HisPur™ Ni-NTA magnetische Beads

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Magnetbeads sind hochleistungsfähige Nickel-IMAC-Beads zur Affinitätsreinigung von His-getaggten Fusionsproteinen in manuellen oder automatisierten Formaten.

Merkmale von HisPur Ni-NTA Magnetbeads:

• Hohe Kapazität — Gleiche oder höhere Bindungskapazität gegenüber Ni-NTA Magnetbeads anderer Hersteller
• Geringe unspezifische Bindung — Die Bead-Oberfläche ist vorblockiert und das Protokoll bietet optimierte Puffer für die Aufreinigung
• Schnell — Protokoll ist in 1 Stunde abgeschlossen
• Skalierbar — Verarbeitung von Proben vom Mikroliter- bis zum Milliliterbereich
•Vielseitig — Proteinreinigung unter nativen oder denaturierenden Bedingungen
• Reagenz-kompatibel — Kann mit gängigen Zelllysereagenzien und einer Vielzahl von Pufferadditiven verwendet werden
• Mehrere Formate — Die Proteinbindung an die Beads und die nachgeschalteten Anwendungen können sowohl manuell als auch mit automatisierten Plattformen (z. B. Thermo Scientific KingFisher Geräten) durchgeführt werden

Die blockierte Magnetbead-Oberfläche wird mit der Nitrilotriessigsäure(NTA)-Chelatgruppe derivatisiert und mit zweiwertigen Nickelionen (Ni²⁺) beladen. Die immobilisierten Metallaffinitätschromatographie(IMAC)-Beads bieten eine hohe Bindungskapazität mit einem sehr niedrigen Hintergrund. Die HisPur Ni-NTA Magnetbeads können sowohl manuell mit einem Magnetstativ als auch für hohe Durchsätze mit automatisierten Plattformen wie den Thermo Scientific KingFisher Geräten verwendet werden.

HisPur Ni-NTA Magnetbeads werden für die Affinitätsaufreinigung kleiner Mengen sowie für das Screening mit hohem Durchsatz rekombinanter His-markierter Proteine verwendet. Die Polyhistidin-Markierung ist die häufigste Affinitätsmarkierung. Sie besteht in der Regel aus sechs aufeinanderfolgenden Histidinresten (6xHis). Diese markierten Proteine werden in verschiedenen Systemen, vor allem in Bakterien, überexprimiert und aus Zelllysaten wie jenen, die mit B-PER Bacterial Protein Extraction Reagents hergestellt werden, aufgereinigt. Die Aufreinigung His-markierter Proteine erfolgt mittels eines mit Nickel beladenen NTA-Chelats, das sich koordinativ an die Histidin-Seitenketten anlagert. Das NTA-Chelat umfasst vier Metall-Bindungsstellen, was ein geringes Auslaugen der Metallionen und eine hohe Bindungskapazität möglich macht. Das Protokoll für HisPur Ni-NTA Magnetic Beads wurde dahingehend optimiert, eine hohe Reinheit des isolierten His-markierten Proteins zu ermöglichen. Die Leistung ist genau so gut wie oder besser als die von Ni-NTA Magnetbeads anderer Hersteller.