Applied Biosystems™

AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Reagents

Name: AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Reagents
SKU: 4387424
Price: 1.180.00 EUR

AgPath-ID™ One-Step RT-PCR-Reagenzien sind für die sensitive, robuste Amplifikation von RNA-Zielen mit einer schnellen Einzelschlauch TaqMan™ real-time Reverse-Transkription-PCR-(RT-PCR)-Strategie konzipiert.

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Katalognummer	Anzahl Reaktionen
4387424	500 Reaktionen
AM1005	100 Reaktionen
4387391	1000 Reaktionen

3 Optionen

Katalognummer 4387424

Preis (EUR)

1.180,00

Each

Anzahl Reaktionen:

500 Reaktionen

Preis (EUR)

1.180,00

Each

AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Reagents are designed for sensitive, robust amplification of RNA targets using a rapid single-tube TaqMan™ real-time reverse transcription PCR (RT-PCR) strategy.

Empfohlen für die RNA-Pathogen-Amplifikation

Konsistente Amplifikation von RNA-Zielen mit hoher Spezifität und Sensitivität

Optimiert für den Einsatz mit Ihren targetspezifischen Primern und Sonden

Enthält ROX für die quantitative Fluoreszenzsignal-Normierung

AgPath-ID™ One-Step RT-PCR-Reagenzien sind für schnelle und einfache Reaktionsvorbereitung konfiguriert. Diese Reaktionen sind in einem einzigen Röhrchen kombiniert, was Fehler beim Umgang mit den Proben minimiert und die Vorbereitungszeit verkürzt. Nach dem Zusammenbau sind Ergebnisse innerhalb ungefähr einer Stunde verfügbar. Das 25x RT-PCR-Enzymgemisch im Kit enthält eine hocheffiziente ArrayScript™ Reverse-Transkriptase, ein mutiertes MMLV RT für hohe cDNA-Erträge und AmpliTaq GOLD™ Polymerase, die bevorzugte Hot-Start-DNA-Polymerase für die spezifische Target-Amplifikation. Der 2x RT-PCR-Puffer wurde für eine effiziente, robuste Reverse-Transkription und PCR optimiert und umfasst den passiven Referenzfarbstoff ROX™ Dye für die quantitative Fluoreszenzsignal-Normierung. Außerdem gibt es einen Detection Enhancer als optionales Reagenz für die Amplifikation von Templates mit einem hohen GC-Gehalt oder persistierender Sekundärstruktur.

Nur für veterinärmedizinische Zwecke.

Specifications

BeschreibungWorks on all AB platforms, but is optimized for the 7500.

Wiedergabetreue (vs. Taq)25 X

Zur Verwendung mit (Geräte)7500 System, 7500 Fast System, 7900HT System, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7 Flex, QuantStudio 6 Pro, QuantStudio 7 Pro, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ Absolute Q Digital PCR System

FormatTube

Anzahl Reaktionen500 Reaktionen

Passiver ReferenzfarbstoffROX (vorgemischt)

PolymeraseAmpliTaq Gold DNA-Polymerase

ProduktlinieAgPath-ID, Ambion

ProdukttypEinstufige RT-PCR-Reagenz

Menge500 reactions

Reverse TranskriptaseArrayScript™

ProbentypRNA

VersandbedingungTrockeneis

Ausreichend für500 Reaktionen

Volumen7 mL

Konzentration25 X

NachweisverfahrenPrimer-Sonde

GC-Rich PCR PerformanceHoch

PCR-MethodeEinstufige qRT-PCR

ReaktionsgeschwindigkeitStandard

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

Sufficient for 500 reactions of 25 μL, contains:
• 7mL 2X RT-PCR Buffer
• 550 μL 25X RT-PCR Enzyme Mix
• 25 mL Nuclease-free Water.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

With the AgPath-ID One-Step RT-PCR Reagents, I am getting signal detection in the no-template control (NTC) reaction. Why is this?

This is likely due to PCR contamination. Here are some recommendations:

- Repeat the qRT-PCR reaction with fresh reagents and decontaminated pipettors.
- Set up and run the qRT-PCR reaction in an area that is isolated from areas used for nucleic acid isolation and PCR product analysis.
- The Reverse Transcriptase enzyme contained in this kit is produced using an E. coli expression vector containing a proprietary version of the MMLV pol gene (GenBank accession no. J02255) expressed from pET-24(+). It is possible that a minimal amount of the expression vector could be carried over into the final mastermix formulation. If you are targeting MMLV, a related virus, or any of the plasmid sequence, we recommend designing primer sequences for target sequences not contained in the expression vector.

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

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