Der Thermo Scientific DyLight 650 Amine-Reactive Dye ist ein NHS-Ester-aktiviertes Derivat des Hochleistungsfarbstoffs DyLight 650 zur Fluoreszenzmarkierung von Antikörpern und anderen Proteinen, die dann als molekulare Sonden für die zelluläre Bildgebung und andere Fluoreszenzdetektionsmethoden verwendet werden.
DyLight 650 liefert eine kräftige, dunkelrote Fluoreszenz mit vergleichbarer oder verbesserter Leistung gegenüber anderen Farbstoffen, einschließlich Alexa Fluor™ 647 und Cy5™ für Fluoreszenzanwendungen. Die hohe Wasserlöslichkeit der DyLight Fluorophore bedeutet, dass ein hohes Farbstoff-zu-Protein-Verhältnis erreicht werden kann, ohne eine Präzipitation der Konjugate zu verursachen. Der DyLight 650 Amin-Reaktivfarbstoff ist auch in zwei Antikörperkennzeichnungs-Kits erhältlich.
Merkmale des DyLight 650 NHS-Esters:
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Leistungsstark — DyLight 650 fluoresziert heller als Alexa Fluor 647 und Cy5
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Spezifisch — Der NHS-Ester-aktivierte Farbstoff kennzeichnet Proteine und andere Moleküle an den primären Aminen (-NH2)
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Optimiertes Verfahren — Nach dem Standardprotokoll entstehen Antikörper mit ausgezeichneten Farbstoff-zu-Protein-Verhältnissen und Rückgewinnungsraten für optimale Aktivität und Fluoreszenzmarkierung
Anwendungen:• Markierung primärer Antikörper für Immunfluoreszenzmikroskopie, Immunhistochemie (IHC), Western Blotting und ELISA-Assays
• Zielproteinmarkierung für
In-vitro- und
In-vivo-Fluoreszenzdetektionsstrategien
DyLight 650 Amine-Reactive Dye wird mit einem
N-Hydroxysuccinimid(NHS)-Ester-Anteil aktiviert, um mit exponierten N-terminalen α-Aminogruppen oder den ε-Aminogruppen von Lysin-Resten zu reagieren und stabile Amidbindungen zu bilden. Erfahren Sie mehr über die
NHS-Ester-Chemie.
Typische Markierungsreaktionen erfordern, dass der Farbstoff zuerst in wasserfreiem Dimethylformamid (DMF) oder einem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel gelöst wird, bevor eine bestimmte molare Farbstoffmenge in einen aminfreien Puffer mit dem zu markierenden Protein gegeben wird. Die hohe Löslichkeit der DyLight Fluore ermöglicht es jedoch, Proteinlösungen direkt in spezifische Mengen des Markierungsreagenz zu geben. Diese Funktion ermöglicht die Bereitstellung von DyLight 650 Amine-Reactive Dye in mehreren Formaten mit flexiblen Protokollen, um effiziente Markierungsgrade zu erzielen.
Wir bieten auch DyLight 650 Antikörpermarkierungskits im Standard- und Mikromaßstab zur schnellen und effizienten Fluoreszenzmarkierung von Antikörpern für Fluoreszenzanwendungen. Das Standard-Kit enthält alle erforderlichen Komponenten, um drei separate Kennzeichnungsreaktionen mit 1 mg IgG oder ähnlichen Mengen anderer Proteine durchzuführen. Das Mikromaßstab-Kit enthält alle erforderlichen Komponenten, um fünf separate Markierungsreaktionen mit 100 µg IgG durchzuführen. Beide Kit-Größen umfassen den Amine-Reactive DyLight 650 NHS-Ester in praktischen Einwegfläschchen sowie Aufreinigungsharz und Zentrifugensäulen für die Vorbereitung gebrauchsfertiger Konjugate.
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