Das fünfte Peptid (Ala3-Gly4) enthält eine freie Na-Aminogruppe.Dieses Gemisch liefert 100 bis 200 Injektionen (etwa 0,1 mg jedes Peptids) bei 0,1 AUFS und 210 nm.Der Peptid-Retentionsstandard wird als Trockenfilm in einem versiegelten Fläschchen geliefert.

Eine einfache, quantitative Methode zur Vorhersage von Peptid-Retentionszeiten wurde von Guo et al. entwickelt(1985, 1986).Retentionszeiten werden vorhergesagt, indem die Gesamtsumme aus den Werten gebildet wird, die den Anteil jedes Aminosäurerests und der Peptid-Endgruppen in Minuten darstellen.

Die Retentionszeit hängt von der Molekülmasse des Peptids ab.Die Auswirkung auf die Retention ist bei einem kleinen Peptid relativ unbedeutend, steigt aber mit der Größe des Moleküls.Die Genauigkeit der Vorhersage der Peptid-Retentionszeit sinkt ab mehr als 20 Resten signifikant.Zur Sicherstellung der Genauigkeit wird ein Peptidstandard verwendet, um Instrumentenschwankungen, Säulenalterung, Schwankungen der n-Alkylkettenlänge und der Ligandendichte auszugleichen.