Pierce™ HeLa Protein-Abbau-Standard
Pierce™ HeLa Protein-Abbau-Standard
Thermo Scientific™

Pierce™ HeLa Protein-Abbau-Standard

Der Thermo Scientific Pierce HeLa-Proteinverdaustandard ist ein umfangreich validierter Säugetierproteinverdau, der als Qualitätskontrollprobe bei der massenspektrometrischen Analyse komplexer proteomischer ProbenWeitere Informationen
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Der Thermo Scientific Pierce HeLa-Proteinverdaustandard ist ein umfangreich validierter Säugetierproteinverdau, der als Qualitätskontrollprobe bei der massenspektrometrischen Analyse komplexer proteomischer Proben verwendet werden kann.

Merkmale des HeLa-Proteinverdaustandards:

Positivkontrollprobe — Komplexer Säugetierproteomproben-Proteinverdau (> 15.000 Proteine) von der HeLa S3-Zelllinie
Gründlicher tryptischer Verdau — Hergestellt mit LysC und Trypsin, um weniger als 10 % versäumte tryptische Spaltungen zu gewährleisten
Validierte Peptidqualität — Unter 10 % Methionin-Oxidation und unter 10 % Lysin-Carbamylierung
Nach strengen Kriterien geprüft — Qualitativ hochwertiger, konsistenter Proteinverdau garantiert und dokumentiert durch chargenspezifische Analysenzertifikate
Stabil — Wird im stabilen, lyophilisierten Format bereitgestellt

Der Proteinverdaustandard stammt von einer gut etablierten HeLa S3-Referenzzellinie eines Adenokarzinoms. Da HeLa S3-Zellen mehr als 15.000 Proteine mit relevanten post-translationalen Modifikationen exprimieren, ist diese Zelllinie ein idealer Standard für komplexe massenspektrometrische Anwendungen in der Proteomik. Der Aufschluss des Zelllysats mit LysC und Trypsin minimiert das Versäumen tryptischer Spaltungen und verbessert die Proteinsequenzabdeckung. Im Gegensatz zu anderen erhältlichen Substanzen für den MS-Proteinverdau erfüllt der Pierce HeLa-Proteinverdaustandard strengste Anforderungen an Peptidqualität, Verdaueffizienz und chargenübergreifende Einheitlichkeit des Verdaus.

Anwendungen:
• Qualitative LC-Beurteilung
• LC/MS-Standardisierung
• LC/MS-Methodenentwicklung
• TMT™ Reagenzmethodenentwicklung

Der Pierce HeLa-Proteinverdaustandard ist ein gefriergetrocknetes, tryptisches Peptidgemisch, das als Qualitätskontrollstandard für die Flüssigkeitschromatographie(LC)-Trennung und für die Methodenentwicklung sowie das Festlegen von Leistungsmaßstäben in der Massenspektrometrie verwendet werden kann. Die Verdaurezeptur wurde speziell für LC/MS-Experimente entwickelt und enthält keine Salze oder Detergenzien. Bei einem regelmäßigen Einsatz des Verdaustandards vor der Analyse komplexer Proben kann die LC/MS-Leistung über Proben und über die Zeit hinweg überwacht und normalisiert werden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
EndprodukttypPeptide
Zur Verwendung mit (Geräte)Massenspektrometer
Menge5 x 20 μg
ReagenztypStandard
ArbeitsablaufschrittMS-Systemleistung
NachweisverfahrenMassenspektrometrie
FormFest
ProduktliniePierce
ProdukttypStandard für Proteinverdau
AusgangsmaterialPeptide
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
0,0

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How do I verify the LC-MS system after installation of a new column for proteomic applications?

Several technical replicate injections of a known standard sample, e.g., Pierce BSA Digest (Cat. No. 88341), Pierce 6 Protein Digest (Cat. No. 88342), or Pierce HeLa Protein Digest Standard (Cat. Nos. 88328, 88329) should be used to equilibrate and compare the new column to reference chromatograms.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Mass Spectrometry Support Center.

How do I assess my LC-MS system performance?

