AmpliTaq Gold™ 360 Mastermix

AmpliTaq Gold™ 360 PCR-Mastermix enthält alles Notwendige für eine erfolgreiche PCR-Amplifikation in einem praktischen Paket, in dem alle Komponenten bereits vorgemischt und abgemessen sind. AmpliTaq Gold™ 360 Master Mix wurde für eine 360°-Abdeckung eines kompletten Spektrums an Zielsequenzen entwickelt. Der Master Mix wird in der zweifachen empfohlenen Einsatzkonzentration geliefert und kann problemlos durch Zugabe von Templates und Primersubstanzen verdünnt werden. Der AmpliTaq Gold™ 360 PCR Master Mix, konzipiert für Anwenderfreundlichkeit, kann auf verschiedene Reaktionsvolumina skaliert werden und bietet so mehr Flexibilität in Anwendung und Format. Der Hauptbestandteil des Master Mix ist AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase. Er umfasst jedoch zudem den erstklassigen 360 GC-Enhancer, der wahlweise bei Templates mit hohem GC-Gehalt zugegeben werden kann. Dank der breiten Template-Abdeckung ist eine Optimierung der PCR-Reaktionsbedingungen bei einem Einsatz von AmpliTaq Gold™ 360 Master Mix praktisch nicht erforderlich. Hauptmerkmale:

• Optimiert für ein extrem breites Spektrum an Zielsequenzen – ob in der Routine oder bei anspruchsvollen Anwendungen
• Beispiellose Empfindlichkeit, Spezifität und Ausbeute
• Robuste Amplifikation GC-reicher Sequenzen mit marktführendem 360 GC-Enhancer
• Sequenzierungsdaten von höchster Qualität
• Anwenderfreundlicher, vorgemischter Master Mix

Optimiert für einfache und anspruchsvolle Ziele
Zu den herausfordernden Zielen zählen AT-reiche, GC-reiche oder Primer-Dimer-bildende Amplikons, Homopolymer-Wiederholungen und Amplikons, die Herausforderungen bei der Sequenzierung darstellen. Amplikons, für die in der Vergangenheit spezielle Enzyme und Reaktionsbedingungen erforderlich waren, können jetzt reproduzierbar mit einem einzigen Reagenz unter standardisierten Bedingungen amplifiziert werden (siehe Abbildung). Das Benchmarking von Mitbewerber-Produkten mit mehr als 40 Amplikons charakterisiert AmpliTaq Gold™ 360 als leistungsstärkstes Enzym und gewährleistet so die höchste Erfolgswahrscheinlichkeit für die Amplifikation von alltäglichen und anspruchsvollen Zielen (siehe Tabelle).

Optimiert für die automatisierte Heißstart-PCR
Die AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase ist der Hauptbestandteil einer automatisierten, praktischen und effizienten Heißstart-PCR. Wird der AmpliTaq Gold™ 360 PCR Master Mix dem Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur zugegeben, kann das inaktive Enzym keine Primer-Verlängerung bewirken. Ein möglicherweise aufgetretenes Fehlpriming bei niedriger Stringenz wird nicht enzymatisch verlängert und anschließend amplifiziert. Für die Aktivierung ist ein erster thermischer Inkubationsschritt erforderlich. Hierdurch wird sichergestellt, dass das Enzym nur bei Temperaturen aktiviert wird, bei denen die DNA vollständig denaturiert ist. Die Menge der AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase steigt bei der Reaktion mit jedem Zyklus langsam an, und die spezifische Produktausbeute erhöht sich ohne Anreicherung unspezifischer Produkte, einschließlich Primer-Dimere. Ausgezeichnete Spezifität für ein breites Spektrum von Zielsequenzen (siehe Abbildung). Die besonders hohe Spezifität ermöglicht ein einfacheres Multiplexing und eine einfachere allelische Diskriminierung.

Amplifikation von Amplikons in niedriger Kopienzahl und langen Zielen
Die AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase amplifiziert effizient Ziele mit niedriger Kopienzahl (siehe Abbildung), selbst bei hohen Konzentrationen komplexer DNA, wodurch sie sich besonders für den Nachweis von Pathogenen in niedriger Kopienzahl und die Amplifikation von Zielen aus degradierten DNA-Proben eignet. Die extreme Reinheit des Enzyms trägt zu seiner unübertroffenen Empfindlichkeit bei. AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase amplifiziert effizient und reproduzierbar auch lange Sequenzen (bis zu 5 kb). Die Abbildung zeigt eine gute PCR-Amplifikation von langer Human- und Plasmid-DNA.