Restore™ PLUS Western Blot Stripping-Puffer
Thermo Scientific™

Restore™ PLUS Western Blot Stripping-Puffer

Thermo Scientific Restore PLUS Western Blot Stripping Buffer ist eine erweiterte Formel zum Entfernen gebundener primärer und sekundärer Antikörper vonWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
46430X44 x 500 ml
4642830 ml
46430500 ml
Katalognummer 46430X4
Preis (EUR)
773,65
Exklusiv online
900,00
Ersparnis 126,35 (14%)
Each
Menge:
4 x 500 ml
Preis (EUR)
773,65
Exklusiv online
900,00
Ersparnis 126,35 (14%)
Each
Thermo Scientific Restore PLUS Western Blot Stripping Buffer ist eine erweiterte Formel zum Entfernen gebundener primärer und sekundärer Antikörper von Membranen, damit diese rehybridisiert und mit Chemolumineszenzsubstraten erneut ausgelesen werden können.

Merkmale von Restore PLUS Western Blot Stripping Buffer:

Gebrauchsfertig und anwenderfreundlich – Keine Verdünnung erforderlich; keine unangenehmen Gerüche; Lagerung bei Raumtemperatur
Kompatibel – Verwendung auf Nitrozellulose- und PVDF-Membranen, unabhängig davon ob noch nass oder bereits trocken; funktioniert mit praktisch jedem Blockierpuffer, Enzymkonjugat und Chemolumineszenzsubstrat
Kostengünstig – Sparen Sie wertvolle Zeit und Proben; Blots beim ersten Mal effektiv ablösen
Robust und dennoch schonend – Übertragene Proteine bleiben lebensfähig; eine Blot bis zu fünf Mal strippen
Flexibel — Ablösen und Rehybridisieren, um Antikörperkonzentrationen zu optimieren oder um ein neues Antigen mit verschiedenen Antikörpern nachzuweisen

Restore PLUS Buffer ist eine alternative Formulierung des ursprünglichen Thermo Scientific Restore Western Blot Stripping Buffer. Der Restore PLUS Stripping Buffer wurde für den Einsatz mit Antikörpern entwickelt, die schwer von Western Blots zu entfernen sind und längere Inkubationszeiten oder Inkubationstemperaturen von mehr als 22 °C mit schonenderen Formulierungen erfordern. Antikörper mit hoher Affinität können bei Raumtemperatur und ohne das Entfernen übertragener Proteine schnell und effektiv von Western Blots abgelöst („gestrippt“) werden, wodurch mehrere Rehybridisierungen des Ziels möglich sind.

Protokollzusammenfassung:
• Waschen Sie den Blot, um chemolumineszentes Substrat zu entfernen
• Blot in Restore Western Blot Stripping Buffer für 5 bis 15 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren
(oder bei 37 °C bei Antikörpern mit hoher Affinität inkubieren)
• Blot entfernen und im Waschpuffer waschen
• Membran blockieren
• Auf eine ausreichende Entfernung von Antikörpern testen
• Anschließend das nächste Immunblotexperiment durchführen
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Specifications
FormFlüssig
ProduktlinieRestore
Menge4 x 500 ml
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Nach Erhalt bei Raumtemperatur lagern. Das Produkt wird bei Umgebungstemperatur versendet.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How can I store, strip, and reuse my western blot?

For nitrocellulose or PVDF membrane following Western blot detection using a chemiluminescent or fluorescent substrate system: Following transfer, air dry the membrane and place in an envelope, preferably on top of a supported surface to keep the membrane flat. The blot can be stored indefinitely at -80 degrees C. When ready to reprobe, prewet the PVDF blot with alcohol for a few seconds, followed by a few rinses with pure water to reduce the alcohol concentration. Then proceed as normal with blocking step.

FOR STRIPPING/REPROBING OF MEMBRANES: Harsh protocol (see NOTE below for modifications)

1) Submerge the membrane in stripping buffer (100 mM BME, 2% SDS, 62.5 mM Tris-HCl, pH 6.7) and incubate at 50 degrees C for 30 min with occasional agitation. If more stringent conditions necessary, incubate at 70 degrees C.

2) Wash 2 x 10 min in TBS-T/PBS-T at room temperature.

3) Block the membrane by immersing in 5% blocking reagent TBS-T or PBS-T for 1 hr at room temperature.

4) Immunodetection

NOTE: Often you don't need such harsh conditions to remove antibodies from their proteins. The stringency of one or several of the variables can be decreased: lower the temperature, decrease the time, less BME, less SDS, etc. An especially mild but still often effective stripping protocol is lower pH incubation. Example: pH 2.0 Tris 50-100 mM, 30-60 min incubation (you may do two incubations if you wish). Then rinse and block as usual. If you do not wish to re-use the membrane immediately after stripping, you can store the membrane in plastic wrap (wet, you do not want it to dry out). Another simple, mild stripping buffer is 0.1 M glycine•HCl (pH 2.5-3.0), incubation 30 min to 2 hrs room temperature or 37 degrees C, depending on the antibody.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.