The best way to assess the performance of an entire LC-MS system is using a mass spectrometry calibration solution, peptide retention time standards (Pierce Peptide Retention Time Calibration Mixture (PRTC), Cat. No. 88321 and Pierce LC-MS/MS System Suitability Standard (7 x 5 Mix), Cat. No. A40010), and a known standard sample, e.g., Pierce BSA Digest (Cat. No. 88341), Pierce 6 Protein Digest (Cat. No. 88342), or Pierce HeLa Protein Digest Standard (Cat. Nos. 88328, 88329) specific to your application. We recommend frequent assessment of LC-MS system performance on a routine basis to compare results over time.

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Which standards and calibrants do you recommend using for assessing LC-MS system suitability?

Here are our recommendations:

- Pierce Peptide Retention Time Calibration Mixture (Cat. No. 88321) for LC system and gradient optimization
- Pierce BSA Protein Digest, MS grade (Cat. No. 88341), Pierce 6 Protein Digest, equimolar, LC-MS grade (Cat. No. 88342), and Pierce HeLa Protein Digest Standard (Cat. Nos. 88328, 88329) for "bottom up" LC-MS method optimization and LC-MS suitability assessment
- Pierce LC-MS/MS System Suitability Standard (7 x 5 Mix) (Cat. No. A40010) for assessing the gradient, sensitivity, and dynamic range of the LC-MS system for discovery and targeted peptide quantitative workflows
- Pierce TMT11plex Yeast Digest Standard (Cat. Nos. A40938, A40939) for assessing system performance for TMT-based quantitative workflows
- Pierce Intact Protein Standard Mix (Cat. Nos. A33526, A33527) for "top down" LC-MS method optimization and LC-MS suitability assessment

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I'm struggling with mass spectrometry sample clean-up and feel that I'm losing peptides. Can you help me verify?

We recommend using the Pierce HeLa Protein Digest Standard (Cat. Nos. 88328, 88329) to test your sample clean-up method. Use it directly and also as a control, co-treated with the sample to check for any loss of peptides.

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I have a low number of protein identifications from my protein digest sample. What can I do?

We recommend checking your mass spectrometry system performance using the Pierce HeLa Protein Digest Standard (Cat. Nos. 88328, 88329) to help determine if the problem is from the sample preparation or the LC-MS system.

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Zitierungen und Referenzen (3)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
QCloud2: An Improved Cloud-based Quality-Control System for Mass-Spectrometry-based Proteomics Laboratories.
Authors:Olivella R,Chiva C,Serret M,Mancera D,Cozzuto L,Hermoso A,Borràs E,Espadas G,Morales J,Pastor O,Solé A,Ponomarenko J,Sabidó E
Journal:Journal of proteome research
PubMed ID:33724836
QCloud is a cloud-based system to support proteomics laboratories in daily quality assessment using a user-friendly interface, easy setup, and automated data processing. Since its release, QCloud has facilitated automated quality control for proteomics experiments in many laboratories. QCloud provides a quick and effortless evaluation of instrument performance that helps ... More
BoxCar and Library-Free Data-Independent Acquisition Substantially Improve the Depth, Range, and Completeness of Label-Free Quantitative Proteomics.
Authors:Mehta D,Scandola S,Uhrig RG
Journal:Analytical chemistry
PubMed ID:34978796
Data-dependent acquisition (DDA) methods are the current standard for quantitative proteomics in many biological systems. However, DDA preferentially measures highly abundant proteins and generates data that is plagued with missing values, requiring extensive imputation. Here, we demonstrate that library-free BoxCarDIA acquisition, combining MS1-level BoxCar acquisition with MS2-level data-independent acquisition (DIA) ... More
Tailoring to Search Engines: Bottom-Up Proteomics with Collision Energies Optimized for Identification Confidence.
Authors:Révész Á,Milley MG,Nagy K,Szabó D,Kalló G,Csősz É,Vékey K,Drahos L
Journal:Journal of proteome research
PubMed ID:33284634
Bottom-up proteomics relies on identification of peptides from tandem mass spectra, usually via matching against sequence databases. Confidence in a peptide-spectrum match can be characterized by a score value given by the database search engines, and it depends on the information content and the quality of the spectrum. The latter ... More