IPTG

El IPTG Thermo Scientific Pierce es isopropil-β-D-tiogalactopiranósido para uso con sustratos de beta-galactosidasa como X-Gal con el fin de detectar la expresión de vectores, plásmidos o fragmentos de ADN que contienen el gen indicador.

El reactivo X-Gal (5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido) es un sustrato cromogénico para β-galactosidasa que produce un precipitado azul, es soluble en DMF, y puede usarse para detectar vectores, plásmidos o fragmentos de ADN que contengan el gen β-galactosidasa.

El IPTG (isopropil-β-D-tiogalactopiranósido) puede usarse para maximizar la expresión de genes en vectores de expresión. Al examinar una biblioteca de bacteriófagos lambda con un anticuerpo, la probabilidad de éxito se puede aumentar al prevenir la expresión de la proteína de fusión hasta que las placas estén bien establecidas. Al colocar un filtro de nitrocelulosa que contiene el inductor IPTG en la placa y continuar su crecimiento a 37 °C, la expresión de la proteína potencial de fusión βgalactosidasa-ADNc se puede inducir tras tres o cuatro horas de crecimiento en placa. Después, el filtro de nitrocelulosa se examina con anticuerpos. El IPTG también se utiliza junto con X-Gal para detectar β-galactosidasa activa y es práctico en aplicaciones que utilizan vectores bacteriófagos M13 e Igt11

Características del IPTG:

• X-Gal produce un precipitado azul intenso para detectar la expresión de β-galactosidasa
• Se puede combinar con IPTG para maximizar selectivamente la detección de β-galactosidasa